Hyperoside   中文名称: 金丝桃苷

NF-κB; Natural occurring flavonoid; antioxidant

金丝桃苷（12.5–100 μM；6–24 小时）可抑制 MCF-7 和 4T1 细胞增殖 [2]。在乳腺癌细胞中，Hyperoside/金丝桃素（25-100 μM；24 小时）产生荧光透视 [2]。

---

对P.guepinii的抗真菌活性。[1]
P.guepinii在对照条件下显示出与E.nigrum相似的生长模式（图4）。当对照处理下的真菌覆盖琼脂表面时，CPT-10在第11天使菌丝生长减少了43.5%。暴露于CPT-10处理的菌落直到第20天才到达培养皿边缘。因此，据估计，CPT对P.guepinii的EC50约为10μg/mL。然而，CPT仅在≥125μg/mL时完全抑制了生长。这两种杀菌剂也成功地控制了P.guepini。三叶草苷和Hyperoside在抑制P.guepinii的能力上相似。在第11天，暴露于三氟甲磺酸-50或Hyperoside/金丝桃苷-50的菌落分别受到53.4%和53.8%的抑制。这两种黄酮类化合物对枸杞的EC50估计约为50μg/mL。然而，随着浓度增加到100μg/mL，黄酮类化合物比CPT更有效地抑制枸杞；三叶草甲素和金丝桃苷对P.guepinii的MIC很可能低于125μg/mL，这是CPT成功控制真菌的水平。

---

对Drechslera sp.的抗真菌活性[1]
在对照条件下，Drechslera sp.的生长速度比A.alternata、E.nigrum和P.guepinii慢，但对CPT、黄酮类化合物和杀菌剂的敏感性也比其他受试真菌更高（图5）。在所有实验水平下，CPT的抑制率均高于Bravo。当对照菌丝完全覆盖琼脂表面时，这种杀菌剂在第20天使菌丝生长减少了54.4%。因此，CPT对德雷氏菌的EC50为<10μg/mL。然而，CPT仅在≥100μg/mL时完全抑制真菌生长。三叶草素-50和金丝桃苷-50（50μg/mL时的三叶草素和金丝桃苷）在抑制德雷氏菌方面的能力相似。在第20天，暴露于三氟甲磺酸-50或金丝桃苷-50的菌落分别受到76.1%和74.3%的抑制。因此，两种黄酮类化合物对德雷氏菌的EC50值均<50μg/mL。高苷-100（100μg/mL的高苷）成功抑制了真菌的生长，到第28天几乎没有生长，而三氟甲磺酸-100（100微米g/mL的三氟甲磺酰）在整个实验过程中完全控制了真菌。CPT≥100μg/mL、三氟甲磺隆≥100μg/mL、金丝桃苷150μg/mL和马尼布完全抑制德雷司拉。

---

对F.avenaceum的抗真菌活性。[1]
在对照条件下，F.avenaceum在所有实验真菌中的生长速度最慢，但对CPT、黄酮类化合物和杀菌剂的敏感性稍低（图6）。Bravo在实验的前几天显示出对菌丝生长的有效抑制，但在后期效果较差。在第28天，经Bravo处理的菌丝体完全覆盖琼脂表面，与对照菌落相似。CPT-10比Bravo更有效，在实验的前几天对菌丝生长的抑制率为70-80%，在后期抑制率约为40%。CPT-30抑制菌丝生长率>60%。因此，CPT对F.avenaceum的EC50估计在10至30μg/mL之间。较高水平的CPT更有效地抑制了菌丝生长，但直到125μg/mL才实现完全抑制。三叶草素和高苷在100μg/mL时表现出相似的抑制模式，但三叶草素在50μg/mL时比高苷更有效。三叶草苷-50和高苷-50在实验开始时对F.avenaceum的效果不如Bravo和CPT-10，但在实验后期比Bravo更有效，与CPT-10相似。在第28天，当浓度为50μg/mL时，三氟甲磺隆和Hyperoside/金丝桃苷分别抑制真菌生长35.8%和31.6%，当浓度达到100μg/mL时分别抑制74.8%和72.6%。因此，估计这两种黄酮类化合物对F.avenaceum的EC50值在50至100μg/mL之间。150μg/mL的Hyperoside/金丝桃苷在前四周完全抑制了真菌生长，而相同水平的三氟甲磺酸在整个实验过程中完全控制了真菌。CPT≥125μg/mL和Maneb也完全抑制了F.avenaceum的生长。

