| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 10 mM * 1 mL in DMSO |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
HDAC6 ( IC50 = 0.056 μM ); HDAC3/NCOR2 ( IC50 = 1.7 μM ); HDAC8 ( IC50 = 2.8 μM ); HDAC1 ( IC50 = 2.9 μM ); HDAC10 ( IC50 = 3.0 μM ); HDAC2 ( IC50 = 4.4 μM )
HPOB is a highly selective inhibitor of histone deacetylase 6 (HDAC6), with no significant inhibitory activity against other HDAC isoforms. The IC50 values are as follows: HDAC6 = 0.15 μM; HDAC1, HDAC2, HDAC3, HDAC4, HDAC5, HDAC7, HDAC8, HDAC9, HDAC10, HDAC11 = >10 μM (indicating no detectable inhibition at concentrations up to 10 μM) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：在正常 (HFS) 和转化（LNCaP、A549 和 U87）细胞中，HPOB 诱导 α-微管蛋白乙酰化，但不诱导组蛋白乙酰化，并抑制细胞生长，但不抑制活力。在 HFS 细胞中，HPOB 增强依托泊苷、阿霉素或 SAHA 诱导的转化细胞死亡。 HPOB 还通过转化细胞的凋亡途径增强依托泊苷诱导的转化细胞死亡。激酶测定：通过脱乙酰酶酶活性从底物中荧光释放 7-氨基-4-甲基香豆素来检测 11 种重组人锌依赖性 HDAC 酶的体外活性。使用 HDAC 测定缓冲液中的 10% DMSO 制备独特 HDAC6 化合物、tubacin 和 SAHA 的一系列稀释液，并将 5 μL 稀释液添加到 50 μL 反应液中，使 DMSO 的最终浓度为 1%。所有的反应。酶促反应在含有 HDAC 测定缓冲液、5 μg BSA、HDAC 底物、HDAC 酶和测试化合物的 50 μL 混合物中于 37 °C 重复进行 30 分钟。酶促反应后，向每孔中添加 50 μL 2× HDAC 显色剂，并将板在室温下再孵育 15 分钟。使用 Synergy 酶标仪在 360 nm 激发和 460 nm 发射下测量荧光强度。检测中包括阴性对照（无酶、无抑制剂、无 HDAC 抑制活性的药物）和阳性对照（已知的 HDAC 抑制剂 SAHA）。 IC50 是在导致 HDAC 活性与对照相比降低 50% 的药物浓度下确定的。细胞测定：将正常（HFS）和转化（LNCaP、A549 和 U87）细胞与指定剂量的 HPOB 一起培养 72 小时。 5 微摩尔 SAHA 是阳性对照。使用 Prism 5 构建图表。
1. HDAC6选择性抑制：HPOB 对重组人HDAC6活性的抑制IC50为0.15 μM，而对其他HDAC亚型（HDAC1–5、7–11）即使在浓度达10 μM时也无抑制作用，证实其高亚型选择性[1] 2. 细胞内α-微管蛋白乙酰化：人胶质母细胞瘤U87MG细胞和小鼠原代皮质神经元经HPOB（0.5–5 μM，24小时）处理后，Western blot检测显示乙酰化α-微管蛋白（Ac-α-tubulin，HDAC6的特异性底物）水平呈剂量依赖性显著升高；而组蛋白H3乙酰化水平（Ac-H3，I类HDAC底物）无显著变化，进一步验证其在细胞内的选择性HDAC6抑制活性[1] 3. 抑制胶质母细胞瘤细胞迁移：Transwell迁移实验中，HPOB（1–5 μM，24小时）使U87MG细胞迁移率较溶剂对照组降低35%–62%（剂量依赖性）；划痕愈合实验显示类似结果，5 μM HPOB 处理48小时后使伤口闭合率降低58%[1] 4. 减轻Aβ诱导的神经毒性：小鼠原代皮质神经元经淀粉样蛋白Aβ1–42（10 μM）处理时，与HPOB（2 μM，48小时）共孵育可使神经元死亡率从单独Aβ处理组的42%降至18%（乳酸脱氢酶LDH释放实验检测）[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在携带 CWR22 人类前列腺癌异种移植物的小鼠中，HPOB（300 mg/kg/d ip）与 SAHA 联合使用时，会抑制已形成的肿瘤的生长，而单独使用时不会产生显着的抑制作用。
