Isobavachin

别名: 异补骨脂二氢黄酮;S型 异补骨脂二氢黄酮;(S)-异补骨脂二氢黄酮;异补骨脂二氢黄酮(标准品);异补骨脂二氢黄酮(异补骨脂黄酮);异补骨脂二氢黄酮对照品;异补骨脂黄酮
目录号: V34212 纯度: ≥98%
异秋葵苷是具有抗氧化活性的类黄酮类天然产物。
Isobavachin CAS号: 31524-62-6
产品类别: Natural Products
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述

描述:异巴伐辛是一种具有抗氧化活性的天然黄酮类化合物。它可从补骨脂(Psoralea morisiana)中分离得到,能够促进神经元分化,其蛋白质异戊二烯化作用可能发挥重要作用。


异巴伐辛 (IBA) 是一种异戊二烯基黄酮类化合物,其A环8位上连接有异戊二烯基。本研究利用IBA评估了其对小鼠胚胎干细胞(ES细胞)分化的潜在影响及其作用机制。目前,人们对该化合物的结构相关的神经元分化机制了解甚少,因此推测蛋白质异戊二烯化可能与该异戊二烯基黄酮诱导的神经元分化有关。[1]
生物活性&实验参考方法
靶点
Protein prenylation (via geranylgeranyltransferase I, GGTase I) – involved in the promoting effect of Isobavachin on neuronal differentiation. [1]
Mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathway components: ERK, p38, JNK – their phosphorylation states are modulated by Isobavachin. [1]
体外研究 (In Vitro)
与溶剂对照组相比,异巴伐辛(Isobavachin,10⁻⁷ mol/L)显著增加了小鼠胚胎干细胞中神经元样细胞(轴突长度≥细胞体长度的3倍)的数量。IBA处理后,表达β-微管蛋白III的神经元和表达GFAP的星形胶质细胞更加明显。[1] 巢蛋白(Nestin,神经祖细胞标记物)在胚状体(EB)中于第4天和第8天(d8+0)高表达,无论是否进行IBA处理,但其表达在分化过程中逐渐降低;Oct3/4(多能性标记物)在终末分化时消失。β-微管蛋白III的mRNA和蛋白水平从胚状体阶段到终末分化阶段均有表达;GFAP的表达呈时间依赖性上调(d8+5和d8+10)。NEFM(神经丝标记物)的表达被异巴伐辛上调。 [1]
与 GGTI-298(10⁻⁶ mol/L,一种 GGTase I 抑制剂)共同处理可选择性地抑制 IBA 诱导的神经元和星形胶质细胞分化,而 GGTI-298 对 RA 诱导的分化没有影响,表明 IBA 和 RA 的促进作用是通过不同的通路实现的。[1]
在 MAPK 通路中,在不同的神经元分化传代阶段(ES、EB d4、d8+0、d8+5、d8+10),经Isobavachin处理后,p38 和 JNK 的磷酸化水平下调,而 ERK 的磷酸化水平上调。ERK 磷酸化水平在 ES 细胞中较高,在早期 EB(d4、d8+0)中较低,并在神经元分化后期(d8+5、d8+10)显著升高。在ES和EB阶段检测到p38磷酸化,然后在d8+5和d8+10时下调;在整个IBA诱导分化过程中几乎检测不到p38磷酸化。与早期阶段相比,神经元分化过程中JNK磷酸化受到抑制。[1]
细胞实验
小鼠胚胎干细胞(D3系)常规培养于添加10%胎牛血清(FBS)、0.1 mmol/L β-巯基乙醇、1×非必需氨基酸和1×10⁶ U/L白血病抑制因子(LIF)的DMEM培养基中,培养基上为原代小鼠胚胎成纤维细胞。采用悬滴法诱导胚状体(EB)形成。将含有约900个ES细胞的30 μL液滴悬滴培养2天。EB形成后,将其转移至琼脂包被的培养皿中,继续悬浮培养2天。第4天,加入异巴贝辛(Isobavachin,10⁻⁷ mol/L),继续悬浮培养4天。在分化过程中,根据需要,在含有异巴贝辛的培养基中加入GGTI-298(10⁻⁶ mol/L)。在第8天(d8+0),将胚状体(EBs)接种于聚赖氨酸包被的培养板上,培养基为分化培养基(神经基础培养基+1% B27补充剂),并添加IBA以诱导神经元分化。以10⁻⁷ mol/L维甲酸作为阳性对照,0.1% DMSO作为溶剂对照。[1]
形态学评估:倒置相差显微镜;轴突长度≥细胞体长度3倍的细胞被认为是神经元样细胞。[1]
免疫细胞化学:将培养物用含0.3%过氧化氢的冰冷甲醇固定,用10% FBS的PBS溶液封闭,与一抗(β-微管蛋白III 1:50,GFAP 1:50)于4℃孵育过夜,然后与荧光二抗(1:200)孵育2小时,最后用DAPI(2 μg/mL)染色细胞核。 [1]
蛋白质印迹:细胞在提取缓冲液(Tris‑HCl pH7.5,20 mmol/L NaCl,150 mmol/L EDTA,1 mmol/L Triton X‑100,0.5% 脱氧胆酸钠,1 mmol/L PMSF,10 μg/mL 亮抑蛋白酶肽,30 μg/mL 抑蛋白酶)中裂解。蛋白质浓度通过改良的Lowry法定量。每泳道 40 μg 蛋白质经 SDS-PAGE 分离后转移至硝酸纤维素膜,用 5% 脱脂牛奶 TBS/T 封闭,与一抗(NEFM 1:500、β-微管蛋白 III 1:1000、GFAP 1:1000、p38 1:500、磷酸化 p38 1:500、ERK 1:1000、磷酸化 ERK 1:500、JNK 1:500、磷酸化 JNK 1:500、GAPDH 1:10000)于 4°C 孵育过夜,然后与 HRP 标记的二抗(1:5000)孵育 1 小时,最后通过化学发光法检测。 [1] 半定量RT-PCR:使用Trizol试剂提取总RNA,以oligo(dT)6引物和M-MuLV逆转录酶合成第一链cDNA。使用GAPDH、β-微管蛋白III、GFAP、Oct3/4和Nestin的特异性引物进行PCR(条件:35个循环,退火温度59-69℃,Mg²⁺ 3 mmol/L)。PCR产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳分离,并用溴化乙锭染色。[1]
参考文献

