Inulin

别名: N/A 菊粉; 吲酮; 菊糖; 阿兰粉; 菊粉 (酶合成);Inulin 菊粉;Inulin from dahlia tubers 菊糖;菊粉;菊糖(菊粉);菊糖,BR;菊淀粉;菊糖 ; 松叶菊粉;土木香粉;旋复花粉
目录号: V2099 纯度: ≥98%
菊粉(菊粉和氯化钠)是一种水溶性淀粉/贮藏多糖,存在于许多植物的块茎和根中。
Inulin CAS号: 9005-80-5
产品类别: Endogenous Metabolite
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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纯度: ≥98%

产品描述
菊粉(菊粉和氯化钠)是一种水溶性淀粉/贮藏多糖,存在于许多植物的块茎和根中。由于它可水解为果糖,因此被归类为果聚糖,这是一种不易消化的碳水化合物。菊粉(20 克/天和 40 克/天)导致粪便中双歧杆菌计数显着增加。菊粉对促进健康的双歧杆菌属的数量产生优先刺激作用,同时将潜在病原体(大肠杆菌、梭菌)的数量保持在相对较低的水平。菊粉与双歧杆菌联合对异常隐窝病灶 (ACF) 的抑制作用比两者单独给药更有效,对小 ACF 的抑制率达到 80%。
菊粉是一种天然存在的多糖,属于果聚糖类,主要由通过β-(2→1)糖苷键连接的果糖单元组成,并常以葡萄糖残基结尾。它提取自菊苣、大蒜、洋姜等多种植物的块茎和根部,是一种在上消化道中抵抗消化酶分解的可溶性膳食纤维。历史上,菊粉曾作为诊断试剂用于测量肾小球滤过率(GFR)以评估肾功能。目前,它因其益生元特性而被广泛认可,能够选择性地促进肠道中有益细菌(如双歧杆菌和乳杆菌)的生长。
生物活性&实验参考方法
靶点
Endogenous Metabolite; As a prebiotic fiber, inulin does not have a specific protein target in the host. Instead, its primary “target” is the gut microbiota ecosystem. It is selectively utilized by beneficial bacterial genera, including Bifidobacterium, Lactobacillus, Phascolarctobacterium, and Blautia. Through microbial fermentation, it indirectly influences the production of Short-Chain Fatty Acids (SCFAs), particularly butyrate, propionate, and acetate, which act as signaling molecules and energy sources for host cells. Consequently, inulin also indirectly modulates immune cells and metabolic pathways.
体外研究 (In Vitro)
菊粉导致(20克/天和40克/天)粪便中双歧杆菌计数显着增加。菊粉对促进健康的双歧杆菌属的数量产生优先刺激作用,同时将潜在病原体(大肠杆菌、梭菌)的数量保持在相对较低的水平。菊粉与双歧杆菌联合对异常隐窝病灶 (ACF) 的抑制作用比两者单独给药更有效,对小 ACF 的抑制率达到 80%。菊粉是由一组直链果糖分子组成,聚合度(DP)在3到65之间,可以分馏成可缓慢发酵的长链级分(DP范围在10到65,平均25)或由低聚果糖制成的可快速发酵的部分(DP 范围为 3 至 8,平均为 4)。与对照组相比,长链菊粉与短链低聚果糖组合导致大鼠盲肠、结肠和粪便中球状梭菌-直肠真杆菌群的细菌数量较多,而单独使用 OF 不会影响盲肠、结肠或粪便中的该细菌群。
体外促进肠道有益菌(双歧杆菌属)生长:1%(w/v)菊粉(Inulin)厌氧培养48小时后,双歧杆菌数量较对照组增加约2.5倍[2]
- 浓度依赖性抑制人结肠癌细胞(HT-29)增殖:5 mg/mL 菊粉(Inulin)处理72小时后,细胞活力降低约40%,对正常结肠上皮细胞(NCM460)无显著细胞毒性(存活率>90%)[3]
- 抑制LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞炎症反应:2 mg/mL 菊粉(Inulin)使TNF-α和IL-6分泌分别减少约35%和30%,iNOS mRNA表达下调约40%[5]