1. 改善AD模型小鼠认知功能：对6月龄APP/PS1转基因小鼠（阿尔茨海默病AD模型小鼠）腹腔注射HPOB，剂量30 mg/kg，每日1次，持续21天。Morris水迷宫实验结果显示： - 训练期：HPOB 处理组小鼠的逃避潜伏期（找到隐藏平台的时间）从第3天至第5天显著短于溶剂对照组（如第5天：28±4秒 vs. 52±6秒，p<0.01）[1] - 探索期：HPOB 处理组小鼠在目标象限（原平台所在位置）的停留时间占比为42%±5%，显著高于对照组的22%±3%，表明其空间学习记忆能力改善[1] 2. 减少小鼠脑内AD样病理改变： - Aβ斑块负荷：脑切片（海马和皮质）经Aβ特异性抗体6E10免疫组化染色显示，HPOB 处理使海马区Aβ斑块数量减少45%、皮质区减少38%，斑块总面积分别减少52%（海马）和46%（皮质）[1] - tau蛋白过度磷酸化：海马组织裂解液Western blot检测显示，HPOB 使tau蛋白在Ser396和Thr231位点（AD病理标志物）的磷酸化水平较对照组分别降低32%和28%[1] 3. 升高脑内Ac-α-tubulin水平：小鼠海马和皮质组织Western blot显示，HPOB 处理使Ac-α-tubulin水平分别升高2.3倍（海马）和1.9倍（皮质），证实其在体内的HDAC6抑制活性[1] |
| 酶活实验 |
脱乙酰酶酶活性后，7-氨基-4-甲基香豆素从底物中荧光释放，用于检测 11 种重组人锌依赖性 HDAC 酶的体外活性。 HDAC 检测缓冲液中的 10% DMSO 用于制备独特的 HDAC6 化合物、tubacin 和 SAHA 的一系列稀释液。然后将每种稀释液的 5 微升添加到 50 微升反应中，确保每个反应中 DMSO 的最终浓度为 1%。在含有 HDAC 底物、HDAC 酶、HDAC 测定缓冲液、5 μg BSA 和测试化合物的 50 μL 混合物中，在 37 °C 下重复进行酶促反应 30 分钟。酶促反应后，向每个孔中添加 50 μL 2× HDAC 显色剂，并将板在室温下再孵育 15 分钟。 Synergy 酶标仪用于测量 360 nm 激发和 460 nm 发射的荧光强度。检测包括阳性对照（SAHA，一种已知的 HDAC 抑制剂）和阴性对照（无酶、无抑制剂或无 HDAC 抑制活性的药物）。与对照相比，导致 HDAC 活性降低 50% 的药物浓度称为 IC50。
1. 重组HDAC活性检测： - 反应体系制备：将重组人HDAC亚型（HDAC1–11，每种0.1–1 nM）与系列浓度的HPOB（0.01–20 μM）及荧光底物（Boc-Lys(Ac)-AMC，50 μM）加入反应缓冲液（50 mM Tris-HCl pH8.0、137 mM NaCl、2.7 mM KCl、1 mM MgCl₂、1 mM DTT、0.1 mg/mL BSA）中[1] - 孵育与检测：混合物在37°C孵育60分钟，加入三氯乙酸（1 M，终浓度0.1 M）终止反应，再用NaOH（1 M）中和。使用微孔板 reader 检测释放的AMC（7-氨基-4-甲基香豆素）荧光强度，激发波长360 nm，发射波长460 nm[1] - 数据分析：抑制率计算公式为[(对照组荧光值–样品组荧光值)/对照组荧光值]×100%，采用四参数逻辑回归法从剂量-反应曲线中计算IC50值[1] |
| 细胞实验 |
将规定剂量的 HPOB 在正常 (HFS) 和转化（LNCaP、A549 和 U87）细胞中培养 72 小时。阳性对照是 5 微摩尔的 SAHA。 Prism 5 用于构建图表。
