| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
EC90: 26 nM (BCRP)
ABCG2 (IC50 for inhibition of ATPase activity = 9.7 nM); ABCB1 (interacts at micromolar concentrations, ≥1 μM sensitizes cells to paclitaxel; stimulates ATPase with IC50 ~2.7 μM); ABCC1 (inhibited at micromolar concentrations, ≥1 μM sensitizes cells to doxorubicin). No precise IC50 values for inhibition of transport were reported for ABCB1 or ABCC1 in this study. [1] Ko-143 targets the breast cancer resistance protein (BCRP/ABCG2), an ATP-binding cassette (ABC) transporter that mediates multidrug resistance by effluxing chemotherapeutic agents out of cancer cells. By inhibiting BCRP, Ko-143 blocks drug efflux, increasing intracellular concentrations of chemotherapeutic agents and reversing drug resistance. Ko-143 displays >200-fold selectivity over P-gp and MRP-1 transporters. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Ko143 (10 nM) 可显著降低 MTX 对小鼠 G2 和 HEK G2 细胞的 IC50 值达 2.5 倍。Ko143 (1-100 μM) 代谢物不抑制 ABC 转运蛋白的功能 [1]。Ko143 是 FTC 类似物，可克服经 SKF 104864A 筛选的人类 IGROV1/T8 细胞和小鼠 MEF3.8/T6400 细胞的耐药性。Ko143 的浓度可以是 EC90 (25 nM) 的 0 倍、1 倍或 8 倍 [2]。在 Madin-Darby 犬肾 (MDCK) 2-BCRP421CC（野生型）和 MDCK2-BCRP421AA（突变型）细胞中，Ko143 抑制 BCRP 介导的 ZD 4522 转运 [3]。
Ko143 在纳摩尔浓度下能有效抑制人源和鼠源细胞中 ABCG2 介导的荧光底物（MTX、PPA、Hoechst 33342、JC-1、P-18）的外排，其中 MTX、Hoechst 和 P-18 的抑制效果存在显著的物种差异（表 3）。在细胞毒性试验中，10 nM 的 Ko143 显著增强了人源 ABCG2 细胞对 MTX 的敏感性（IC50 降低 2.5 倍，P<0.01），并增强了鼠源 ABCG2 细胞对 MTX 的敏感性（P<0.001）。在浓度≥1 μM时，Ko143可增强人ABCB1细胞对紫杉醇（P<0.0001）和人ABCC1细胞对阿霉素（P<0.001）的敏感性，并增强小鼠ABCB1细胞对紫杉醇（P<0.01）的敏感性。流式细胞术分析显示，浓度为20–100 μM的Ko143可显著增加ABCB1细胞中rh123和ABCC1细胞中CAM的积累，证实了高浓度下Ko143对这些转运蛋白的抑制作用。ATPase活性测定表明，Ko143抑制ABCG2 ATPase活性（IC50 = 9.7 nM），但以双相方式刺激ABCB1 ATPase活性（刺激峰值浓度为10 μM，刺激IC50约为2.7 μM）。放射性标记的[³H]Ko143在表达ABCG2的细胞中的积累量是亲代细胞的2倍，且可被FTC或非放射性标记的Ko143置换，表明其与ABCG2特异性结合；在ABCB1或ABCC1细胞中未观察到类似效应。水解代谢物（Ko143酸）对除100 μM浓度下对ABCG2有微弱抑制作用外，对其他三种转运蛋白的抑制活性均可忽略不计。浓度高于5 μM的Ko143在72小时后对HEK细胞具有细胞毒性。[1]体外实验表明，Ko-143是一种强效且选择性的BCRP抑制剂，EC90为26 nM。在25 nM浓度下，Ko-143可逆转人细胞对MTX和拓扑替康的耐药性。 Ko-143 对 P-gp 和 MRP-1 转运蛋白的选择性超过 200 倍。已利用 BCRP 过表达细胞系，通过药物积累和外排试验对其活性进行了表征。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在小鼠中，Ko143（10 mg/kg，口服）可提高 SKF 104864A 的口服可用性[2]。 Ko143 对 ZD 4522 在大鼠体内的药代动力学有显著影响 [3]。
