ISO-1

别名: ISO-1 ISO 1 ISO1 MIF Antagonist Macrophage Migration Inhibitory Factor 4,5-二氢-3-(4-羟基苯基)-5-异恶唑乙酸甲酯
目录号: V9770 纯度: ≥98%
ISO-1,以前称为 MIF Antagonist 和 ISO-1 and Macrophage Migration Inhibitory Factor,是一种 MIF 抑制剂。
ISO-1 CAS号: 478336-92-4
产品类别: MIF
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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纯度: ≥98%

产品描述

描述:ISO-1,曾被称为MIF拮抗剂和ISO-1及巨噬细胞迁移抑制因子,是一种MIF抑制剂。ISO-1的CAS号为478336-92-4。INVIVO-6924可保护光感受器并减少实验性视网膜脱离中的胶质增生。全身性给予MIF抑制剂ISO-1可显著抑制光感受器凋亡、外核层(ONL)变薄和视网膜胶质增生。ISO-1和MIF敲除(MIFKO)小鼠脱离的视网膜中Müller胶质细胞pERK表达的积累量更高,表明Müller胶质细胞存活通路可能是神经保护反应的基础。


生物活性&实验参考方法
靶点
Macrophage migration inhibitory factor (MIF) tautomerase active site [1]

Macrophage migration inhibitory factor (MIF) [2]

Macrophage migration inhibitory factor (MIF) [3]
体外研究 (In Vitro)
在未添加重组MIF的情况下,ISO-1(0.1–20 μM;16小时)对Cox-2分泌具有轻微的抑制作用[1]。
ISO-1以剂量依赖的方式抑制MIF D-多巴色素互变酶活性,IC50约为7 μM。非羟基化的苯基类似物(化合物2)的效力降低了10-15倍。4-甲氧基类似物(化合物3)没有活性。将ISO-1氧化为异噁唑(化合物4)后活性消失,还原为化合物5也导致活性丧失[1]。

ISO-1以剂量依赖的方式抑制转染了表达MIF质粒的RAW 264.7巨噬细胞中MIF诱导的花生四烯酸释放;化合物 2、3 和 4 在大多数浓度下均未表现出抑制作用,但化合物 2 在 100 μM 时显示出一定的抑制作用 [1]。

ISO-1 剂量依赖性地拮抗 MIF 依赖性地塞米松对 LPS 激活的人单核细胞的抑制作用,在 0.1 至 20 μM 的浓度范围内降低 TNFα、PGE2 和 Cox-2 的产生。在未添加重组MIF的情况下,也观察到对细胞因子分泌的轻微抑制作用,这可能是由于天然MIF受到抑制所致[1]。

ISO-1在处理30分钟后,以剂量依赖性方式(1-100 μM)抑制RAW 267.4巨噬细胞内的MIF互变异构酶活性,该活性通过L-多巴色素甲酯转化法测定[2]。

ISO-1以剂量依赖性方式抑制LPS诱导的RAW 267.4巨噬细胞的TNF分泌(1-100 μM)[2]。

ISO-1抑制LPS诱导的RAW 267.4巨噬细胞的NF-κB活化,在100 μM浓度下抑制率高达70%,该结果通过电泳迁移率变动分析法测定[2]。荧光标记的ISO-1(FL-ISO-1)被RAW 267.4巨噬细胞摄取,并在30分钟内定位于细胞质和细胞核中[2]。
体内研究 (In Vivo)
ISO-1(腹腔注射;3.5–35 mg/kg;每日两次;持续 2 周)具有抗炎特性,并能提高致命性内毒素血症的存活率 [2]。腹腔注射 ISO-1(35 mg/kg,每日两次,持续 3 天)可显著降低植入物中 Flk1 的表达并减小平均植入物尺寸 [3]。
ISO-1(35 mg/kg 腹腔注射,每日两次,持续 3 天)可显著保护雄性 Balb/C 小鼠免受致命性内毒素血症(LPS 5 mg/kg 腹腔注射)的侵害,并以剂量依赖的方式提高存活率(35 mg/kg 时 p < 0.001),与载体组相比。该效果与抗 MIF 抗体治疗相当 [2]。

在盲肠结扎和穿孔 (CLP) 诱导的多微生物败血症后 24 小时开始进行 ISO-1 治疗(35 mg/kg 腹腔注射,每天两次,持续 3 天),与载体治疗的对照组相比,存活率为 77%(p < 0.001)。在同一时间段内给予抗MIF抗体,其提高生存率的效果与ISO-1相当[2]。