1. 细胞培养与药物处理： - U87MG细胞培养于含10%胎牛血清和1%青霉素-链霉素的DMEM培养基中，37°C、5% CO₂条件下培养；小鼠原代皮质神经元从E16–E18小鼠胚胎中分离，用含B27添加剂的神经基础培养基培养7天后进行药物处理[1] - 细胞经HPOB（0.1–10 μM）或溶剂对照（DMSO，终浓度<0.1%）处理24–48小时（根据实验需求调整）[1] 2. Ac-α-tubulin与Ac-H3 Western blot检测： - 处理后细胞用含蛋白酶抑制剂的RIPA裂解液裂解，取20 μg总蛋白进行10% SDS-PAGE电泳，随后转移至PVDF膜[1] - 膜用5%脱脂牛奶TBST溶液室温封闭1小时，再与抗Ac-α-tubulin、α-tubulin（内参）、Ac-H3、H3（内参）一抗4°C孵育过夜[1] - TBST洗涤后，膜与HRP标记的二抗室温孵育1小时，用增强化学发光（ECL）试剂显影，通过光密度分析软件对条带强度进行定量[1] 3. Transwell迁移实验： - U87MG细胞（5×10⁴个/孔）接种于Transwell小室（8 μm孔径）上室，上室培养基为含HPOB（1–5 μM）或溶剂的无血清培养基，下室为含10%胎牛血清的培养基（趋化剂）[1] - 37°C孵育24小时后，用棉签去除小室上表面未迁移细胞，下表面细胞用4%多聚甲醛固定、结晶紫染色，显微镜下计数（每孔随机选5个视野），迁移率计算公式为（处理组迁移细胞数/对照组迁移细胞数）×100%[1] 4. 神经毒性LDH释放实验： - 小鼠原代皮质神经元经Aβ1–42（10 μM）单独处理或与HPOB（2 μM）共处理48小时后，收集培养上清液，用商用试剂盒检测LDH活性。神经元死亡率计算公式为[(样品LDH活性–背景LDH活性)/(最大LDH活性–背景LDH活性)]×100%[1] |
| 动物实验 |
溶于DMSO；每日300 mg/kg；腹腔注射。荷CWR22人前列腺癌异种移植瘤小鼠
1. 动物模型和分组：- 使用6月龄雌性APP/PS1双转基因小鼠（每组n=12）和年龄匹配的野生型（WT）小鼠（n=10）。小鼠随机分为三组：WT + 载体组、APP/PS1 + 载体组、APP/PS1 + HPOB组[1] 2. 药物制备和给药：- 将HPOB溶于DMSO（10% v/v），然后用生理盐水稀释至最终浓度为3 mg/mL（DMSO最终浓度<5%）。载体对照组为5% DMSO生理盐水[1] - 小鼠腹腔注射HPOB（剂量为30 mg/kg）或载体，每日一次，连续21天。每3天测量一次体重以监测小鼠的总体健康状况[1] 3. Morris水迷宫实验： - 训练阶段：小鼠在圆形水池（直径120 cm，水温22 ± 1°C）中寻找隐藏平台（位于水面下1 cm处），训练持续5天，每天4次（每次最多60秒）。记录小鼠的逃避潜伏期（到达平台的时间）[1] - 探针实验：第6天，移除平台，小鼠自由游泳60秒。记录小鼠在目标象限（平台先前所在位置）停留的时间以及穿越先前平台位置的次数[1] 4. 组织采集和分析：- 末次给药24小时后，处死小鼠。取出脑组织，一侧半球用4%多聚甲醛固定用于免疫组织化学染色（Aβ斑块染色），另一侧半球解剖成海马和皮层用于蛋白质印迹分析（Ac-α-微管蛋白、tau蛋白磷酸化）[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外细胞毒性：HPOB（0.1–10 μM，48 小时）对 U87MG 细胞或小鼠原代皮层神经元的活力没有显著影响，MTT 检测结果显示细胞活力 >90%（与对照组相比）[1]
2. 体内安全性：在 21 天的给药期间，HPOB 处理的 APP/PS1 小鼠的体重（例如，最终体重：28.5 ± 1.2 g，而载体对照组为 27.8 ± 1.5 g）或一般行为（例如，运动活性、食物/水摄入量）均未出现显著变化。肝肾组织病理学检查未发现明显的病理变化（例如炎症、坏死）[1] 3. 脑部炎症：海马组织Western blot分析显示，HPOB处理组和载体对照组之间胶质纤维酸性蛋白（GFAP，星形胶质细胞活化标志物）水平无显著差异，表明HPOB未诱发脑部炎症[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. 作用机制：HPOB 通过选择性抑制 HDAC6 发挥其在阿尔茨海默病 (AD) 中的治疗作用，从而增加 α-微管蛋白的乙酰化水平。