- 体外促进人粪便微生物群产生短链脂肪酸(SCFAs):5%(w/v)菊粉(Inulin)发酵72小时后,乙酸、丙酸和丁酸水平分别增加约1.8倍、2.0倍和2.2倍[2]
体内研究 (In Vivo)
炎症和高脂血症可导致动脉粥样硬化。益生元菊粉已被证明能有效降低炎症和血脂水平。利用高脂饮食诱导的小鼠模型,本研究旨在探讨特征性肠道菌群及其代谢产物是否介导菊粉干预对动脉粥样硬化的影响,并阐明其具体机制[4]。
高血糖引起的糖尿病是糖尿病肾病的主要病因。新出现的证据表明,补充菊粉给药后,大豆异黄酮的血浆浓度会升高,大豆异黄酮是一种具有公认抗糖尿病特性的物质。该研究包括36只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,分为两组:非糖尿病和糖尿病,由2型糖尿病诱导(高脂肪饮食+两次腹膜内注射链脲佐菌素)。每个队列进一步分为三个亚组(n=6):对照组、异黄酮治疗组和异黄酮加菊粉治疗组。测量尾部血糖和酮水平。终止后,直接从心脏抽取血样进行尿素、肌酐和HbA1c/HbF分析。每只大鼠一个肾接受组织学(-E)和免疫组织化学评估(抗AQP1、抗AQP2、抗AVPR2、抗SLC22A2、抗ACCα、抗SREBP-1)。剩下的肾脏进行了脂肪酸甲酯分析。结果显示,在患有诱导型2型糖尿病的对照大鼠中,水分摄入、身体和肾脏质量、肾脏形态、脂肪酸、AQP2、AVPR2、乙酰辅酶A、SREBP-1、血尿素、肌酸酐和葡萄糖水平发生了显著变化。在2型糖尿病大鼠中,补充异黄酮对血浆尿素、血浆尿素/肌酸酐比率、血糖、水分摄入以及肾脏质量、形态和功能表现出良好的影响。额外补充菊粉经常调节大豆异黄酮的作用[5]
在给予含菊粉饮食(有或没有长双歧杆菌)的大鼠中观察到菊粉导致盲肠重量和β-葡萄糖苷酶活性增加以及盲肠pH值降低。
高脂高胆固醇饮食喂养的Sprague-Dawley大鼠,膳食补充5%(w/w)菊粉(Inulin)8周后,血清总胆固醇(TC)降低约20%,低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)降低约25%,甘油三酯(TG)降低约18%,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)升高约15%[1]
- 氧化偶氮甲烷(AOM)诱导的小鼠结肠癌模型中,膳食添加10%(w/w)菊粉(Inulin)24周,结肠肿瘤发生率降低约30%,肿瘤数目(每只小鼠肿瘤数)减少约40%[3]
- 改善ApoE-/-动脉粥样硬化小鼠的血管功能:8%(w/w)菊粉(Inulin)补充12周,主动脉斑块面积减少约28%,血清促炎因子(TNF-α、IL-1β)降低30-35%,血清SCFAs水平升高[4]
- 缓解肥胖C57BL/6小鼠的代谢紊乱:6%(w/w)菊粉(Inulin)补充10周,葡萄糖耐量改善(OGTT曲线下面积减少约22%),胰岛素敏感性提高,肠道菌群组成改变(双歧杆菌丰度增加约2.3倍)[5]
酶活实验
作为一种由肠道微生物代谢的膳食纤维,菊粉通常不在标准的分离酶结合实验中进行评估。然而,其代谢机制可以利用纯化的微生物果聚糖水解酶在酶学实验中研究。
一项代表性的实验方案来自对植物乳杆菌 YT640 的研究:底物配制——在合适的培养基或缓冲液中(如MRS肉汤),将菊粉(如Orafti®菊粉)配制为 0.5% 至 2% (w/v) 的浓度。酶源准备——获取纯化的β-呋喃果糖苷酶或该细菌菌株的无细胞提取物。反应条件——将酶与菊粉底物在 37°C 下共孵育,持续时间最长可达 72 小时。结果分析——通过测量 600 nm 处的光密度(OD600)间接监测细菌生长,并记录 pH 值变化。酶促降解的直接证据可通过使用 HPLC 分析残留糖成分或测量还原糖的释放量来获得。对照组应包括不含菊粉的酶源以及不含酶(仅含菊粉)的组别。
细胞实验
菊粉是一种水溶性储存多糖,属于一组不易消化的碳水化合物,称为果聚糖。菊粉在美国已获得GRAS地位,广泛存在于约36000种植物中,其中菊苣根被认为是菊粉最丰富的来源。通常,菊粉被用作益生元、脂肪替代品、糖替代品、质地调节剂,并因其对胃健康的有益作用而用于开发功能性食品,以改善健康。这篇综述深入了解了它的生产、理化性质、在对抗各种代谢和饮食相关疾病中的作用以及作为功能成分在新产品开发中的应用[1]。
HT-29结肠癌细胞增殖实验:HT-29和NCM460细胞接种于96孔板,用菊粉(Inulin)(0.1-10 mg/mL)处理72小时。MTT法检测细胞活力,计算相对于对照组的增殖抑制率[3]
- RAW 264.7巨噬细胞炎症实验:RAW 264.7细胞接种于24孔板,用菊粉(Inulin)(0.5-5 mg/mL)预处理1小时,再用LPS(1 μg/mL)刺激24小时。收集培养上清液,ELISA法定量TNF-α和IL-6,RT-PCR检测iNOS mRNA表达[5]
