| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
| 靶点 |
INH6 dual-targets Nek2 (NIMA-related kinase 2) and Hec1 (Highly expressed in cancer 1), with a Ki value of 0.8 μM for inhibiting Nek2-Hec1 protein interaction, an IC50 of 1.5 μM for suppressing Nek2 kinase activity, and antiproliferative IC50 values ranging from 0.9 μM to 2.1 μM in various cancer cell lines [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
许多人类癌症过度表达癌基因 Hec1。有丝分裂途径的 Hec1/Nek2 功能被小分子 INH（Nek2/Hec1 抑制剂）灭活，该小分子以 Hec1 及其调节剂 Nek2 为目标。该过程由蛋白质降解介导，最终导致染色体错误分离和细胞死亡。在用 INH6 处理的细胞中观察到有丝分裂数量增加和多极纺锤体构型增加。表达染色体标记蛋白 H2B-GFP 的 HeLa 细胞用 INH6 处理后，观察到染色体错位率较高。 INH6 处理的细胞表现出渐进的形态变化，表明细胞正在死亡，例如膜鼓泡，FACS 分析和细胞周期分析进一步支持了这一点。治疗后 72 小时，20% 的 INH6 处理细胞发生凋亡[1]。
在人类癌细胞系（HeLa、MCF-7、A549、HCT116）中，INH6 抑制细胞增殖，72小时处理后的IC50值分别为：HeLa（0.9 μM）、MCF-7（1.2 μM）、A549（1.5 μM）、HCT116（2.1 μM）[1] - 1 μM INH6 处理24小时后，72%的HeLa细胞发生G2/M期细胞周期阻滞，表现为纺锤体形成异常和着丝粒功能障碍 [1] - INH6（1-2 μM）剂量依赖性诱导MCF-7细胞凋亡，1.5 μM浓度处理48小时后，膜联蛋白V阳性细胞比例从3%升至48%，伴随半胱天冬酶-3激活和PARP切割 [1] - 免疫共沉淀检测显示，1 μM INH6 使Nek2-Hec1复合物破坏80%，减少HeLa细胞着丝粒处两者的共定位 [1] - 0.5-2 μM INH6 抑制A549细胞克隆形成，1.2 μM浓度时抑制率达75%，而溶媒处理组仅为20% [1] - Western blot分析显示，1 μM INH6 使HCT116细胞中磷酸化Nek2（p-Nek2）表达下调65%，γH2AX（DNA损伤标志物）水平上调2.3倍 [1] |
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| 酶活实验 |
Nek2-Hec1相互作用抑制实验：重组Nek2和Hec1蛋白与系列浓度的 INH6（0.1-10 μM）25°C孵育1小时。将混合物加入抗Hec1抗体包被的微量滴定板，HRP标记的抗Nek2抗体检测结合的Nek2，计算得相互作用抑制的Ki值为0.8 μM [1]
- Nek2激酶活性实验：重组Nek2激酶与ATP（10 μM）、荧光标记肽底物（源自Hec1）及系列浓度的 INH6（0.2-20 μM）37°C孵育60分钟。荧光共振能量转移（FRET）检测磷酸化底物，Nek2抑制的IC50为1.5 μM [1] - 表面等离子体共振（SPR）实验：Hec1蛋白固定于传感器芯片，注射系列浓度的 INH6（0.3-15 μM）并测量结合亲和力。INH6 与Hec1的解离常数（Kd）为0.9 μM，与Nek2的Kd为1.3 μM [1] |
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| 细胞实验 |
抗增殖实验：癌细胞（HeLa、MCF-7、A549、HCT116）接种于96孔板（3×103个细胞/孔），用系列浓度的 INH6（0.1-5 μM）处理72小时。MTT法评估细胞活力，从剂量-反应曲线计算IC50值 [1]
- 细胞周期分析：HeLa细胞用 INH6（0.5-2 μM）处理24小时，70%乙醇固定，碘化丙啶染色，流式细胞术定量G2/M期比例 [1] - 凋亡实验：MCF-7细胞用 INH6（1-2 μM）处理48小时，用膜联蛋白V-FITC/碘化丙啶染色，流式细胞术分析。Western blot检测半胱天冬酶-3/PARP切割 [1] - 克隆形成实验：A549细胞用 INH6（0.5-2 μM）处理24小时后，接种于6孔板（1×103个细胞/孔），孵育14天。结晶紫染色计数菌落，相对于溶媒对照组计算抑制率 [1] - 免疫共沉淀实验：HeLa细胞用 INH6（1 μM）处理16小时，RIPA缓冲液裂解，裂解液用抗Hec1抗体免疫沉淀。免疫复合物用抗Nek2抗体检测复合物破坏情况 [1] |
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| 动物实验 |
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
INH6 (0.1-5 μM) showed low cytotoxicity in normal human foreskin fibroblasts (NHF), with cell viability > 90% after 72 hours of treatment at concentrations up to 2 μM [1]
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| 参考文献 | |||
| 其他信息 |
INH6 is a novel small-molecule inhibitor targeting the Nek2-Hec1 axis, a key regulatory pathway in mitotic progression [1]
Its mechanism of action involves dual effects: binding to Nek2 and Hec1 to disrupt their interaction, and directly inhibiting Nek2 kinase activity, thereby inducing mitotic catastrophe, G2/M phase arrest, and apoptosis in cancer cells [1] INH6 exhibits broad-spectrum antiproliferative activity against various solid tumor cell lines, with favorable selectivity for cancer cells over normal cells [1] It has potential as a lead compound for the development of mitosis-targeted anticancer drugs for the treatment of cervical, breast, lung, and colorectal cancers [1] |
| 分子式 |
C19H18N2OS
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|---|---|---|
| 分子量 |
322.42
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| 精确质量 |
322.113
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| CAS号 |
1001753-24-7
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
7918451
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.647
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| LogP |
5.7
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| tPSA |
70.23
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
23
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| 分子复杂度/Complexity |
398
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
WCZLNJTXHZPHLM-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H18N2OS/c1-12-9-13(2)17(14(3)10-12)16-11-23-19(20-16)21-18(22)15-7-5-4-6-8-15/h4-11H,1-3H3,(H,20,21,22)
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| 化学名 |
N-[4-(2,4,6-Trimethylphenyl)-1,3-thiazol-2-yl]benzamide
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.1015 mL | 15.5077 mL | 31.0154 mL | |
| 5 mM | 0.6203 mL | 3.1015 mL | 6.2031 mL | |
| 10 mM | 0.3102 mL | 1.5508 mL | 3.1015 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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