ISO-1可抑制LPS处理的野生型小鼠腹腔巨噬细胞中TNF释放67%,但对MIF缺陷小鼠的细胞因子释放无影响[2]。

在子宫内膜异位症小鼠模型(腹腔注射子宫碎片的C57BL/6-Tg(ACTB-EGFP)受体小鼠)中,使用ISO-1
(35 mg/kg,腹腔注射,每日两次,连续3天,诱导后1周开始)治疗可显著降低子宫内膜异位病灶的平均大小。血管生成指标Flk1(VEGF受体2)mRNA表达也显著降低。生殖周期未受影响[3]。
酶活实验
D-多巴色素互变异构酶活性测定:L-多巴色素甲酯由L-3,4-二羟基苯丙氨酸甲酯经高碘酸钠氧化制备。在室温下,将多巴色素甲酯加入含有MIF的磷酸钾缓冲液(pH 6.0,0.5 mM EDTA)比色皿中,测定其活性。用分光光度计记录475 nm处2至20秒内吸光度的下降值。在加入多巴色素之前,将溶于DMSO的抑制剂加入含有MIF的比色皿中。IC50值由剂量反应曲线确定[1]。

细胞内MIF互变异构酶活性测定:将RAW 267.4巨噬细胞用不同浓度的ISO-1处理30分钟,然后洗涤并在非变性缓冲液中裂解。如上所述,使用L-多巴色素甲酯测定裂解液的互变异构酶活性,测量475 nm处的吸光度下降值[2]。

腹腔液中MIF活性评估:收集小鼠腹腔液,校正蛋白浓度,并将样品与测定缓冲液(50 mM磷酸钾,pH 6.0,1 mM EDTA)混合。加入多巴色素甲酯,使用微孔板分光光度计在475 nm处读取吸光度。活性以相对于对照组的倍数变化表示[3]。
细胞实验
Western Blot 分析[1]
细胞类型: RAW 264.7 巨噬细胞
测试浓度: 0.1μM、1μM、10μM、20μM
孵育时间: 16 小时
实验结果: 抑制 Cox-2 分泌。
糖皮质激素拮抗试验:通过密度梯度离心法从全血中分离人或小鼠单核细胞,并通过贴壁法纯化单核细胞。将细胞(1×10^6/孔)预先与地塞米松(10^-8 M)、地塞米松加MIF(100 ng/ml野生型或突变型)或地塞米松加MIF和ISO-1(0.1-20 μM)孵育1小时,然后加入LPS(0.5 μg/ml)。16小时后,收集上清液,用ELISA法测定TNFα和PGE2的含量。采用特异性抗体通过Western blot分析Cox-2的表达[1]。

花生四烯酸释放实验:将RAW 264.7巨噬细胞与[14C]花生四烯酸孵育过夜,然后洗涤,并在有或无载体或ISO-1的情况下,转染表达MIF的质粒或空载体。 16 小时后,收集上清液,并通过闪烁计数法定量 14C 标记的花生四烯酸 [1]。

TNF 分泌测定:在加入 LPS (100 ng/ml) 前 30 分钟,用 ISO-1 (1-100 μM) 处理 RAW 267.4 巨噬细胞。孵育 16 小时后,收集细胞培养上清液,并通过 ELISA 法测定 TNF [2]。

NF-κB 激活测定 (EMSA):在加入 LPS 前 30 分钟,用 ISO-1 (1-100 μM) 处理 RAW 267.4 巨噬细胞。2 小时后分离核提取物。将 5 μg 核蛋白与含有 NF-κB 共识序列的 32P 标记的双链寡核苷酸孵育。样品经4%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,并通过放射自显影法显影。结合的NF-κB条带通过密度分析法定量[2]。

荧光标记的ISO-1的细胞内定位:将RAW 267.4巨噬细胞接种于盖玻片上,用荧光标记的ISO-1(FL-ISO-1)处理,然后洗涤,用甲醛固定,用DAPI染色,并使用荧光显微镜成像[2]。

mRNA表达分析:从子宫内膜异位症病灶或子宫组织中提取总RNA,并合成cDNA。进行qRT-PCR以定量Mif和Flk1 mRNA水平,并以18S rRNA进行标准化。使用抗MIF抗体对蛋白质提取物进行Western blot分析,并以β-actin进行标准化[3]。
动物实验
动物/疾病模型: C57Bl/6 MIF+/+ 和 MIF–/– 小鼠 [2]
剂量: 3.5-35 mg/kg
给药途径: 腹腔注射 (ip);3.5-35 mg/kg;每日两次;持续 2 周
实验结果: 是 可预防致命性败血症。

