Isoliquiritin   中文名称: 异甘草苷

- Angiogenesis process / tube formation: Anti-tube formation (IC50 = 28.3 μM for Isoliquiritin in vascular endothelial cells) [1]
- Monoamine neurotransmitters (5-HT and NE) in hippocampus, hypothalamus, and cortex [2]
- Oxidative stress pathway: reduces ROS and MDA, increases SOD and CAT activities [4]
- Mitochondrial apoptotic pathway: down-regulates Bax, caspase-3, cytochrome C; up-regulates Bcl-2 [4]
- Nrf2 signaling pathway: activates Nrf2, increases HO-1 and NQO1 expression [5]
- NF-κB signaling pathway: inhibits NF-κB p65, IKKβ, COX-2, iNOS, TNF-α, IL-1β, IL-8, ICAM-1, VCAM-1, E-selectin [5]
- p38 MAPK pathway: inhibits p38 MAPK and p-p38 MAPK expression [5]

异甘草素（0-400 μg/mL）能有效抑制植物病原真菌的生长[3]。异甘草素（0-100 μg/mL，4 小时）能有效抑制荔枝疫霉菌孢子囊的形成[3]。异甘草素（20 μM，24 小时）能阻止酮（400 μM）对 PC12 细胞的消毒作用，降低 LDH 的释放，增强 SOD 和 CAT 的活性，并降低 ROS 和 MDA 的水平[4]。异甘草素（1-100 μM）以浓度依赖的方式抑制在含 2% FBS-DMEM 的 I 型胶原凝胶中培养的血管内皮细胞的管状结构形成，IC50 值为 28.3 μM（20-40）。异甘草苷抑制管状结构形成的效力是甘草提取物的44倍。[1]
甘草来源的黄酮类化合物抑制管状结构形成的效力顺序为：异甘草素 > 异甘草苷 > 甘草素 >> 异甘草苷-芹菜苷。异甘草素的IC50值为7.39 μM（4.78-11.4），甘草素的IC50值为39.2 μM（17.1-90.1）。[1]
甘草酸（1-100 μM）和甘草次酸（1-10 μM）均以浓度依赖的方式促进管状结构形成。甘草次酸的促进作用是甘草酸的10倍。异甘草苷（0.42-42 μg/ml）以浓度依赖的方式显著抑制甘草酸（82 μg/ml）诱导的管状结构形成。在甘草酸存在的情况下，异甘草苷的抑制作用比单独使用时弱0.28倍。[1] 异甘草苷对荔枝霜霉（Peronophthora litchi Chen）表现出显著的抗真菌活性，其抑制菌丝生长的EC50值为27.33 mg/L（15.49-48.23）。在200 mg/L浓度下，其对菌丝生长的抑制率为96.45%；在400 mg/L浓度下，其完全抑制了菌丝生长。 [3]
异甘草素以浓度依赖的方式抑制荔枝孢子囊的萌发。在70 mg/L和100 mg/L浓度下，对孢子囊萌发的抑制率分别为70.89%和82.5%。经处理的孢子囊表现出畸形的芽管，伴有块状、结节状肿胀、扭曲、多位点萌发以及芽管基部多分支。[3]
在PC12细胞中，异甘草素（20 μmol·L⁻¹）显著抑制了皮质酮（400 μmol·L⁻¹）诱导的细胞凋亡。与仅用皮质酮处理组相比，异甘草素处理组的细胞存活率提高至对照组的72.7%（对照组为51.8%）。与仅使用皮质酮的组相比，异甘草素组的LDH释放量降至119.2%（皮质酮组为155.7%）。[4]异甘草素（20 μmol·L⁻¹）可提高皮质酮处理的PC12细胞中SOD和CAT的活性（分别提高至80.1%和78.7%），并降低ROS和MDA的水平（分别降低至133.6%和105.0%）。[4]异甘草素（20 μmol·L⁻¹）可降低皮质酮诱导的细胞内钙超载（从对照组的303.1%降至172.3%），并阻止线粒体膜电位的耗散（MMP下降率从32.2%降至19.6%）。 [4]异甘草素可下调皮质酮处理的PC12细胞中Bax、caspase-3和细胞色素C蛋白的表达，并上调Bcl-2蛋白的表达。[4]在MGN大鼠中，异甘草素（10 mg/kg/天）可增加肾脏中Nrf2、HO-1和NQO1的mRNA表达水平，并降低Keap1的mRNA表达水平。免疫组化结果显示，Nrf2、HO-1和NQO1蛋白在肾小球和肾小管区域的分布增加，而Keap1蛋白的分布减少。[5]异甘草素可降低MGN大鼠肾脏中NF-κB p65、IKKβ、TNF-α、IL-1β、IL-8、ICAM-1、VCAM-1、MCP-1和E-选择素的mRNA表达水平。 Western blot分析显示核内NF-κB p65和p-IKKβ蛋白表达降低。[5]免疫组织化学和Western blot分析表明，异甘草素降低了MGN大鼠肾脏中p38 MAPK和p-p38 MAPK的蛋白表达水平。[5]