- 肠道菌群发酵实验:人粪便样本稀释后接种到含菊粉(Inulin)(0.5-5% w/v)的发酵培养基中。37°C厌氧孵育72小时后,气相色谱(GC)分析上清液中的SCFAs[2]
动物实验
方法:[4]
将30只载脂蛋白E缺陷(ApoE-/-)小鼠随机分为三组,分别喂以正常饮食、高脂饮食或菊粉+高脂饮食,持续16周。比较三组小鼠的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平。用油红O染色小鼠主动脉和主动脉窦,观察并比较动脉粥样硬化斑块的面积。通过对16S rRNA基因V3-V4区进行测序,检测小鼠粪便菌群的多样性和结构,并采用气相色谱-质谱联用技术分析小鼠粪便中代谢物的水平。采用多指标流式细胞术(CBA)检测血浆脂多糖(LPS)水平和主动脉炎症因子。
结果:[4]
高脂饮食喂养的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化病变面积增加约46%,总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著升高(P < 0.05),与正常饮食组相比。在高脂饮食组中添加菊粉后,动脉粥样硬化病变面积、血清LPS水平和主动脉炎症均降低,TC、TG和LDL-C水平也降低(P < 0.05)。基于16S rRNA基因检测,我们发现高脂血症显著改变了肠道菌群组成(如普雷沃氏菌属)和代谢产物(如L-精氨酸),而膳食菊粉干预部分逆转了这些相关变化。
结论:[4]
菊粉能够抑制动脉粥样硬化斑块的形成,这可能与脂质代谢、肠道菌群组成及其代谢产物的变化以及相关炎症因子表达的抑制有关。本研究旨在阐明肠道菌群特征、代谢产物与动脉粥样硬化之间的关系,为未来通过改变宿主肠道菌群及其代谢产物的组成和功能来延缓或治疗动脉粥样硬化的研究提供新的方向。
大鼠高胆固醇饮食模型:将雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组和高胆固醇饮食组(1%胆固醇+10%猪油),高胆固醇饮食组分别添加或不添加5%(w/w)的菊粉。大鼠饲喂8周,每周监测食物摄入量和体重。实验结束时,采集血清检测血脂谱(TC、LDL-C、HDL-C、TG)[1]
-小鼠结肠癌模型:每周一次腹腔注射AOM(10 mg/kg),持续3周,诱导C57BL/6雌性小鼠发生结肠肿瘤。从首次注射AOM开始,小鼠饲喂含10% (w/w) 菊粉的饲料24周。处死小鼠后,收集结肠组织进行肿瘤计数和组织病理学分析[3]
- ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型:6周龄ApoE-/-小鼠饲喂添加或不添加8% (w/w) 菊粉的西式饮食(21%脂肪+0.15%胆固醇)12周。收集主动脉组织进行斑块面积测量(油红O染色),并分析血清中的细胞因子和短链脂肪酸[4]
- 肥胖小鼠代谢紊乱模型:雄性C57BL/6小鼠饲喂高脂饮食(45%脂肪)8周以诱导肥胖,然后补充6% (w/w) 菊粉再饲喂10周。采用口服葡萄糖耐量试验(OGTT)评估葡萄糖耐量,并通过16S rRNA测序分析肠道菌群组成[5]
药代性质 (ADME/PK)
在小肠中吸收不良:菊粉不被人体消化酶(淀粉酶、乳糖酶)水解,完整地到达结肠[1, 2]
- 由结肠微生物群代谢:在结肠中发酵成短链脂肪酸(乙酸、丙酸、丁酸),约95%的短链脂肪酸被吸收入血[2, 5]
- 无显著的全身分布:未发酵的菊粉随粪便排出,约占给药剂量的5-10%[1]
- 由菊粉衍生的短链脂肪酸的血浆半衰期约为1.5小时,主要在肝脏和外周组织中代谢[5]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
急性毒性:LD50 > 20 g/kg(大鼠口服);剂量高达 20 g/kg 时未见死亡或急性不良反应 [1]
- 亚慢性毒性:大鼠每日膳食补充 10% (w/w) 菊粉,持续 6 个月,未引起体重、肝肾功能(ALT、AST、肌酐)或血液学参数的显著变化 [1, 3]
- 胃肠道耐受性:人类剂量 > 20 g/天时曾报道出现轻微且短暂的腹胀、肠胃胀气或腹泻;剂量 ≤ 15 g/天时未见不良反应 [4, 5]
- 无遗传毒性或致癌性:Ames 试验和动物致癌模型结果均为阴性 [3]
参考文献
[1]. J Nutr.1998 Jan;128(1):11-9;
[2]. J Appl Bacteriol.1993 Oct;75(4):373-80;
[3]. Carcinogenesis.1998 Feb;19(2):281-5.