体内实验：在大鼠中，静脉注射 Ko143（文中未明确剂量，但作为预处理连续 7 天，每日一次？实际上，实验方案中写的是“Ko143（静脉注射）”，连续 7 天，每日两次？文中写道：“第四组和第五组首先分别口服 80mg/kg 熊果酸，静脉注射 Ko143（BCRP 抑制剂），连续 7 天，每日两次”——但并未说明 Ko143 的剂量。然而，药代动力学结果表明，与单独使用瑞舒伐他汀相比，Ko143 预处理显著增加了瑞舒伐他汀的 Cmax、AUC0-t 和 AUC0-∞，并降低了 CLz/F（所有）。 P<0.05）。对Tmax或T1/2无显著影响。数据见表2：Cmax 4.18±0.18 vs 2.23±0.22 mg/L；AUC0-t 62.72±6.34 vs 31.99±1.93 mg·L⁻¹·min⁻¹；AUC0-∞ 80.17±9.56 vs 40.92±3.10；CLz/F 0.25±0.03 vs 0.49±0.04 L·h⁻¹·kg⁻¹。[3] 体内研究表明，Ko-143是一种口服生物利用度高的BCRP抑制剂。它通过抑制BCRP，逆转多药耐药性，并增强BCRP底物化疗药物的疗效。该化合物的体内活性已在耐药性临床前模型中得到证实。肿瘤。然而，公开资料中具体的治疗方案和详细数据有限。 |
| 酶活实验 |
使用从表达人ABCG2或ABCB1的Hi-five昆虫细胞中分离的粗膜进行ATPase活性测定。将膜囊泡在ATPase活性测定缓冲液（50 mM MES-Tris pH 6.8、50 mM KCl、5 mM叠氮化钠、1 mM EGTA、1 mM乌本苷、10 mM MgCl₂、2 mM二硫苏糖醇）中，并加入不同浓度的Ko143，以及或不加入氟化铍（0.2 mM硫酸铍加2.5 mM NaF）。按照先前描述的方法，通过测定与5 mM ATP孵育后无机磷酸盐的释放量来评估ATP水解。将基础活性（不含Ko143）标准化为100%，并将活性变化百分比与Ko143浓度作图，以确定IC50值。对于 ABCG2，Ko143 可降低 ATPase 活性，IC50 值为 9.7 nM；对于 ABCB1，Ko143 可刺激 ATPase 活性，呈现双相反应，在 10 μM 时达到最大刺激（为基础活性的 2 倍），刺激的 IC50 值为 2.7 μM。[1]
在非细胞生化分析中，Ko-143 对 BCRP 的抑制作用通过膜囊泡转运实验进行评估。将从表达 BCRP 的细胞中制备的膜囊泡与放射性标记的 BCRP 底物（例如 [³H]米托蒽醌或 [³H]甲氨蝶呤）在不同浓度的 Ko-143 存在下孵育。测量囊泡内底物的积累，并根据抑制曲线确定 IC50/EC90 值。 |
| 细胞实验 |
在加入药物的前一天晚上，将细胞以 400 或 1000 个/孔的密度接种于 96 孔板中。沿孔板的一个轴线施加一系列不同浓度的药物，并在整个实验过程中保持药物浓度不变。4-5 天后收集细胞，此时未处理的孔仍处于亚融合状态。使用 CyQuant 或 Sybr Green I 荧光核酸染料定量细胞的相对增殖。使用人细胞系进行的实验在 0.1 μM PSC833 存在下进行，以抑制 P-gp 活性，从而抑制其干扰。
细胞毒性实验：将细胞以 4000 个/孔的密度接种于 96 孔板中。加入不同浓度的转运体特异性细胞毒性药物（MTX 用于 ABCG2，紫杉醇用于 ABCB1，阿霉素用于 ABCC1），并加入或不加入 Ko143。 72 小时后，使用 CellTiter-Glo 发光细胞活力检测试剂盒测定细胞活力，并计算细胞毒性药物的 IC50 值。耐药率 (RR) 通过将耐药细胞的 IC50 值除以亲代细胞的 IC50 值来确定。流式细胞术：将细胞悬浮于含有荧光底物（ABCG2 的底物为 MTX、PPA、Hoechst 33342、JC-1 或 P-18；ABCB1 的底物为 rh123；ABCC1 的底物为 calcein-AM）的培养基中，并加入或不加入 Ko143 或阳性对照抑制剂（ABCG2 的底物为 FTC，ABCB1 的底物为环孢素 A，ABCC1 的底物为 MK571）。在 37°C 孵育 30-45 分钟后，洗涤细胞并在流式细胞仪上进行分析；记录每个样本 10,000 个细胞的几何平均荧光强度。 [³H]Ko143 的积累：将细胞与 [³H]Ko143 孵育至多 45 分钟，孵育过程中可加入或不加入转运体抑制剂（FTC、Ko143、DCPQ 或 MK571）。洗涤并经胰蛋白酶消化后，通过液体闪烁计数法测量放射性，并以细胞计数进行标准化。[1] Ko-143 的体外细胞实验包括测量其对 BCRP 过表达癌细胞系中药物积累和外排的影响。在荧光或放射性标记的 BCRP 底物（例如米托蒽醌或阿霉素）存在的情况下，用 Ko-143 处理细胞。使用流式细胞术或闪烁计数法测量底物的细胞内积累。通过测量化疗药物存在下的细胞活力来评估 Ko-143 逆转耐药性的能力。 |
| 动物实验 |
动物实验方案：将Sprague-Dawley大鼠（260-280 g）随机分为若干组（n=6）。在Ko143治疗组中，大鼠连续7天每天两次静脉注射Ko143（具体剂量未说明）。第7天，在注射Ko143后，灌胃给予瑞舒伐他汀（50 mg/kg）。分别于给药后0.5、1、1.5、3、5、8、10、12和24小时从股动脉采集血样。分离血浆后，于-20℃保存直至分析。采用液相色谱-质谱联用（LC-MS）法测定瑞舒伐他汀浓度，以匹伐他汀为内标。使用DAS 2.0软件计算药代动力学参数。 [3]
已在异种移植瘤模型中利用过表达BCRP的癌细胞对Ko-143进行了体内动物研究。该化合物通常口服给药，并与化疗药物联合使用，评估其对肿瘤生长、药物蓄积和生存的影响。Ko-143可通过逆转多药耐药性来增强BCRP底物药物的疗效。然而，具体的研究方案和数据有限。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在大鼠血浆中，Ko143在室温下迅速水解，半衰期约为12分钟，60分钟后未检测到母体化合物。加入酯酶抑制剂氟化钠（NaF）可完全阻止水解，表明其为酶促降解。Ko143酸（水解代谢物）对ABCG2、ABCB1或ABCC1的抑制活性可忽略不计，仅在100 μM浓度下对ABCG2有微弱的抑制作用。据报道，Ko143的血浆蛋白结合率为92-95%（引自文献，本研究未测定）。[1]
