| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
A2B Adenosine Receptor (A2B AR) - Positive Allosteric Modulator (PAM) [2]
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| 体外研究 (In Vitro) |
KI-7（1 μM；5-21天；间充质干细胞）可显著上调Runx2和Osterix mRNA的表达[1]。KI-7（1 μM；15-21天）可显著提高间充质干细胞分化两个阶段的细胞活力[1]。研究表明，KI-7作为间充质干细胞中A2B腺苷受体的正向变构调节剂，可增强腺苷和合成的正构A2B腺苷受体激动剂在体外促进成骨细胞分化的作用。KI-7、BAY 60-6583和NECA均能显著增加IL-6的产生。尽管这种效应仅在第 21 天才变得明显，但 KI-7 在分化的两个阶段均能增强原位激动剂的作用 [1]。在进行成骨分化的人类间充质干细胞 (MSC) 中，单独使用 KI-7 (1 μM) 对基础细胞内 cAMP 水平没有显著影响，表明其本身不具有激动剂效力。[2] - KI-7 增强了选择性 A2B 受体激动剂 BAY 60-6583 (5 和 50 nM) 在未分化和分化的 MSC 中诱导的 cAMP 积累。这种增强作用可被选择性 A2B 受体拮抗剂 MRS1706 完全阻断。[2] - KI-7 改变了 cAMP 对 A2B 受体激动剂的反应时间进程。激动剂介导的 cAMP 水平在第 5-9 天达到峰值后下降，但在 KI-7 存在的情况下，cAMP 水平在整个分化过程中（长达 21 天）保持升高。[2] - KI-7 表现出不依赖于探针的变构调节作用，增强了非选择性激动剂 NECA 和腺苷在 MSC 分化各个阶段刺激的 cAMP 生成。这些作用也可被 MRS1706 阻断。[2] - 在 MSC 培养中，单独使用 KI-7 (1 μM) 可显著增加成骨细胞相关转录因子 Runx2 和 Osterix 在不同分化时间点（第 5、15 和 21 天）的 mRNA 表达。它还能增强 NECA (100 nM) 和 BAY 60-6583 (5 nM) 诱导的 Runx2 和 Osterix 表达增加。 [2]
- KI-7 (1 μM) 单独使用即可增加成骨细胞标志蛋白碱性磷酸酶 (ALP) 和骨钙素的表达。此外，它还能增强 NECA 和 BAY 60-6583 对这些标志物表达的影响。[2] - KI-7 (500 nM - 5 μM) 单独使用即可诱导成骨细胞矿化作用呈浓度依赖性增加，该作用通过 OsteoImage™ 染色进行测量。A2B 受体拮抗剂 MRS1706 和腺苷脱氨酶 (ADA)（一种内源性腺苷清除剂）可完全消除这种作用，表明 KI-7 可增强内源性腺苷的作用。 [2] - 在所有分化阶段（第9、15、21天），KI-7（500 nM - 5 μM）均以浓度依赖的方式增强了NECA（100 nM）和BAY 60-6583（5 nM）诱导的成骨细胞矿化。这些作用可被MRS1706阻断。[2] - 在分化早期（第5-9天），单独使用KI-7（1 μM）或与NECA/BAY 60-6583联合处理可减少IL-6的释放，从而促进与分化相关的IL-6产生的自发性下降。 [2] - 在分化后期（第15-21天），单独使用KI-7（1 μM）或与NECA/BAY 60-6583联合使用，均可导致IL-6释放持续增加。[2] - 在分化第15天和第21天，单独使用KI-7（1 μM）或与NECA（100 nM）联合使用，均可显著提高分化成骨细胞的活力，MTS检测结果显示。这种促存活作用可被MRS1706阻断。[2] |
| 细胞实验 |
cAMP 积累测定：将 MSCs 接种于 24 孔板中，并诱导其分化不同时间。细胞预先用含有磷酸二酯酶抑制剂 Ro 20-1724 (20 μM) 和腺苷脱氨酶 (ADA, 1 U/mL) 的培养基孵育。随后，细胞用 A2B 受体激动剂（BAY 60-6583、NECA 或腺苷）和/或变构调节剂 KI-7 (1 μM) 处理 15 分钟。使用 A2B 受体拮抗剂 MRS1706 (15 nM) 检测其特异性。采用竞争性蛋白结合法测定细胞内 cAMP 水平。 [2] - 基因表达分析（RT-qPCR）：将间充质干细胞（MSCs）培养，每两天分别用成骨培养基（对照组）、BAY 60-6583（5 nM）、NECA（100 nM）或KI-7（1 μM）单独或联合处理。分别于5、15或21天后提取总RNA。进行逆转录，所得cDNA用于qPCR，引物特异性针对Runx2、Osterix、ALP和骨钙素。mRNA水平以β-肌动蛋白进行标准化。 [2] - 矿化测定 (OsteoImage™)：将间充质干细胞 (MSCs) 接种于成骨培养基中，每两天用含有测试化合物（KI-7 500 nM - 5 μM、NECA 100 nM、BAY 60-6583 5 nM，单独或组合使用）的成骨培养基处理 9、15 或 21 天。同时，用福斯克林 (1 μM) 和 8-Br-cAMP (100 nM - 10 μM) 处理细胞。使用 OsteoImage™ 染色试剂定量矿化，该试剂可与类骨结节的羟基磷灰石部分结合。在 485/535 nm 的激发/发射波长下测量荧光强度。 [2]
- 矿化测定（茜素红S）：为进行定性分析，将经不同处理分化21天的间充质干细胞（MSCs）固定、洗涤，并用2%茜素红S溶液染色5分钟。洗涤并风干后，使用光学显微镜拍摄染色后的矿化结节图像。[2] - 细胞活力测定（MTS）：将MSCs接种于96孔板中，并在含有NECA（100 nM）、KI-7（1 μM）和/或MRS1706（15 nM）的成骨培养基中培养21天。在第15天和第21天，按照制造商的说明加入MTS试剂并测量吸光度，以评估细胞活力。 [2] - IL-6 生成检测 (ELISA)：将 MSCs 在成骨培养基中培养 5-21 天，培养基中添加 NECA (100 nM)、BAY 60-6583 (5 nM) 和/或 KI-7 (1 μM)，并添加或不添加 MRS1706。在每个时间点收集条件培养基，并使用 ELISA 试剂盒定量检测分泌的 IL-6 水平。[2] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