动物/疾病模型: 雌性 C57BL/6-Tg(ACTB-EGFP)1Osb/J 小鼠 [3]
剂量: 35 mg/kg
给药途径: 腹腔注射 (ip);35 mg/kg;每日两次; 3天
实验结果:子宫内子宫内膜异位症病灶的平均大小缩小。
内毒素血症模型:雄性Balb/C小鼠(8周龄)腹腔注射LPS(5 mg/kg)。异丙肾上腺素-1(3.5-35 mg/kg)或溶剂(5% DMSO水溶液)在LPS注射前30分钟和注射后6小时腹腔注射,然后每天两次,持续3天。监测动物存活情况2周[2]。

盲肠结扎穿刺(CLP)模型:小鼠麻醉后,分离盲肠,在回盲瓣下方结扎,并用22号针头穿刺一次,挤出少量粪便。 CLP术后立即皮下注射抗生素(0.5 mg/kg Premaxin),并皮下注射复苏液(生理盐水,20 ml/kg)。CLP术后24小时开始腹腔注射ISO-1(35 mg/kg)或溶剂(5% DMSO),每日两次,持续3天。监测动物存活情况2周。在平行实验中,CLP术后24小时开始腹腔注射抗MIF抗体(2.8 mg/kg),每日一次,持续3天[2]。

子宫内膜异位症小鼠模型:以雌性C57BL/6-Tg(ACTB-EGFP)小鼠为受体。取未成熟C57BL/6小鼠的子宫,在注射PMSG后取出子宫组织,并将子宫组织碎片(1 mm³)注射到受体小鼠的腹腔内。诱导一周后,小鼠连续3天,每天两次(间隔12小时)腹腔注射ISO-1(35 mg/kg体重)或载体(5% DMSO生理盐水)。末次注射后一周处死小鼠,计数并测量子宫内膜异位症病灶的大小(mm³)。通过阴道细胞学检查监测小鼠的动情周期,持续14天(治疗前4天至处死)[3]。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
在所用的药理剂量下,ISO-1及其衍生物无毒性,这已通过细胞培养中的台盼蓝排除试验评估得出[1]。

ISO-1在小鼠中剂量高达250 mg/kg时未显示致死性,该剂量约为体内疗效研究中使用的最大剂量的7倍[2]。

用ISO-1治疗不会干扰小鼠的生殖动情周期,表明在实验条件下无明显的生殖毒性[3]。
参考文献

[1]. The tautomerase active site of macrophage migration inhibitory factor is a potential target for discovery of novel anti-inflammatory agents. J Biol Chem. 2002 Jul 12;277(28):24976-82.

[2]. ISO-1 binding to the tautomerase active site of MIF inhibits its pro-inflammatory activity and increases survival in severe sepsis. J Biol Chem. 2005 Nov 4;280(44):36541-4.

[3]. Inhibition of macrophage migration inhibitory factor reduces endometriotic implant size in mice with experimentally induced disease. J Endometr. 2011 Sep 30;3(3):135-142.

其他信息
5-异噁唑乙酸,即4,5-二氢-3-(4-羟基苯基)-甲酯,属于酚类化合物。
巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)是一种促炎细胞因子,参与脓毒症、关节炎、肾小球肾炎和其他炎症性疾病的发生发展。MIF的互变异构酶活性位点是抗炎药物的潜在靶点。ISO-1与底物对羟基苯基丙酮酸结合于MIF活性位点的相同位置。MIF-ISO-1复合物的晶体结构显示,只有R-异构体与MIF口袋结合,其相互作用包括与Lys-32、Ile-64和Asn-97的氢键,以及与Tyr-95的芳香相互作用。 PAM突变体(Pro-1和Met-2之间插入丙氨酸)破坏了催化位点,导致糖皮质激素拮抗调节活性缺陷[1]。

ISO-1是首个具有治疗意义的MIF促炎活性小分子抑制剂。它靶向互变异构酶活性位点,而互变异构酶活性位点并非必需的酶促功能。盲肠结扎穿孔术(CLP)后24小时内,血清MIF水平升高至最大值的70%,并在36小时达到峰值,表明MIF是脓毒症的晚期介质。ISO-1对MIF的抑制作用重现了MIF缺陷型巨噬细胞(对内毒素反应低下)的表型[2]。

