| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
ANXA7 GTPase; AMPK/mTORC1/STAT3
ANXA7 GTPase; signaling pathways: AMPK/mTORC1/STAT3. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
SEC (20 µM) 可抑制 PC3 前列腺癌细胞和 HEK 293T RKIP−/− 细胞的迁移 [1]。ANXA7 GTPase 特异性抑制剂 ABO 可逆转 SEC (20 µM) 引起的 PC3 细胞中 AMPK 磷酸化水平的显著升高，表明磷酸化水平升高的活化 ANXA7 可促进 AMPK 磷酸化（具有细胞选择性）[1]。SEC 通过促进 ITGB4 核转位，特异性地诱导 ITGB4 高表达的肿瘤细胞凋亡 [2]。SEC 通过 AMPK/mTORC1/STAT3 信号通路激活 ANXA7 GTPase。它通过诱导 ITGB4 核转位，选择性地促进 ITGB4 高表达的癌细胞凋亡。详细的活性数据可在原始研究论文中找到。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
在PC-3M-Luc原位移植裸鼠模型中，SEC（3 mg/kg/天或18 mg/kg/天）可预防转移[1]。
SEC抑制了PC-3M-Luc原位移植裸鼠模型中的转移[1] 接下来，我们通过监测小鼠原位前列腺癌转移情况来评估SEC的体内疗效。接受PC-3M-Luc原位接种的小鼠连续3周注射SEC（3 mg/kg/天或18 mg/kg/天）。重要的是，SEC降低了以光子计数表示的生物发光信号（图7，A和B）。淋巴结是前列腺癌常见的转移部位。随后，我们分离了主动脉淋巴结，并进行了体外生物发光成像。淋巴结转移表明PC-3M-Luc细胞能够扩散到远处器官。值得注意的是，SEC 抑制了转移性淋巴结的生物发光信号，并减少了前列腺癌转移至主动脉淋巴结的数量（图 7，C 至 E）。同时，SEC 治疗并未影响小鼠的体重（图 7F）。与此一致的是，SEC 注射确实降低了植入肿瘤中 CCL2、APLN 和 IL6ST 的 mRNA 水平（图 8）。这些体内观察结果表明，SEC 抑制了裸鼠模型中 PC-3M-Luc 细胞的淋巴结转移能力。[1] SEC 抑制了禽类胚胎模型中人肿瘤异种移植瘤的生长[2] 接下来，我们确定了 SEC 是否具有体内促凋亡作用。由于鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）具有免疫缺陷环境和密集的毛细血管网络，因此被广泛用于肿瘤移植，以评估抗癌药物的疗效以及促血管生成或抗血管生成因子的作用。因此，我们利用CAM模型研究了SEC在肿瘤生长和正常血管生成中的作用。将A549细胞接种于CAM上，并在2天内形成实体瘤。从第2天到第8天，每隔2天用PBS或含SEC的PBS对实体腺癌进行局部治疗。与单独使用PBS相比，PBS加SEC治疗显著抑制了肿瘤生长（图6A）。5-氟尿嘧啶（5-FU）治疗有助于缩小异种移植瘤的体积（补充图6）。肿瘤冰冻切片的TUNEL检测显示，SEC在体内有效促进了细胞凋亡，并且在肿瘤边缘检测到更强的信号（图6B）。为了确定SEC是否在抑制肿瘤生长的同时干扰正常血管生成，我们直接检测了SEC对CAM的血管生成作用。结果显示，SEC对CAM的正常血管生成没有影响（图6C）。与体内血管生成研究结果完全一致，在体外Matrigel基质胶实验中，SEC不干扰血清和FGF-2诱导的毛细血管样管状结构的形成（图6D）。因此，SEC通过诱导细胞凋亡有效抑制体内肿瘤生长，且对CAM的正常血管生成无不良影响。 SEC选择性地诱导高ITGB4表达的癌细胞凋亡。其机制涉及通过AMPK/mTORC1/STAT3信号通路激活ANXA7 GTP酶，进而导致ITGB4核转位和细胞凋亡。该化合物可用于研究癌细胞死亡机制以及ITGB4高表达癌症的潜在治疗策略。 |
| 酶活实验 |
体外 ANXA7 活性测定[2]
