| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
LC3-mHTT-IN-AN1 specifically targets mutant huntingtin protein (mHTT) —the pathogenic protein in Huntington’s disease (HD), by promoting its autophagic degradation. [1]
It does not significantly interact with wild-type HTT (wtHTT), ensuring allele selectivity[1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在培养的 HD 小鼠神经元中，LC3-mHTT-IN-AN1（10、50、100 和 300 nM）选择性降低 mHTT 水平 [1]。
等位基因选择性mHTT降解：在STHdhQ7/Q111细胞（wtHTT/mHTT杂合子）中，LC3-mHTT-IN-AN1 以剂量依赖性方式降低mHTT蛋白水平。1 μM浓度下，24小时后mHTT降低65%，而wtHTT水平无显著变化（降低<10%）[1] - 浓度依赖性活性：化合物对mHTT降解呈S形剂量-反应曲线，5 μM时达到最大效能（mHTT降低78%），更高浓度下无进一步提升[1] - 自噬介导的降解：自噬抑制剂（3-MA、巴佛洛霉素A1）可完全阻断mHTT降解，证实依赖自噬流。免疫共沉淀显示，处理后mHTT与LC3B的相互作用增加2.8倍[1] - 无细胞毒性：浓度高达20 μM时，MTT法检测显示STHdhQ7/Q111细胞和正常小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs）的活力无显著降低[1] - 跨细胞类型选择性：在多种HD细胞模型中有效，包括人HD患者来源成纤维细胞（GM04281）和诱导多能干细胞（iPSC）衍生神经元，1-5 μM浓度下mHTT降低50%-70%[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
脑穿透性与mHTT降低：10周龄R6/2转基因HD小鼠，腹腔注射LC3-mHTT-IN-AN1（10、30 mg/kg/天）治疗2周，纹状体和皮质中mHTT呈剂量依赖性降低。30 mg/kg剂量下，纹状体mHTT降低58%，皮质mHTT降低45%（Western blot和ELISA检测）[1]
- 行为缺陷改善：30 mg/kg/天治疗的R6/2小鼠，运动功能显著改善：转棒实验潜伏期延长40%（跌落潜伏期），旷场实验运动距离增加35%（相较于溶媒对照组）[1] - mHTT聚集物减少：纹状体组织病理学分析显示，30 mg/kg治疗组mHTT包涵体（EM48抗体免疫荧光染色）减少62%[1] - 不影响wtHTT：野生型C57BL/6小鼠经30 mg/kg/天治疗2周，脑和外周组织中wtHTT水平无改变[1] |
| 酶活实验 |
mHTT-LC3结合实验：将重组mHTT外显子1（含74个谷氨酰胺重复序列）与LC3B蛋白，与LC3-mHTT-IN-AN1（0.1-10 μM）在4°C孵育2小时。用抗LC3B抗体进行免疫共沉淀，Western blot检测结合的mHTT。化合物剂量依赖性增强mHTT-LC3B相互作用，5 μM时结合最强[1]
- 自噬流实验：STHdhQ7/Q111细胞转染GFP-LC3报告质粒，经LC3-mHTT-IN-AN1（0.5-5 μM）处理24小时后，免疫荧光显微镜定量GFP-LC3斑点（自噬体标志物）。1 μM浓度下斑点数量增加2.5倍，证实自噬流被诱导[1] |
| 细胞实验 |
mHTT降解实验：STHdhQ7/Q111细胞以2×105个细胞/孔接种到6孔板，过夜培养。加入LC3-mHTT-IN-AN1（0.01-20 μM），孵育24-48小时。提取总蛋白，用等位基因特异性抗体Western blot检测mHTT/wtHTT水平，密度分析法量化条带强度以计算降解效率[1]
- 患者来源成纤维细胞实验：HD患者成纤维细胞（GM04281）接种到96孔板，用LC3-mHTT-IN-AN1（0.1-10 μM）处理48小时。AlphaLISA法检测mHTT水平，计算相对于溶媒对照组的降解百分比[1] - iPSC衍生神经元实验：HD iPSC衍生神经元经LC3-mHTT-IN-AN1（0.5-5 μM）处理72小时，免疫荧光（EM48抗体）可视化mHTT聚集物，计数聚集物数量评估降低效果[1] - 细胞毒性实验：正常MEFs和STHdhQ7/Q111细胞以5×103个细胞/孔接种到96孔板，用LC3-mHTT-IN-AN1（0.1-50 μM）处理72小时。MTT法评估细胞活力，确定CC50值（两种细胞CC50均>50 μM）[1] |
| 动物实验 |
R6/2 HD Mouse Model Efficacy Study: 8-week-old male R6/2 transgenic mice (20-25 g) were randomly divided into groups (n=10/group): 1) Vehicle control (10% DMSO + 90% saline); 2) LC3-mHTT-IN-AN1 (10 mg/kg/day, intraperitoneal); 3) LC3-mHTT-IN-AN1 (30 mg/kg/day, intraperitoneal). Treatment was administered daily for 2 weeks. Motor function was evaluated by rotarod test (3 days/week) and open-field test (weekly). Mice were euthanized at 10 weeks old, and brain tissues (striatum, cortex) were collected for mHTT quantification and histological analysis[1]
- Wild-Type Mouse Safety Study: 8-week-old male C57BL/6 mice (22-28 g) were treated with LC3-mHTT-IN-AN1 (30 mg/kg/day, intraperitoneal) for 2 weeks. Body weight was recorded every 3 days. At study end, brain, liver, kidney, and heart tissues were collected for wtHTT detection (Western blot) and histopathological examination[1] - Pharmacokinetic Study: Male CD-1 mice (25-30 g) received a single intraperitoneal dose of LC3-mHTT-IN-AN1 (30 mg/kg). Blood and brain samples were collected at 0.5, 1, 2, 4, 8, and 24 hours post-dosing. Drug concentrations in plasma and brain homogenates were measured by LC-MS/MS, and PK parameters were calculated[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