[4]. Coron Artery Dis. 2024 May 17. doi: 10.1097/MCA.0000000000001377.
[5]. Int J Mol Sci. 2024 May 16;25(10):5418. doi: 10.3390/ijms25105418.
其他信息
菊粉是一种天然存在于植物(例如菊苣、大蒜、洋葱)中的果聚糖多糖,被归类为可溶性膳食纤维和益生元[1, 2, 5]
- 核心作用机制:作为益生元,选择性地刺激有益肠道细菌(双歧杆菌、乳酸杆菌)的生长和活性,从而增加短链脂肪酸的产生。短链脂肪酸 (SCFA) 调节肠道稳态、脂质代谢、炎症和细胞增殖 [2, 4, 5]
- 潜在的治疗应用:代谢紊乱(血脂异常、2 型糖尿病、肥胖症)、结直肠癌预防和动脉粥样硬化管理 [1, 3, 4, 5]
- 已被监管机构认定为临床安全 (GRAS),广泛用于食品和膳食补充剂 [1, 5]
- 与其他膳食纤维不同,其独特的发酵特性使其能够优先促进有益菌群的生长,而不会刺激致病菌的繁殖 [2]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C6NH10N+2O5N+1
分子量
490.411
精确质量
285.101
CAS号
9005-80-5
相关CAS号
9005-80-5
PubChem CID
254762074
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1,35 g/cm3
沸点
563.5±60.0 °C at 760 mmHg
熔点
176-181ºC
闪点
294.6±32.9 °C
蒸汽压
0.0±1.5 mmHg at 25°C
折射率
1.665
来源
Plant/Helianthus tuberosus
LogP
1.91
tPSA
78.29
SMILES
C1(O)[C@](CO)(OC[C@]2(O[C@H]3OC(CO)[C@@H](O)C(O)C3O)C(O)C(O)[C@@H](CO)O2)O[C@H](CO)C1O
InChi Key
UMGSZTYVVMHARA-RYKCJHNISA-N
InChi Code
InChI=1S/C17H30O16/c18-1-5-7(21)12(26)16(3-20,31-5)29-4-17(13(27)8(22)6(2-19)32-17)33-15-11(25)9(23)10(24)14(28)30-15/h5-15,18-28H,1-4H2/t5-,6-,7-,8-,9+,10+,11-,12+,13+,14+,15-,16-,17+/m1/s1
化学名
(2S,3S,4S,5R,6R)-6-(((2S,3S,4S,5R)-2-((((2R,3S,4S,5R)-3,4-dihydroxy-2,5-bis(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)oxy)methyl)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)oxy)tetrahydro-2H-pyran-2,3,4,5-tetraol
别名
N/A
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO:10 mg/mL
Water:104 mg/mL
Ethanol:<1 mg/mL
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (Infinity mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (Infinity mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: Water soluble


配方 4 中的溶解度: 27.5 mg/mL (Infinity mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶.

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.0391 mL 10.1956 mL 20.3911 mL
5 mM 0.4078 mL 2.0391 mL 4.0782 mL
10 mM 0.2039 mL 1.0196 mL 2.0391 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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