KI-7 (2-(1-苄基-1H-吲哚-3-基)-2-氧代-N-苯基乙酰胺) 是一种 3-酮基吲哚衍生物，被鉴定为首个 A2B 腺苷受体正向变构调节剂。先前的研究表明，KI-7 对 A2B 腺苷受体具有较高的效力和选择性，优于其他腺苷受体亚型（A1、A2A、A3）。[2] 其作用机制涉及促进 A2B 腺苷受体与 Gs 蛋白的偶联，从而增强正位激动剂对 cAMP 信号通路的功能反应，而无需直接激活受体本身。[2] 在骨生物学领域，本研究表明 KI-7 可通过增强合成 A2B 腺苷受体激动剂和内源性腺苷的作用，促进间充质干细胞向成骨细胞分化。它能增强成骨标志物的表达，加速矿化，并提高成熟成骨细胞的存活率。[2]
该化合物以双相、分化阶段依赖的方式调节IL-6的释放：在早期阶段降低IL-6水平以促进分化，在后期阶段增加IL-6水平以促进成骨细胞存活。这表明，通过KI-7对A2B AR进行正向变构调节，可能是一种有前景的骨骼疾病（如骨质疏松症）治疗方法，因为它能同时促进骨形成并确保成骨细胞的存活。[2] |
| 分子式 |
C23H18N2O2
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|---|---|
| 分子量 |
354.401225566864
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| 精确质量 |
354.136
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| CAS号 |
1489263-00-4
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| PubChem CID |
73350966
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
4.3
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| tPSA |
51.1
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
2
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
27
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| 分子复杂度/Complexity |
523
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C(C(NC1C=CC=CC=1)=O)C1=CN(CC2C=CC=CC=2)C2C=CC=CC=21
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| InChi Key |
MQMGZFRIEZRHHJ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C23H18N2O2/c26-22(23(27)24-18-11-5-2-6-12-18)20-16-25(15-17-9-3-1-4-10-17)21-14-8-7-13-19(20)21/h1-14,16H,15H2,(H,24,27)
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| 化学名 |
2-(1-benzylindol-3-yl)-2-oxo-N-phenylacetamide
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| 别名 |
KI7 KI 7 KI-7
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~250 mg/mL (~705.42 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.87 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8217 mL | 14.1084 mL | 28.2167 mL | |
| 5 mM | 0.5643 mL | 2.8217 mL | 5.6433 mL | |
| 10 mM | 0.2822 mL | 1.4108 mL | 2.8217 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT05872906 | RECRUITING | Device: Acupuncture | Ultrasound Imaging de qi of Acupuncture |
China Medical University Hospital | 2023-03-06 | Not Applicable |
| NCT01395511 | COMPLETED | Device: Acupuncture | Whiplash Associated Disorder (WAD) | Kyunghee University Medical Center | 2009-12 | Phase 2 |
| NCT04374084 | UNKNOWN STATUS | Other: Moxibustion plus Cupping | COVID-19 Convalescence |
Guang'anmen Hospital of China Academy of Chinese Medical Sciences | 2020-05-10 | Not Applicable |
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