异甘草素（0.31-3.1 mg/kg，腹腔注射，每日一次，连续5天）可抑制小鼠肉芽肿血管生成[1]。腹腔注射异甘草素（10-40 mg/kg，每日一次，连续5天）在小鼠强迫游泳试验（FST）和悬尾试验（TST）中也观察到类似的抗抑郁作用[2]。在某些动物模型中，活性BSA诱导的膜性肾小球肾炎可用异甘草素（10 mg/kg/天，侧壁注射）治疗，异甘草素具有抗炎和抗氧化特性[5]。异甘草素（0.31-3.1 mg/kg，腹腔注射）可抑制佐剂诱导的小鼠慢性炎症中的肉芽肿血管生成，其ID50为1.46 mg/kg（0.824-2.58），用于评估胭脂红含量（新生血管的指标）。异甘草素的效力是甘草提取物的50倍。异甘草素还能抑制囊液重量，其ID50为0.771 mg/kg（0.513-1.18），效力是甘草提取物的18倍。 [1]
甘草酸（20-80 mg/kg）抑制胭脂红含量，但抑制率低于50%，效力弱于甘草提取物。[1]
在小鼠强迫游泳试验（FST）和悬尾试验（TST）中，异甘草苷以10、20和40 mg/kg的剂量（灌胃，试验前30分钟）显著减少了小鼠的静止不动时间。其中20 mg/kg剂量组的活性最为显著。异甘草苷未表现出中枢神经系统兴奋作用，运动活性指标显示其无此作用（389.1±26.8次/分钟，而对照组为408±26.1次/分钟）。 [2]
异甘草素（20 mg/kg）在强迫游泳试验（FST）和悬尾试验（TST）模型中均显著提高了小鼠海马、下丘脑和皮层中的5-羟色胺（5-HT）和去甲肾上腺素（NE）浓度。它还显著降低了海马、下丘脑和皮层中的5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）/5-HT比值，表明5-HT代谢减缓。未观察到多巴胺（DA）浓度的显著变化。[2]
在离体叶片抗真菌活性试验中，浓度为100-400 mg/L的异甘草素对荔枝疫霉菌（P. litchi Chen）表现出剂量依赖性的抑制作用。在400 mg/L浓度下，抑制率为86.42%，与稀释500倍的25%甲霜灵-丙环唑可湿性粉剂的抑制率相似。 [3] 在阳离子牛血清白蛋白 (C-BSA) 诱导的膜性肾小球肾炎 (MGN) 大鼠模型中，异甘草素（10 mg/kg/天，口服，持续 4 周）显著降低了肾脏重量和体细胞指数，并降低了尿蛋白、血清肌酐、尿素氮、脂联素、总胆固醇和血清甘油三酯水平，与未治疗的 MGN 大鼠相比。组织病理学分析表明，异甘草素减轻了系膜和间质的严重病理改变，使其仅表现为轻微的病理改变。[5]