---

半乳糖苷（槲皮素3-o-β-d-吡喃半乳糖苷）是一种具有抗炎、抗抑郁和抗癌作用的黄酮类糖苷。但目前尚不清楚它是否对癌症有影响。在此，使用不同浓度的Hyperoside/金丝桃苷来探索其在乳腺癌症细胞和皮下同种移植小鼠模型中的治疗潜力。CCK-8和伤口愈合试验表明，高氧苷抑制了密歇根癌症基金会-7（MCF-7）和4T1细胞的生存能力和迁移能力，同时增加了细胞的凋亡。实时定量PCR（qRT-PCR）和蛋白质印迹分析分别用于检测mRNA和蛋白质水平，结果显示B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）和X连锁凋亡抑制剂（XIAP）水平降低，Bax和切割的caspase-3水平升高。在探索了潜在机制后，我们发现金丝桃苷可以减少活性氧（ROS）的产生，从而抑制NF-κB信号通路的激活[2]。

金丝桃素/Hyperoside治疗（腹膜内注射；50 mg/kg；每两天一次，持续 18 天）可减少体内乳腺肿瘤的生长[2]。

---

Hyperoside可以抑制乳腺肿瘤的生长[2]
为了评估Hyperoside对体内肿瘤生长的影响，我们使用了皮下同种移植小鼠模型。如图5a-c所示，与对照组相比，金丝桃苷治疗组的平均肿瘤体积显著减小，每个治疗组肿瘤切片的H&E染色也证实了这一点（图5d）。我们进一步检测了Bax和切割的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的表达。如图5e、f所示，金丝桃苷/Hyperoside治疗组Bcl-2降低，而Bax和切割的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3升高。所有这些结果表明，当肿瘤注射金丝桃苷时，体内会诱导细胞凋亡，导致肿瘤体积减小。

抗真菌试验。[1]
A.alternata、E.nigrum、P.guepinii、Drechslera sp.和F.avenaceum分别于2001年和2002年从德克萨斯州纳科多奇斯种植的C.acuminata的感染叶和根中分离出来。菌株在24°C的马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基上培养和维持。
用两种标准的经典杀菌剂Bravo（活性成分百菌清）和Maneb（活性成分亚乙基双[二硫代氨基甲酸锰]）测试了从尖锐湿疣中分离出的CPT、三氟甲磺隆和Hyperoside对这些真菌的抑制能力。杀菌剂的浓度为制造商推荐的浓度（Bravo，10000μg/mL；Maneb，3000μg/mL）。除了对五种分离的病原体分别进行阴性对照（0）和两种杀菌剂作为阳性对照外，还对每种真菌进行了七种浓度的CPT测试，并分别对P.guepinii、Drechslera sp.和F.avenaceum进行了三种水平的三氟甲磺草素和Hyperoside测试（表1）。分别以50、100和150μg/mL的浓度施用三叶草素和Hyperoside。对于所有培养物，在熔融的（50°C）马铃薯葡萄糖琼脂（Difco）中制备最终浓度，并将10 mL等分试样倒入培养皿（直径85 mm）中。在倾倒后24小时内，每个板都接种了五种真菌中的一种。从2周龄菌落的活跃生长前沿切下一个5×5mm的菌丝塞，然后将接种物面朝下放置在每个处理板的中心，并在24°C下培养。对于所有实验，每种处理都接种了五个复制板。
每天观察每个平板上的菌丝生长，在前两周记录在透明薄膜上，然后在第16、20、23和28天记录。沿四个垂直径向测量菌落半径。四次测量的平均值被计算为每个板上的生长速率。根据每种处理的五个重复计算平均值和标准误差。对于每种真菌，估计每种化合物的EC50和MIC值。

细胞活力测定[2]
细胞类型： MCF-7 和 4T1 细胞
测试浓度： 12.5、25、50、75 或 100 µM
孵育时间： 6、12，ROS的产生抑制NF-κB信号染料的激活[2]。或24小时
实验结果：以时间和浓度依赖性方式抑制细胞生长。

---

细胞凋亡分析[2]
细胞类型： MCF-7 和 4T1 细胞
测试浓度： 25、50 和 100 µM
孵育持续时间：24小时
实验结果：mRNA中Bax、cleaved caspase-3和cleaved PARP的表达增加，表达减少Bcl-2 和蛋白质水平。

