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Ilexsaponin A1

别名: 毛冬青皂苷A;冬青皂苷甲;毛冬青皂苷甲;毛冬青皂苷甲1;琼脂皂素A.;毛冬青皂苷 A1
目录号: V34362 纯度: ≥98%
COA 产品数据 产品说明书 SDS
Ilexsaponin A 是从 Rubesia rubescens oryzae 的根中提取的，通过抗凋亡途径减轻缺血再灌注引起的心肌损伤。
Ilexsaponin A1 CAS号: 108524-93-2
产品类别: Natural Products
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
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产品描述
从水稻（Rubesia rubescens oryzae）根中提取的冬青皂苷A，可通过抗凋亡途径减轻缺血再灌注引起的心肌损伤。冬青皂苷A可缩小心肌梗死面积，降低血清中乳酸脱氢酶（LDH）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）和肌酸激酶同工酶（CK-MB）的水平，提高细胞活力，并抑制缺氧/复氧心肌细胞的凋亡。
冬青皂苷A是一种三萜皂苷，分离自毛冬青（Ilex pubescens Hook. et Arn.，又名毛冬青）的根部。毛冬青在中国南方传统上用于治疗心血管疾病。尽管该植物中的几种皂苷已显示出抗炎和抗肿瘤作用，但此前人们对其心血管保护作用知之甚少。本研究利用体内大鼠模型和体外缺氧/复氧心肌细胞模型，研究了伊来沙波宁A对心肌缺血再灌注损伤的保护作用[1]。
生物活性&实验参考方法
靶点
Ilexaponin A modulates the apoptotic pathway. It reduces pro‑apoptotic proteins (caspase‑3, cleaved caspase‑3, Bax) and increases anti‑apoptotic protein Bcl‑2. It also activates the PI3K/Akt pathway by increasing the expression of p‑Akt (without affecting total Akt) [1].
体外研究 (In Vitro)
在缺氧/复氧心肌细胞中，冬青皂苷A显著降低了促凋亡蛋白Bax、cleaved caspase-3和caspase-3的表达，并提高了抗凋亡蛋白bcl-2的表达。研究表明，冬青皂苷A治疗可上调心脏缺血/再灌注和缺氧/复氧动物模型中p-Akt的表达[1]。
- 冬青皂苷A预处理（10、50、250 μg/ml，处理24小时）可提高新生大鼠心肌细胞在缺氧（4小时）/复氧（4小时）（H/R）条件下的细胞活力。仅进行H/R处理的组的细胞活力为对照组的45.10 ± 3.10%。在浓度分别为 10、50 和 250 μg/ml 的 Ilexaponin A 处理后，细胞活力分别增加至 56.09 ± 3.95 %, 64.60 ± 4.16 %, 78.03 ± 2.56 %, 呈剂量依赖性 [1]。
- Ilexaponin A 预处理可降低 H/R 处理的心肌细胞的凋亡，如 TUNEL 检测所示。与仅进行H/R处理的组相比，所有测试浓度的伊乐沙波宁A均显著降低了细胞凋亡指数（TUNEL阳性细胞核百分比）[1]。Western blot分析显示，在H/R处理的心肌细胞中，伊乐沙波宁A预处理降低了caspase-3、cleaved caspase-3和Bax的表达水平，同时增加了Bcl-2的表达。这些作用呈剂量依赖性。此外，伊乐沙波宁A还增加了H/R处理细胞中p-Akt的表达水平（总Akt水平未发生改变）[1]。
体内研究 (In Vivo)
体重为 280–320 克的雄性 Sprague-Dawley 大鼠在暴露于 ilexsaponin A (10 或 40 mg/kg) 时表现出剂量依赖性的心肌梗死面积减少 [1].