采用琼脂稀释法测试了异甘草素对荔枝青霉（P. litchi Chen）的抗真菌活性。将PDA培养基倒入已灭菌的培养皿中，并加入一定量的异甘草素，使其浓度分别为0、1、5、10、50、100、200和400 mg/L。从生长旺盛的菌落边缘切取直径为6 mm的菌片，置于每个新鲜培养皿的中心。培养皿在25±1℃下培养5天。菌丝生长抑制率的计算公式为(dc-dt)/dc × 100，其中dc为对照组菌落的平均直径，dt为处理组菌落的平均直径。[3] 测定相对电导率以评估荔枝青霉的细胞膜通透性。将真菌细胞以 4000g 离心 10 分钟，用无菌水洗涤两次，并重悬于无菌水中。加入浓度分别为 40 和 80 mg/L 的异甘草素，并在 2、4、6、8 和 10 小时使用电导率仪测量电导率。[3]
采用 DNS 比色法分析还原糖含量。将样品与浓度分别为 40 和 80 mg/L 的异甘草素孵育 3、6、12、18 和 24 小时后，以 4000g 离心 10 分钟。取 2 mL 上清液与 1.5 mL DNS 试剂混合，在沸水中加热 5 分钟，冷却后在 520 nm 处测量吸光度。根据 D-葡萄糖标准曲线计算还原糖浓度。 [3]
使用试剂盒测定了 MGN 大鼠肾脏组织核提取物中的 NF-κB p65 DNA 结合活性。[5]

本研究采用大鼠胸主动脉原代培养血管内皮细胞。将内皮细胞（2.6±0.1×10⁴ 个细胞/孔）接种于含 10% FBS 的 DMEM 培养基（0.5 mL）中，于 37°C 培养 20-24 小时。培养物为胶原凝胶，由 0.3 mL 0.15% I 型胶原溶液凝固而成。吸出培养基后，覆盖等体积的胶原溶液并使其凝固。将内皮细胞置于含 2% FBS 的 DMEM 培养基中，分别在有或无药物的条件下培养 4 天。每隔一天更换一次培养基。于第 4 天，随机选取每个培养皿中的 4 个视野，在 36 倍放大倍率下拍照，测量管状结构形成情况。使用图形软件测量管状结构的总长度。 [1]
PC12 细胞培养于含 10% 热灭活胎牛血清 (FBS)、100 U/mL 青霉素和 100 μg/mL 链霉素的 RPMI-1640 培养基中，置于 5% CO₂、37°C 的培养箱中培养。为进行细胞保护研究，将细胞分为对照组、皮质酮 (400 μmol·L⁻¹) 组和皮质酮联合异甘草素组。异甘草素在皮质酮处理前 3 小时加入。采用 MTT 法检测细胞活力。将 PC12 细胞（2×10⁴ 个细胞/孔）接种于 96 孔板中，处理 24 小时后，加入 10 μL MTT 溶液（5 mg/mL）。37°C 孵育 4 小时后，移除培养基，加入 100 μL DMSO 溶解甲臜晶体。在 570 nm 处测定吸光度。[4]