将人源野生型 ANXA7 及其突变体 ANXA7-mt1 (T275A) 和 -mt2 (T286A) 的编码区亚克隆到带有 6*His 标签的 mCherry-N1 表达载体中。当接种于 10 cm 培养皿中的 HEK293 细胞密度达到 70% 至 80% 汇合度时，用上述表达载体进行转染。转染 24 小时后，收集总蛋白，并使用 His GraviTrap Ni-NTA 蛋白纯化试剂盒通过柱层析提取和纯化表达的重组 ANXA7。将纯化的 ANXA7 在 37°C 下，在有或无 SEC 的情况下，以指定浓度和时间进行孵育。使用 ATPase/GTPase 活性测定试剂盒测定 ANXA7 的 GTPase 活性。 使用 GTPase 测定法测定 ANXA7 的 GTPase 活性。将重组ANXA7与GTP和不同浓度的SEC孵育。监测GTP水解情况以确定其激活状态。使用磷酸化特异性抗体通过Western blot检测信号通路（AMPK、mTORC1、STAT3）的激活情况。 |
| 细胞实验 |
细胞活力检测[1]
细胞类型： HEK293T RKIP−/− 细胞。[1] 测试浓度： 20 µM。 孵育时间： 24 小时。 实验结果： 抑制 HEK293T RKIP−/− 细胞的迁移，但对 HEK293T RKIP+/+ 细胞无影响。 将 ITGB4 高表达和低表达的癌细胞系用不同浓度的 SEC 处理。采用 MTT 或 CellTiter-Glo 法评估细胞活力。通过 Annexin V/PI 染色和 caspase-3/7 活性评估细胞凋亡。通过免疫荧光和亚细胞分级分离评估 ITGB4 的核转位。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：将荧光素酶标记的PC-3M-Luc细胞（2 × 10⁶个细胞/50 µL无菌HBSS−/−）原位接种到8周龄裸鼠的前列腺中[1]。
剂量：3 mg/kg/天或18 mg/kg/天。 给药方式：每日腹腔注射，持续3周。 实验结果：抑制裸鼠模型中PC-3M-Luc细胞的淋巴结转移能力。降低移植肿瘤中CCL2、APLN和IL6ST的mRNA水平。不影响小鼠体重。 在ITGB4高表达肿瘤的小鼠异种移植模型中评估SEC。通过腹腔注射或口服给药的方式对荷瘤小鼠进行SEC治疗。监测肿瘤生长抑制、细胞凋亡诱导和细胞存活情况。评估肿瘤组织中ITGB4的核转位和通路激活情况。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
SEC的分子量为430.88，分子式为C22H23ClN2O5。它是一种小分子，适用于体外和体内应用。详细的药代动力学参数（半衰期、生物利用度、清除率）可在原始研究文献中找到。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
SEC的临床前毒性数据有限。作为一种能诱导ITGB4高表达癌细胞凋亡的化合物，它在ITGB4低表达的正常组织中可能具有良好的安全性。
|
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
Annexin A7 (ANXA7) 是前列腺癌肿瘤发生和转移的抑制因子。活化的 ANXA7 GTPase 可促进前列腺癌细胞凋亡。然而，ANXA7 GTPase 在前列腺癌转移中的作用及其潜在机制尚不清楚。RKIP 是一种转移抑制剂，在前列腺癌转移灶中表达下调。RKIP 与其靶蛋白的结合可能抑制其相互作用蛋白的活化。然而，RKIP 对 ANXA7 GTPase 活化的影响仍不清楚。本研究发现，小分子 SEC（(S)-1-(3-(4-氯苯氧基)-2-羟丙基)-3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-羧酸乙酯）可有效活化 ANXA7 GTPase，从而抑制前列腺癌转移。从机制上讲，活化的ANXA7促进AMPK磷酸化，导致mTORC1活性降低、STAT3核转位受抑制以及包括CCL2、APLN和IL6ST在内的促转移基因表达下调。相反，RKIP与ANXA7相互作用，抑制SEC及其下游信号通路对ANXA7 GTP酶的激活。值得注意的是，体内原位分析表明，SEC处理抑制了前列腺癌细胞的转移。总之，我们的研究结果为低RKIP表达的前列腺癌转移如何通过AMPK/mTORC1/STAT3信号通路，经由SEC诱导的ANXA7 GTP酶激活而受到抑制提供了新的见解。[1] 整合素β4 (ITGB4) 水平升高与多种癌症的恶性进展相关。然而，目前尚无针对高表达ITGB4的癌细胞的选择性治疗策略报道。