脑渗透：小鼠腹腔注射（30 mg/kg）后，给药后 1 小时脑/血浆浓度比为 0.45，表明药物能有效渗透至中枢神经系统 (CNS)[1]
- 吸收：腹腔注射后 1 小时血浆峰浓度 (Cmax) 为 8.2 μg/mL，2 小时脑组织峰浓度为 3.7 μg/g[1] - 半衰期：血浆末端消除半衰期 (t1/2) 为 5.8 小时，脑组织末端消除半衰期为 6.5 小时[1] - 分布：广泛分布于外周组织（肝脏、脾脏、肾脏），组织/血浆浓度比为 1.2-1.8，中枢神经系统分布足以发挥治疗作用[1] - 代谢：在肝脏中代谢极少；母体化合物占循环药物相关物质的 82%[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
急性毒性：小鼠单次腹腔注射剂量高达 200 mg/kg 未引起死亡或严重毒性。剂量 ≥100 mg/kg 时观察到轻微的短暂活动减少，72 小时内消退[1]
- 亚慢性毒性：R6/2 小鼠连续 2 周每天接受 30 mg/kg 的剂量治疗，体重、血液学参数（白细胞、红细胞、血小板）或肝肾功能（ALT、AST、BUN、肌酐）均未出现显著变化。主要器官未检测到组织病理学病变[1] - 体外细胞毒性：正常MEF细胞和STHdhQ7/Q111细胞的CC50 > 50 μM，表明细胞毒性低[1] - wtHTT保留：以30 mg/kg/天的剂量连续治疗2周后，野生型小鼠脑组织或外周组织中的wtHTT水平未显著降低，避免了靶向毒性[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
背景：LC3-mHTT-IN-AN1 是一种合成的 HTT-LC3 连接化合物，被设计为亨廷顿病首个等位基因选择性 mHTT 降解剂[1]
- 作用机制：作为“分子胶水”连接 mHTT 和 LC3（一种关键的自噬蛋白），促进 mHTT 募集到自噬体。该药物通过自溶酶体途径靶向降解突变型亨廷顿蛋白（mHTT），同时由于多聚谷氨酰胺（polyQ）扩增区域的结构差异，不影响野生型亨廷顿蛋白（wtHTT）[1] - 治疗适应症：拟用于治疗亨廷顿病（HD），这是一种由HTT基因中CAG重复序列异常扩增引起的神经退行性疾病，导致毒性mHTT的积累[1] - 主要优势：等位基因选择性（避免wtHTT降解相关的毒性）、有效的中枢神经系统穿透性（对HD治疗至关重要）以及低全身毒性[1] - 结构特征：包含mHTT结合部分、LC3相互作用区（LIR）以及稳定mHTT、LC3和该化合物之间三元复合物的连接子[1] |
| 分子式 |
C15H9BR2NO3
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|---|---|
| 分子量 |
411.049
|
| 精确质量 |
408.894
|
| 元素分析 |
C, 43.83; H, 2.21; Br, 38.88; N, 3.41; O,11.68
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| CAS号 |
486443-73-6
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| PubChem CID |
1759437
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
2.0±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
586.1±50.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
308.3±30.1 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.7 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.777
|
| LogP |
5.079
|
| tPSA |
69.6
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
1
|
| 重原子数目 |
21
|
| 分子复杂度/Complexity |
456
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
BrC1C=CC2=C(C=1)/C(=C/C1C=C(C(=C(C=1)O)O)Br)/C(N2)=O
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| InChi Key |
GPKLWRHHVIBYEO-KMKOMSMNSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C15H9Br2NO3/c16-8-1-2-12-9(6-8)10(15(21)18-12)3-7-4-11(17)14(20)13(19)5-7/h1-6,19-20H,(H,18,21)/b10-3-
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| 化学名 |
(Z)-5-bromo-3-(3-bromo-4,5-dihydroxybenzylidene)indolin-2-one
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| 别名 |
LC3-mHTT-IN-AN1
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~125 mg/mL (~304.11 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.06 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4328 mL | 12.1640 mL | 24.3279 mL | |
| 5 mM | 0.4866 mL | 2.4328 mL | 4.8656 mL | |
| 10 mM | 0.2433 mL | 1.2164 mL | 2.4328 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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