使用试剂盒测定 LDH 释放量。将 PC12 细胞（1×10⁵ 个细胞/孔）接种于 24 孔板中，进行处理，LDH 释放量计算公式为（培养基中 LDH 活性/总 LDH 活性）× 100%。[4]
进行 Hoechst 33342 和 PI 双染。将细胞与 5 mg/mL Hoechst 33342 孵育 10 分钟，用 PBS 洗涤两次，再与 1 μg/mL PI 孵育 10 分钟，最后用倒置荧光显微镜观察。 [4]
Annexin V 和 PI 双染法检测细胞凋亡：收集细胞，用 PBS 洗涤，在室温下避光用含 PI（终浓度 1 μg/mL）的 Annexin V 工作液孵育 15 分钟，然后用流式细胞仪测定细胞凋亡率。[4]
使用 Fura-3/AM（终浓度 5 μmol·L⁻¹）测定细胞内钙离子水平。将细胞与 Fura-3/AM 在 37°C 下孵育 30 分钟，洗涤两次，再孵育 30 分钟，然后用流式细胞仪测定荧光强度。[4]
使用 JC-1 测定线粒体膜电位。将细胞（1×10⁶ 个细胞/mL）与 JC-1（终浓度 2 mmol·L⁻¹）在黑暗中孵育 30 分钟，洗涤两次，并通过流式细胞术测定线粒体膜电位 (MMP)。[4]
使用 DCFH-DA（终浓度 10 mmol·L⁻¹）测定细胞内活性氧 (ROS) 水平。将细胞在 37°C 下避光孵育 30 分钟，用 PBS 洗涤三次，并通过流式细胞术测定荧光强度。[4]
Western blot 分析：用含 1% PMSF 的 RIPA 裂解缓冲液裂解细胞，在 4°C 下以 12,000 rpm 离心 15 分钟，收集上清液。将50 μg蛋白质样品进行12% SDS-PAGE凝胶电泳分离，转移至PVDF膜上，用5%脱脂牛奶封闭，4℃孵育一抗过夜，室温孵育荧光二抗2小时，最后用荧光扫描仪扫描。[4]
使用商业试剂盒测定SOD和CAT活性以及MDA水平。将细胞用冰冷的PBS洗涤，匀浆，4℃下1000 rpm离心10分钟，分析沉淀物。[4]
进行RT-PCR分析时，使用TRIzol试剂提取总RNA，定量后使用cDNA合成试剂盒进行逆转录。RT-PCR反应使用SYBR Green PCR预混液进行，每个样品重复三次。mRNA表达的相对定量采用2⁻ΔΔCT法。β-肌动蛋白用作管家基因。 [5]
免疫组织化学：肾脏切片经脱蜡、复水后，用10 mM柠檬酸缓冲液（pH 6.0）进行抗原修复。切片用BSA封闭，与一抗（5% BSA稀释1:100）孵育，PBS洗涤，与生物素标记的二抗孵育1小时，然后用DAB显色，苏木精复染，并采集图像。[5]