[1]. Promoting effects of isobavachin on neurogenesis of mouse embryonic stem cells were associated with protein prenylation. Acta Pharmacol Sin. 2011 Apr;32(4):425-32.

[2]. Antioxidant properties of extracts and compounds from Psoralea morisiana. European Journal of Lipid Science and Technology. 2005.

其他信息
异帕伐卡因属于黄烷酮类化合物。据报道,它存在于甘草、熊果等具有相关数据的生物体中。
异帕伐卡因 可促进小鼠胚胎干细胞分化为多种神经元亚型(神经元和星形胶质细胞)。其机制涉及蛋白质异戊二烯化,进而激活磷酸化ERK和磷酸化p38通路。IBA A环8位的异戊二烯基团能够在小鼠胚胎干细胞的神经发生过程中进行蛋白质异戊二烯化。该研究表明,IBA及其衍生物有望成为开发用于细胞替代疗法的、能够获得更多神经元或神经祖细胞的方法的候选药物。[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C20H20O4
分子量
324.3704
精确质量
324.136
CAS号
31524-62-6
PubChem CID
193679
外观&性状
Off-white to light yellow solid
密度
1.2±0.1 g/cm3
沸点
558.3±50.0 °C at 760 mmHg
熔点
187-188℃
闪点
202.1±23.6 °C
蒸汽压
0.0±1.6 mmHg at 25°C
折射率
1.622
LogP
4.85
tPSA
66.76
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
4
可旋转键数目(RBC)
3
重原子数目
24
分子复杂度/Complexity
474
定义原子立体中心数目
1
SMILES
CC(=CCC1=C2C(=CC=C1O)C(=O)C[C@@H](C3=CC=C(C=C3)O)O2)C
InChi Key
KYFBXCHUXFKMGQ-IBGZPJMESA-N
InChi Code
InChI=1S/C20H20O4/c1-12(2)3-8-15-17(22)10-9-16-18(23)11-19(24-20(15)16)13-4-6-14(21)7-5-13/h3-7,9-10,19,21-22H,8,11H2,1-2H3/t19-/m0/s1
化学名
(2S)-7-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-8-(3-methylbut-2-enyl)-2,3-dihydrochromen-4-one
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~100 mg/mL (~308.29 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.71 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.71 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.71 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。


请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.0829 mL 15.4145 mL 30.8290 mL
5 mM 0.6166 mL 3.0829 mL 6.1658 mL
10 mM 0.3083 mL 1.5414 mL 3.0829 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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