Ko-143的分子量为469.6，分子式为C26H35N3O5。它是一种强效且选择性的BCRP抑制剂，EC90为26 nM。该化合物具有口服生物利用度，对P-gp和MRP-1转运蛋白的选择性超过200倍。为保证长期稳定性，该化合物通常以粉末形式储存于-20°C。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Ko-143 在 HEK-293 细胞中孵育 72 小时后，浓度高于 5 μM 时表现出细胞毒性。未报道其他毒性数据（例如体内毒性）。[1] 作为一种研究化合物，Ko-143 不适用于人体，应采取适当的安全预防措施。虽然尚未有大量关于该化合物的全面毒理学研究发表，但据描述，它是富马曲莫金 C 的无毒类似物。应按照标准实验室安全指南进行储存和处理。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
LSM-6260 是一种 β-咔啉化合物，属于叔丁酯类。
Ko143 是一种叔丁酯，可被血浆酯酶快速水解为无活性的羧酸代谢物。尽管在纳摩尔浓度下是一种强效的 ABCG2 抑制剂，但在较高的微摩尔浓度下，它对 ABCG2 缺乏特异性，也会抑制 ABCB1 和 ABCC1。在体外和体内实验中使用 Ko143 时，尤其是在可能出现高局部浓度的 PET 成像研究中，应考虑这种非选择性。该研究强调了需要特异性的 ABCG2 底物或抑制剂才能可靠地成像转运体功能。[1] Ko-143 是一种强效且选择性的乳腺癌耐药蛋白 (BCRP/ABCG2) 多药转运体抑制剂，EC90 为 26 nM。 Ko-143是真菌毒素fumitremorgin C的无毒类似物，对P-gp和MRP-1转运蛋白的选择性超过200倍。在25 nM浓度下，Ko-143可逆转人细胞对MTX和拓扑替康的耐药性。它是一种口服生物利用度高的BCRP抑制剂，目前仍处于研究阶段，尚未获批上市。 |
| 分子式 |
C26H35N3O5
|
|---|---|
| 分子量 |
469.582
|
| 精确质量 |
469.257
|
| CAS号 |
461054-93-3
|
| PubChem CID |
10322450
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
689.8±55.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
147ºC
|
| 闪点 |
371.0±31.5 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±2.2 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.597
|
| LogP |
2.42
|
| tPSA |
100.73
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
8
|
| 重原子数目 |
34
|
| 分子复杂度/Complexity |
794
|
| 定义原子立体中心数目 |
3
|
| SMILES |
CC(C)C[C@H]1C2=C(C[C@@H]3N1C(=O)[C@@H](NC3=O)CCC(=O)OC(C)(C)C)C4=C(N2)C=C(C=C4)OC
|
| InChi Key |
NXNRAECHCJZNRF-JBACZVJFSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C26H35N3O5/c1-14(2)11-20-23-17(16-8-7-15(33-6)12-19(16)27-23)13-21-24(31)28-18(25(32)29(20)21)9-10-22(30)34-26(3,4)5/h7-8,12,14,18,20-21,27H,9-11,13H2,1-6H3,(H,28,31)/t18-,20-,21-/m0/s1
|
| 化学名 |
tert-butyl 3-((3S,6S,12aS)-6-isobutyl-9-methoxy-1,4-dioxo-1,2,3,4,6,7,12,12a-octahydropyrazino[1',2'
|
| 别名 |
Ko-143 Ko-143 Ko-143
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~212.96 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.32 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.32 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液； 超声助溶 (<50°C). 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.32 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.32 mM) in 5% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1296 mL | 10.6478 mL | 21.2956 mL | |
| 5 mM | 0.4259 mL | 2.1296 mL | 4.2591 mL | |
| 10 mM | 0.2130 mL | 1.0648 mL | 2.1296 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
|
|
|
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