动物/疾病模型：强迫游泳试验 (FST) 和小鼠悬尾试验 (TST) [2] 剂量：10、20 和 40 mg/kg
给药途径： 灌胃 (po)
实验结果： 小鼠在 FST 和 TST 中的不动时间减少。海马、下丘脑和皮质中 5-HT 和 NE 水平升高，5-HIAA/5-HT 比值降低。

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使用 6-7 周龄的雄性 ddY 小鼠进行佐剂诱导的囊状肉芽肿血管生成实验。弗氏完全佐剂乳剂的制备方法为：每毫升弗氏不完全佐剂中加入 2 mg 热灭活的结核分枝杆菌。在乙醚麻醉下，将 3 mL 空气皮下注射到小鼠背部。 24小时后，在乙醚麻醉下，将0.5 mL含有0.1%巴豆油的FCA乳剂注入气囊。异甘草素（0.31-1.3 mg/kg）、甘草提取物（12.5-100 mg/kg）和甘草酸（20-80 mg/kg）悬浮于含1%微晶纤维素（Avicel）的生理盐水中，于FCA注射后2小时腹腔注射入小鼠体内，随后每日一次，持续4-5天。FCA注射后第5天，经尾静脉注射含5%明胶的10%胭脂红溶液。将尸体冷却至4℃以下数小时。分离并称量肉芽肿组织和气囊液。在490 nm处测定胭脂红含量。[1]
雄性瑞士小鼠（体重22-25 g）用于强迫游泳试验和悬尾试验。将异甘草素（Isoliquiritin）以10、20和40 mg/kg的剂量溶于去离子水中，并在测试前30分钟通过胃管灌注（0.1 mL/10 g小鼠）给药。氟西汀（20 mg/kg）用作阳性对照。强迫游泳试验（FST）中，将小鼠单独置于装有10 cm高、温度为25±1°C的新鲜水的玻璃圆筒（20 cm × 14 cm）中，强迫其游泳6分钟。记录最后4分钟的静止不动时间。悬尾试验（TST）中，将每只小鼠用尾夹（距尾端2 cm）悬挂于一个箱子（25×25×30 cm）中6分钟。记录6分钟测试期间的静止不动时间。使用活动监测系统测量小鼠的运动活性。给药30分钟后，将四只小鼠分别放入四个圆柱体（直径15 cm，高25 cm）中，并自动记录5分钟内的总运动活性。[2]
进行神经递质分析时，活动测试结束后，将小鼠断头处死，迅速取出脑组织，并在冰冷的培养皿上分离出海马、下丘脑和皮层，然后储存于-80°C。称量各脑组织，并在含有内标（1.0 μM DHBA）的冰冷0.02 M高氯酸溶液中超声匀浆。匀浆液在4°C下以14,000 rpm离心，上清液经0.45 μm滤膜过滤。采用高效液相色谱-电化学检测法（HPLC-ECD）测定神经递质浓度。 [2]
进行抗真菌离体叶片试验时，选取形状、大小和年龄相近的荔枝嫩叶，用蒸馏水洗净，室温干燥。将异甘草素溶于含0.1% Tween-80的蒸馏水中，配制成浓度分别为0、100、150、200、250、300、350和400 mg/L的溶液。以25%甲霜灵-丙环唑可湿性粉剂稀释500倍作为阳性对照。每个处理组取10片叶片浸入含药溶液中10分钟，室温干燥。将处理后的叶片置于培养皿中的湿润滤纸上。将孢子囊悬浮液（5×10⁵ cfu/mL）喷洒于叶片背面，并在25±1℃下培养72小时。计算疾病指数和抗真菌效果。[3]
采用成年雄性Sprague-Dawley大鼠（225±20 g）建立膜性肾小球肾炎（MGN）模型。通过每日静脉注射阳离子C-BSA诱导MGN，持续4周，剂量从第1天到第7天逐渐增加：1 mg、1 mg、1 mg、1.5 mg、1.5 mg、2 mg、2 mg，之后维持2.5 mg的恒定剂量3周。通过24小时尿蛋白定量检测确诊MGN。异甘草素（10 mg/kg/天）和TPCA-1（IKKβ抑制剂，10 mg/kg/天）分别溶于蒸馏水和DMSO中，连续28天口服给药。大鼠被分为4组：正常对照组、MGN对照组、MGN+异甘草素组和MGN+TPCA-1组（每组6只）。实验结束前，将大鼠置于代谢笼中收集尿液进行分析。实验结束后，处死动物，通过心脏穿刺采集血液，并取出肾脏，称重后置于-80℃保存，以备后续分析。肾脏组织用10%中性福尔马林缓冲液固定，用于组织学研究。[5]

浓度在 1-50 μmol·L⁻¹ 范围内的异甘草素单独使用对 PC12 细胞活力无显著影响。浓度为 100 μmol·L⁻¹ 时，观察到细胞存活率略有下降。[4] 与对照组大鼠相比，用异甘草素（10 mg/kg/天）治疗的 MGN 大鼠体重未见显著变化，表明无全身毒性。[5]

[1]. Inhibitory effect of isoliquiritin, a compound in licorice root, on angiogenesis in vivo and tube formation in vitro. Biol Pharm Bull. 1995 Oct;18(10):1382-6.

[2]. Antidepressant-like effects of liquiritin and isoliquiritin from Glycyrrhiza uralensis in the forced swimming test and tail suspension test in mice. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry. 2008 Jul 1;32(5):1179-84.

[3]. Antifungal Activity of Isoliquiritin and Its Inhibitory Effect against Peronophythora litchi Chen through a Membrane Damage Mechanism. Molecules. 2016 Feb 19;21(2):237.

[4]. Protective effect of isoliquiritin against corticosterone-induced neurotoxicity in PC12 cells. Food Funct. 2017 Mar 22;8(3):1235-1244.