- 在接受心肌缺血 (30 分钟) 后进行再灌注 (4 小时) 的雄性 Sprague-Dawley 大鼠中，Ilexaponin A（10 mg/kg 或 40 mg/kg，在结扎前 10 分钟给予）显著减少了心肌梗死面积。 I/R组的IS/AAR比值为41.55±8.99%，低剂量伊来沙波宁A组为25.89±9.33%，高剂量伊来沙波宁A组为20.49±6.55%，显示出剂量依赖性的保护作用[1]。
- 伊来沙波宁A治疗显著降低了血清中心肌损伤标志物的水平：低剂量组和高剂量组的CK-MB均降低；与 I/R 组相比，高剂量 (40 mg/kg) 组的 LDH 和 AST 显著降低 [1]。
- I/R 大鼠心脏组织的蛋白质印迹分析显示，伊来沙波宁 A 降低了 caspase-3 和 Bax 的表达，增加了 Bcl-2 的表达，并增加了 p-Akt 的表达（总 Akt 未发生变化）[1]。
细胞实验
原代新生大鼠心肌细胞培养：取1-3日龄大鼠心脏，分离心肌细胞，接种后置于37℃、5% CO₂的湿润培养箱中培养。48小时后，更换新鲜DMEM培养基，继续培养24小时[1]。
- 缺氧/复氧（H/R）模型：将细胞置于缺氧/缺血培养箱（模块化培养箱）中，在37℃、5% CO₂和95%氮气的湿润环境下培养4小时。复氧处理方法为：将细胞置于含10%胎牛血清的DMEM培养基中，在37℃、5% CO₂条件下培养4小时[1]。
- 细胞活力（MTT法）：H/R处理后，加入MTT并测定光密度值。细胞活力通过将样本的光密度值除以对照组的光密度值来计算[1]。
- 细胞凋亡检测（TUNEL 法）：使用原位细胞死亡检测试剂盒，并按照制造商的说明进行操作。细胞凋亡指数表示为阳性染色凋亡心肌细胞的数量除以心肌细胞总数[1]。
- Western blot 分析：将心肌细胞样本在冰上用裂解缓冲液裂解 20 分钟，然后在 4°C 下以 12,000 rpm 离心 15 分钟。定量蛋白质浓度。取 30 μg 总蛋白进行 SDS-PAGE 电泳分离，并将蛋白转移至 PVDF 膜上。将膜与针对 caspase-3、cleaved caspase-3、Bcl-2、Bax、p-Akt、Akt 和 actin 的一抗孵育，随后与二抗孵育。采用增强化学发光和定量数字成像系统进行免疫检测[1]。
动物实验
大鼠心肌缺血/再灌注 (I/R) 模型：雄性 Sprague-Dawley 大鼠（280-320 g）用 3% 戊巴比妥钠（50 mg/kg）麻醉。切开左侧胸部使心脏暴露，并在左前降支冠状动脉周围放置一根带有硅橡胶静脉套管的 6-0 丝线。维持缺血 30 分钟（通过心肌苍白和 ST 段抬高确认），然后拔出套管，进行 4 小时的再灌注。假手术组动物接受相同的手术操作，但不结扎缝线 [1]。
- 给药：将伊来沙波宁 A溶解于 DMSO 中，然后用生理盐水稀释至所需浓度。在结扎左前降支冠状动脉前 10 分钟给予药物。剂量分别为 10 mg/kg（低剂量）和 40 mg/kg（高剂量）。假手术组和缺血/再灌注组仅给予溶剂[1]。
- 梗死面积测定：再灌注结束后，以恒定压力（80 mmHg）用伊文思蓝灌注心脏。将左心室切成 2-3 mm 厚的切片。将未染色的危险区域（AAR）置于 1% TTC 溶液（0.1 mol/L 磷酸盐缓冲液，pH 7.4）中，于 37 °C 孵育 30 分钟。梗死心肌呈淡白色，非梗死心肌呈深红色。梗死面积以AAR百分比（IS/AAR）表示[1]。
- 血清标志物测定：从躯干采集血液，在室温下放置30分钟，然后在4℃下以4500 g离心15分钟。使用商业试剂盒测定血清中CK-MB、LDH和AST的水平[1]。
参考文献

[1]. Ilexsaponin A attenuates ischemia-reperfusion-induced myocardial injury through anti-apoptotic pathway. PLoS One. 2017 Feb 9;12(2):e0170984.