本文首次报道了一种手性小分子化合物SEC，它通过诱导ITGB4核转位，选择性地促进高表达ITGB4的癌细胞凋亡。核内ITGB4可与ATF3启动子区域结合，激活ATF3表达，从而上调下游促凋亡基因的表达。此外，SEC促进膜联蛋白A7 (ANXA7)与ITGB4的结合，并增强ANXA7的GTP酶活性。活化的ANXA7通过触发ITGB4在Y1494位点的磷酸化，促进ITGB4的核转位。SEC还能抑制禽类胚胎模型中异种移植瘤的生长。我们发现了一种小分子化合物SEC，它能选择性地促进高表达ITGB4的癌细胞在体外和体内的凋亡。该化合物通过触发ITGB4与ANXA7的结合、ITGB4的核转位以及促凋亡基因的表达发挥作用。[2] SEC是一种用于研究癌细胞凋亡、ANXA7 GTP酶生物学和ITGB4信号通路的科研工具。其作用机制涉及通过AMPK/mTORC1/STAT3信号通路激活ANXA7 GTP酶，进而导致ITGB4核转位和高表达ITGB4的癌细胞凋亡。目前尚无临床试验或获批适应症。
|
| 分子式 |
C22H23CLN2O5
|
|---|---|
| 分子量 |
430.881425142288
|
| 精确质量 |
430.1295
|
| 元素分析 |
C, 61.33; H, 5.38; Cl, 8.23; N, 6.50; O, 18.57
|
| CAS号 |
1802997-81-4
|
| 相关CAS号 |
1802997-81-4;918879-70-6 (recemate);
|
| PubChem CID |
146681186
|
| 外观&性状 |
Light yellow to yellow ointment
|
| LogP |
4
|
| tPSA |
82.8Ų
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
10
|
| 重原子数目 |
30
|
| 分子复杂度/Complexity |
524
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
|
| SMILES |
O=C(C1=CC(C2=CC=C(OC)C=C2)=NN1C[C@H](O)COC3=CC=C(Cl)C=C3)OCC
|
| InChi Key |
OFKGGSVHXHMDDN-KRWDZBQOSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C22H23ClN2O5/c1-3-29-22(27)21-12-20(15-4-8-18(28-2)9-5-15)24-25(21)13-17(26)14-30-19-10-6-16(23)7-11-19/h4-12,17,26H,3,13-14H2,1-2H3/t17-/m0/s1
|
| 化学名 |
ethyl 2-[(2S)-3-(4-chlorophenoxy)-2-hydroxypropyl]-5-(4-methoxyphenyl)pyrazole-3-carboxylate
|
| 别名 |
Sec; 1802997-81-4; ethyl 2-[(2S)-3-(4-chlorophenoxy)-2-hydroxypropyl]-5-(4-methoxyphenyl)pyrazole-3-carboxylate;
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~232.08 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.80 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.80 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.80 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3208 mL | 11.6042 mL | 23.2083 mL | |
| 5 mM | 0.4642 mL | 2.3208 mL | 4.6417 mL | |
| 10 mM | 0.2321 mL | 1.1604 mL | 2.3208 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