[5]. Renoprotective Effects Of Isoliquiritin Against Cationic Bovine Serum Albumin-Induced Membranous Glomerulonephritis In Experimental Rat Model Through Its Anti-Oxidative And Anti-Inflammatory Properties. Drug Des Devel Ther. 2019 Oct 30;13:3735-3751.

异甘草素是一种单糖衍生物，其结构为反式查尔酮，在2'和4'位被羟基取代，4'位被β-D-吡喃葡萄糖苷取代。它具有抗肿瘤活性，也是一种植物代谢产物。异甘草素属于查尔酮、间苯二酚、β-D-葡萄糖苷和单糖衍生物类化合物。其功能与反式查尔酮相关。据报道，异甘草素存在于甘草（Glycyrrhiza uralensis）、甘草根（Glycyrrhiza aspera）以及其他具有相关数据的生物体中。另见：光果甘草（Glycyrrhiza glabra）（部分）。

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异甘草素是一种源自甘草的黄酮类化合物。其抗血管生成作用依赖于抑制血管生成。甘草酸（82 μg/mL）和异甘草苷（4.2 μg/mL）以与其在甘草提取物中的产率（异甘草苷含量为0.8-1.6%）相近的浓度比例混合使用，其效果与100 μg/mL甘草提取物相当。异甘草苷的抗血管生成机制与其抑制血管生成有关。[1] 异甘草苷的抗抑郁样机制可能与中枢神经系统中5-羟色胺（5-HT）和去甲肾上腺素（NE）水平升高有关。异甘草苷和甘草苷分别是异甘草素和甘草素的糖苷，它们的抗抑郁机制也可能与单胺氧化酶抑制有关。 [2]
异甘草苷对多种植物病原真菌具有广谱抗真菌活性，包括荔枝疫霉菌（P. litchii Chen）、辣椒疫霉菌（P. capsici Leonian）、核盘菌（S. sclerotiorum）和草生炭疽菌（C. herbarum）。其抗真菌机制涉及破坏细胞膜，导致细胞质渗漏、菌丝体变形、细胞膜通透性增加以及还原糖含量降低。[3]
异甘草苷通过抗氧化作用（降低活性氧和丙二醛水平，增加超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性）、抑制细胞内钙超载以及抑制线粒体凋亡途径（下调Bax、caspase-3和细胞色素C；上调Bcl-2），对皮质酮诱导的PC12细胞神经毒性发挥神经保护作用。 [4]异甘草素通过激活Nrf2信号通路（增加Nrf2、HO-1、NQO1；减少Keap1）和抑制NF-κB信号通路（减少NF-κB p65、IKKβ、COX-2、iNOS、TNF-α、IL-1β、IL-8、ICAM-1、VCAM-1、E-选择素、MCP-1）以及p38 MAPK通路，对C-BSA诱导的膜性肾小球肾炎具有肾脏保护作用。[5]

C21H22O9

418.3940

418.126

5041-81-6

5318591

Yellow to green solid

1.5±0.1 g/cm3

743.5±60.0 °C at 760 mmHg

185-186ºC

263.3±26.4 °C

0.0±2.6 mmHg at 25°C

1.707

0.76

156.91

6

9

6

30

589

5

O1[C@]([H])([C@@]([H])([C@]([H])([C@@]([H])([C@@]1([H])C([H])([H])O[H])O[H])O[H])O[H])OC1C([H])=C([H])C(/C(/[H])=C(\[H])/C(C2C([H])=C([H])C(=C([H])C=2O[H])O[H])=O)=C([H])C=1[H]

YNWXJFQOCHMPCK-LXGDFETPSA-N

InChI=1S/C21H22O9/c22-10-17-18(26)19(27)20(28)21(30-17)29-13-5-1-11(2-6-13)3-8-15(24)14-7-4-12(23)9-16(14)25/h1-9,17-23,25-28H,10H2/b8-3+/t17-,18-,19+,20-,21-/m1/s1

(E)-1-(2,4-dihydroxyphenyl)-3-[4-[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyphenyl]prop-2-en-1-one

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~125 mg/mL (~298.76 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.97 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.97 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。