其他信息
据报道，冬青皂苷A1存在于毛冬青（Ilex pubescens）和玉竹（Mussaenda pubescens）中，相关数据可供参考。
- 背景：冬青皂苷A是从毛冬青（Ilex pubescens）根中分离得到的代表性皂苷之一。经高效液相色谱（HPLC）检测，其纯度>95%。其结构通过高分辨率电喷雾质谱（HR-ESI-MS）、红外光谱（IR）、紫外光谱（UV）、核磁共振氢谱（¹H NMR）和碳谱（¹³C NMR）确定[1]。
- 机制：冬青皂苷A通过抑制细胞凋亡（降低caspase-3、cleaved caspase-3和Bax的表达，并增加Bcl-2的表达）和激活PI3K/Akt通路（增加p-Akt的表达）发挥心脏保护作用，对抗缺血再灌注损伤。体内和体外实验结果均支持抗凋亡机制[1]。
- 潜在适应症：伊来沙波宁A可能具有作为治疗心肌缺血/再灌注损伤的新型心脏保护剂的潜力[1]。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C36H56O11
分子量
664.8233
精确质量
664.382
CAS号
108524-93-2
PubChem CID
72163175
外观&性状
White to off-white solid
密度
1.4±0.1 g/cm3
沸点
788.1±60.0 °C at 760 mmHg
闪点
240.1±26.4 °C
蒸汽压
0.0±6.2 mmHg at 25°C
折射率
1.611
LogP
5.11
tPSA
194
氢键供体(HBD)数目
7
氢键受体(HBA)数目
11
可旋转键数目(RBC)
5
重原子数目
47
分子复杂度/Complexity
1320
定义原子立体中心数目
16
SMILES
O([H])[C@]1(C([H])([H])[H])[C@]([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[C@]2(C(=O)O[C@@]3([H])[C@@]([H])([C@]([H])([C@@]([H])([C@@]([H])(C([H])([H])O[H])O3)O[H])O[H])O[H])C([H])([H])C([H])([H])[C@]3(C([H])([H])[H])C(=C([H])C([H])([H])[C@]4([H])[C@@]5(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]([H])([C@@](C(=O)O[H])(C([H])([H])[H])C5([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@]43C([H])([H])[H])O[H])[C@@]21[H]
InChi Key
AWFZJSUJFSUBQU-MOJLLMCOSA-N
InChi Code
InChI=1S/C36H56O11/c1-18-9-14-36(30(44)47-28-26(41)25(40)24(39)20(17-37)46-28)16-15-32(3)19(27(36)35(18,6)45)7-8-21-31(2)12-11-23(38)34(5,29(42)43)22(31)10-13-33(21,32)4/h7,18,20-28,37-41,45H,8-17H2,1-6H3,(H,42,43)/t18-,20-,21-,22-,23+,24-,25+,26-,27-,28+,31-,32-,33-,34-,35-,36+/m1/s1
化学名
(3S,4R,4aR,6aR,6bS,8aS,11R,12R,12aS,14aR,14bR)-3,12-dihydroxy-4,6a,6b,11,12,14b-hexamethyl-8a-[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxycarbonyl-1,2,3,4a,5,6,7,8,9,10,11,12a,14,14a-tetradecahydropicene-4-carboxylic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~100 mg/mL (~150.42 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.76 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。
配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.76 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。
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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.76 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.5042 mL 7.5208 mL 15.0417 mL
5 mM 0.3008 mL 1.5042 mL 3.0083 mL
10 mM 0.1504 mL 0.7521 mL 1.5042 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
/
计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
+
+
+
计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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