---

细胞活力检测[2]
采用Cell Counting Kit-8 检测金丝桃苷对MCF-7细胞和4T1细胞的细胞毒性程度。每组设五个复孔，当细胞密度达到5×10³个/mL（37°C，12小时）时，分别按不同时间点（6、12或24小时）和正常对照组添加金丝桃苷（50 μM），以及不同浓度金丝桃苷（12.5、25、50、75或100 μM）处理24小时。加入10 μL（5 mg/mL）CCK-8试剂孵育2.5小时。用酶标仪在450 nm波长处读取光密度（OD）值。每个实验重复三次。数据以均值±标准差表示。

---

细胞内活性氧检测[2]
当细胞密度达到1×10⁶个/mL时，分装至6孔板培养12小时。向细胞板中加入指定浓度的金丝桃苷处理24小时。处理后按前述方法，用预冷磷酸盐缓冲液（PBS）洗涤细胞，用细胞渗透性荧光探针2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）在37°C避光孵育30分钟，再用PBS洗涤去除胞外DCFH-DA，使其转化为荧光产物二氯荧光素（DCF）。最后通过流式细胞术获取数据。

---

细胞凋亡检测[2]
采用Annexin V-FITC（异硫氰酸荧光素）和碘化丙啶（PI）双染法进行凋亡实验。使用MCF-7细胞和4T1细胞，先在6孔板中培养12小时，然后加入不同浓度金丝桃苷（25、50或100 μM）处理24小时。以1200转/分钟离心8分钟，用冷PBS洗涤三次，重悬于400 μL结合缓冲液中。避光条件下加入Annexin V-FITC（5 μL）和PI（5 μL），25°C孵育20分钟。通过流式细胞术对收集的悬浮细胞和贴壁细胞进行分选分析。

---

划痕迁移实验[2]
如先前研究所述[24]，将MCF-7细胞和4T1细胞接种于6孔板。当细胞融合度达80%时，用无菌200 μL塑料移液枪头划痕，PBS洗涤两次后，加入含不同浓度金丝桃苷的新鲜培养基，分别在不同时间点（6、12或24小时）观察。血清减量的Opti-MEM I培养基购自xxx公司。用倒置显微镜记录划痕闭合图像。

---

蛋白质印迹分析[2]
用前述浓度的金丝桃苷、NAC和过氧化氢处理细胞24小时，PBS洗涤三次后收集细胞。使用含RIPA裂解液、磷酸酶抑制剂和PMSF的混合液提取总蛋白。采用Pierce BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。用10% SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳后，120 V电压下转印至PVDF膜2小时。5%脱脂牛奶封闭3小时，一抗（1:1000）4°C孵育过夜，TBST洗涤三次（每次10分钟），二抗（1:5000）25°C孵育2小时。最后使用Vilber Lourmat Fusion FX7检测系统获取蛋白图像。以β-肌动蛋白作为内参。

---

免疫荧光染色[2]
当4T1细胞密度达1×10⁵个/mL时，接种于含玻片的6孔板中。按指定浓度加入金丝桃苷处理24小时后进行免疫荧光染色。4%多聚甲醛固定细胞，PBS洗涤三次，山羊血清封闭30分钟，一抗4°C孵育过夜，避光条件下用FITC标记的驴抗兔IgG（H+L）二抗孵育2小时。DAPI染核后，用激光共聚焦显微镜采集图像。

动物/疾病模型： 注射4T1细胞的balb/c（Bagg白化）小鼠[2]
剂量： 50 mg/kg
给药途径： 腹腔注射（ip）；50 mg/kg；每两天一次，持续18天
实验结果： 与对照组相比，平均肿瘤体积缩小。Bcl-2表达降低，而bax和caspase-3的裂解增加。

---

体内实验[2]
使用8-10周龄（25-30 g）的balb/c小鼠。实验结束后，小鼠饲养一周。收集约1.0 × 10⁷个4T1细胞，并悬浮于100 μL PBS中。然后将这些细胞注射到小鼠的第四乳腺组织中。小鼠饲养12天后随机分为三组，分别进行以下给药：金丝桃苷组（50 mg/kg，腹腔注射，每两天一次，持续18天）、NAC组（100 mg/kg，腹腔注射，每两天一次，持续18天）和生理盐水对照组。每两天测量一次小鼠体重和肿瘤体积。肿瘤体积（V）的计算公式为：V = 0.5 × 长 × 宽²。给药结束后处死小鼠，并用4%多聚甲醛进行组织切片（H&E染色）。

[1]. Antifungal activity of camptothecin, trifolin, and hyperoside isolated from Camptotheca acuminata. J Agric Food Chem. 2005 Jan 12;53(1):32-7.