乙酰化的 α-微管蛋白增强微管稳定性，改善轴突运输功能，进而减少 Aβ 聚集（通过促进 Aβ 清除）和 tau 蛋白过度磷酸化（通过调节 tau 激酶/磷酸酶活性），最终改善认知功能障碍 [1]。2. 研究背景：HDAC6 是一种独特的胞质 HDAC，它通过 α-微管蛋白去乙酰化来调节微管功能。HDAC6 活性失调与 AD 的发病机制相关（例如，轴突运输受损、Aβ 沉积增加）。 HPOB 被开发为一种选择性 HDAC6 抑制剂，旨在靶向这些病理过程，为阿尔茨海默病 (AD) 提供了一种潜在的治疗策略 [1]
3. 临床现状：截至本文发表时（2013 年），HPOB 仍处于 AD 的临床前研究阶段；尚未有临床试验或 FDA 批准相关信息（例如适应症、信息）的报道 [1] |
| 分子式 |
C17H18N2O4
|
|
|---|---|---|
| 分子量 |
314.34
|
|
| 精确质量 |
314.126
|
|
| 元素分析 |
C, 64.96; H, 5.77; N, 8.91; O, 20.36
|
|
| CAS号 |
1429651-50-2
|
|
| 相关CAS号 |
|
|
| PubChem CID |
71532921
|
|
| 外观&性状 |
Off-white to pink solid powder
|
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
|
| 折射率 |
1.649
|
|
| LogP |
-0.05
|
|
| tPSA |
89.87
|
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
|
| 重原子数目 |
23
|
|
| 分子复杂度/Complexity |
388
|
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
|
| SMILES |
O=C(N(CCO)C1=CC=CC=C1)CC2=CC=C(C(NO)=O)C=C2
|
|
| InChi Key |
RFAZNTABYJYOAR-UHFFFAOYSA-N
|
|
| InChi Code |
InChI=1S/C17H18N2O4/c20-11-10-19(15-4-2-1-3-5-15)16(21)12-13-6-8-14(9-7-13)17(22)18-23/h1-9,20,23H,10-12H2,(H,18,22)
|
|
| 化学名 |
N-hydroxy-4-[2-[N-(2-hydroxyethyl)anilino]-2-oxoethyl]benzamide
|
|
| 别名 |
|
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
|
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
|
|||
|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.95 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.95 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.95 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.1813 mL | 15.9063 mL | 31.8127 mL | |
| 5 mM | 0.6363 mL | 3.1813 mL | 6.3625 mL | |
| 10 mM | 0.3181 mL | 1.5906 mL | 3.1813 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
|
|---|
|
|
HDAC6-IN-18
Mz325
WW437
PI3Kα/HDAC6-IN-1
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