在子宫内膜异位症中,异位种植灶中MIF表达升高。 ISO-1 可缩小植入物体积并降低血管密度,且不影响生殖周期,提示其具有治疗人类子宫内膜异位症的潜力[3]。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C12H13NO4
分子量
235.239
精确质量
235.084
CAS号
478336-92-4
相关CAS号
478336-92-4;
PubChem CID
4633677
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.3±0.1 g/cm3
沸点
365.0±48.0 °C at 760 mmHg
熔点
114 °C
闪点
174.6±29.6 °C
蒸汽压
0.0±0.8 mmHg at 25°C
折射率
1.582
LogP
0.89
tPSA
64.63
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
4
重原子数目
17
分子复杂度/Complexity
308
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
AIXMJTYHQHQJLU-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C12H13NO4/c1-16-12(15)7-10-6-11(13-17-10)8-2-4-9(14)5-3-8/h2-5,10,14H,6-7H2,1H3
化学名
4,5-dihydro-3-(4-hydroxyphenyl)-5-isoxazoleacetic acid, methyl ester
别名
ISO-1 ISO 1 ISO1 MIF Antagonist Macrophage Migration Inhibitory Factor
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~50 mg/mL (~212.55 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: 5 mg/mL (21.25 mM) in 5% DMSO + 95% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (10.63 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (10.63 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。


配方 4 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (10.63 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中,混合均匀。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 4.2510 mL 21.2549 mL 42.5098 mL
5 mM 0.8502 mL 4.2510 mL 8.5020 mL
10 mM 0.4251 mL 2.1255 mL 4.2510 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

临床试验信息
NCT Number Recruitment interventions Conditions Sponsor/Collaborators Start Date Phases
NCT02284919 ACTIVE, NOT RECRUITING Drug: [18F]ISO-1 Breast Cancer
Breast Neoplasm
University of Pennsylvania 2014-11 Phase 1
NCT00968656 COMPLETED Radiation: PET/CT
Other: Laboratory Testing
Other: Safety Testing
Breast Cancer
Diffuse Large B-cell Lymphoma
Head and Neck Cancer
Washington University School of Medicine 2009-01 Phase 1
NCT02204202 TERMINATED Drug: [18F]FDG
Drug: [18F]ISO-1
Lung Disease Washington University School of Medicine 2014-02
NCT03057743 TERMINATED Device: Positron emission tomography (PET/CT) imaging
Device: radiotracer [18F]ISO-1
METASTATIC BREAST CANCER Abramson Cancer Center at Penn Medicine 2016-04-05
NCT04831892 COMPLETED Other: Moisturizer Containing Isosorbide
Diesters and Colloidal Oatmeal
Other: Moisturizer containing Colloidal Oatmeal only
Atopic Dermatitis Integrative Skin Science and Research 2021-04-12 Not Applicable
生物数据图片
  • The MIF inhibitor, ISO-1 reduces endometriotic implant mass. Endometriosis was induced and mice were subsequently treated as described in Materials and Methods. Average endometriotic implant size (mm3) was calculated between treatment groups. Data are displayed as the mean ± SD and are representative of 10 mice per treatment group (N=10). Data was analyzed by unpaired t-tests. Significance was set at p < 0.05 for all comparisons. Asterisks (*) indicates statistical significantly different means. Broken line indicates size of implants at start of experiment (1 mm3).[3]. Nothnick WB, et al. Inhibition of macrophage migration inhibitory factor reduces endometriotic implant size in mice with experimentally induced disease. J Endometr. 2011 Sep 30;3(3):135-142.
  • ISO-1 induced endometriotic implant regression is associated with reduced expression of the VEGF receptor, Flk1. Endometriosis was induced and mice were subsequently treated as described in Materials and Methods. Endometriotic implants were harvested after measurement and prepared for RNA isolation. Flk1 transcript levels were quantitated as described in Materials and Methods by qRT-PCR and normalized to 18S rRNA levels. Data are displayed as the mean ± SD and are representative of 6 independent samples per time point per treatment (N=6). Data was analyzed by unpaired t-tests. Significance was set at p < 0.05 for all comparisons. Asterisks (*) indicates statistical significantly different means.[3]. Nothnick WB, et al. Inhibition of macrophage migration inhibitory factor reduces endometriotic implant size in mice with experimentally induced disease. J Endometr. 2011 Sep 30;3(3):135-142.
  • ISO-1 induced regression of endometriotic implant mass is associated with reduced peritoneal fluid MIF activity. Peritoneal fluid was obtained from mice treated with vehicle or ISO-1and MIF activity was determined as described under Materials and Methods. Data are displayed as the mean ± SD and are representative of 9 independent samples per time point per treatment (N=9). Data was analyzed by unpaired t-tests. Significance was set at p < 0.05 for all comparisons. Asterisks (*) indicates statistical significantly different means. One sample was lost during the aspiration process.[3]. Nothnick WB, et al. Inhibition of macrophage migration inhibitory factor reduces endometriotic implant size in mice with experimentally induced disease. J Endometr. 2011 Sep 30;3(3):135-142.
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