[2]. Hyperoside Induces Breast Cancer Cells Apoptosis via ROS-Mediated NF-κB Signaling Pathway. Int J Mol Sci. 2019 Dec 24;21(1):131.

槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷是一种槲皮素O-糖苷，其结构为槲皮素在3位连接一个β-D-半乳糖残基。它从细叶蒿（Artemisia capillaris）中分离得到，具有保肝活性。它既是一种保肝剂，也是一种植物代谢产物。它是一种四羟基黄酮、单糖衍生物、β-D-半乳糖苷和槲皮素O-糖苷。
异槲皮苷正在临床试验NCT04622865（马西替尼联合异槲皮苷和最佳支持治疗中重度COVID-19住院患者的疗效研究）中进行研究。
据报道，金丝桃苷存在于茶树（Camellia sinensis）、卡罗来纳老鹳草（Geranium carolinianum）和其他一些有相关数据的生物体中。
另见：越橘（部分）；三叶山楂（Menyanthes trifoliata）叶（部分）；单子山楂（Crataegus monogyna）花序（部分）。

---

喜树（Camptotheca acuminata）的主要真菌病害是叶斑病和根腐病，限制了喜树的栽培，因为喜树碱（CPT）是一种很有前景的抗癌和抗病毒生物碱。生物测定表明，从喜树中分离得到的纯喜树碱和黄酮类化合物（三叶苷和金丝桃苷）在体外能有效控制多种真菌病原体，包括链格孢菌（Alternaria alternata）、黑腐病菌（Epicoccum nigrum）、格氏拟盘多孢菌（Pestalotia guepinii）、德氏菌属（Drechslera sp.）和燕麦镰刀菌（Fusarium avenaceum），尽管这些化合物在植物体内的抗真菌活性有限。喜树碱在10-30 μg/mL浓度下可抑制菌丝生长约50%（EC50），在75-125 μg/mL浓度下可完全抑制菌丝生长。黄酮类化合物在 50 μg/mL 浓度下疗效不如 CPT，尤其是在治疗后 20 天内，但在 100 或 150 μg/mL 浓度下疗效更佳。CPT、三叶苷和金丝桃苷可能作为开发杀菌剂的先导化合物。[1] 总之，我们的实验表明，金丝桃苷可通过抑制 NF-κB 信号通路并激活 Bax-caspase-3 轴，进而通过 ROS 诱导的细胞凋亡发挥抗癌作用。这些数据表明，金丝桃苷具有作为抗乳腺癌药物的巨大潜力，值得进一步研究。[2]

C21H20O12

464.3763

464.095

482-36-0

5281643

Light yellow to yellow solid

1.9±0.1 g/cm3

872.6±65.0 °C at 760 mmHg

225-226ºC

307.5±27.8 °C

0.0±0.3 mmHg at 25°C

1.803

1.75

210.51

8

12

4

33

758

5

O1[C@]([H])([C@@]([H])([C@]([H])([C@]([H])([C@@]1([H])C([H])([H])O[H])O[H])O[H])O[H])OC1C(C2=C(C([H])=C(C([H])=C2OC=1C1C([H])=C([H])C(=C(C=1[H])O[H])O[H])O[H])O[H])=O

OVSQVDMCBVZWGM-DTGCRPNFSA-N

InChI=1S/C21H20O12/c22-6-13-15(27)17(29)18(30)21(32-13)33-20-16(28)14-11(26)4-8(23)5-12(14)31-19(20)7-1-2-9(24)10(25)3-7/h1-5,13,15,17-18,21-27,29-30H,6H2/t13-,15+,17+,18-,21+/m1/s1

2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-3-[(2S,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxychromen-4-one

Hyperoside; 482-36-0; Hyperin; Hyperosid; Hyperozide; Quercetin-3-O-galactoside; Quercetin-3-galactoside; quercetin galactoside;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~125 mg/mL (~269.18 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

---

View More

配方 3 中的溶解度: 10 mg/mL (21.53 mM) in 50% PEG300 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶.
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。