| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
In mammals, Linuron is reported to compete with androgens for androgen receptor (AR) binding, though no binding affinity data (IC50, Ki, etc.) are provided in these studies [3]. It also reduces the expression of key testosterone synthesis enzymes P450scc, 3β‑HSD, P450c17, and 17β‑HSD in Leydig cells, and decreases PCNA (proliferation marker) [3]. In plants, Linuron targets photosystem II (PSII) as a PSII inhibitor [4].
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| 体外研究 (In Vitro) |
在瞬时共转染hAR和MMTV-荧光素酶报告基因的CV-1细胞中，利诺隆抑制了DHT诱导的转录激活，在低至10 µM的剂量下，其EC50约为10 µM（p < 0.02）。在稳定转染MMTV.neo.荧光素酶的MDA-MB-453-KB2细胞中，利诺隆在5 µM及以上浓度下显著抑制了DHT诱导的荧光素酶表达，EC50约为10 µM。通过与组成型活性CMV-ABC共转染，证实这些浓度的利诺隆处理不具有细胞毒性，因为CMV-ABC未显示荧光素酶表达降低。在 COS 细胞中，利诺隆与 [3H] R1881 竞争结合人雄激素受体 (AR)，EC50 值约为 20 µM；在无细胞结合实验中，利诺隆与大鼠前列腺 AR 竞争结合，EC50 值约为 200 µM。在以农田土壤为起始原料的液体富集培养中，含有 libA 和 hylA 基因的细菌共存现象消失，而含有 hylA 基因的菌群占据主导地位。在农田土壤中，hylA 基因拷贝数对利诺隆的应用有响应，并且携带 hylA 和 libA 基因的细菌同时生长。然而，高hylA丰度并不总是与高利谷隆矿化能力相关，因为在这些时间点，dcaQ基因拷贝数（下游3,4-DCA降解的标志物）较低，表明含hylA的细菌并非总是含有下游途径，并且必须与3,4-DCA矿化微生物组成共生体。dcaQ基因拷贝数通常高于hylA基因拷贝数，这意味着仅含有3,4-DCA分解代谢途径的菌群可以从具有HylA/LibA活性的微生物中获益。在含有预处理土壤的BPS基质中，含hylA的细菌成功地与含libA的细菌竞争利谷隆作为碳源，并共同生长。在含有未预处理土壤的BM中，hylA基因拷贝数对利谷隆的应用没有响应，表明携带hylA的微生物可能来源于预处理土壤。在第 51 周至第 55 周之间，经过干旱复湿期后，添加利谷隆的 BM 中 hylA 基因拷贝数增加了 8 倍，而 libA 保持不变或减少，表明干旱胁迫有利于携带 hylA 的菌群。在未预处理的土壤中添加利谷隆的 BM 中，hylA 基因拷贝数对添加利谷隆表现出一定的响应，但尽管矿化能力很高，其拷贝数仍随时间推移而下降，这表明可能存在其他利谷隆水解酶（例如 PuhA、PuhB）。利谷隆抑制了 CV-1 和 MDA-MB-453-KB2 细胞中 DHT 诱导的基因表达，表现出抗雄激素活性。它还通过改变体内 TRPM2 和 C3 mRNA 水平来降低雄激素依赖性基因的表达。[1][2]
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| 体内研究 (In Vivo) |
在妊娠第13天（GD13）至第18天（GD18），母鼠经口给予0、50、100、150和200 mg/kg剂量的利诺隆（Linuron），导致雄性后代出现剂量相关的生殖毒性。出生后第2天（PND2），100、150和200 mg/kg组的血清睾酮浓度分别降低了33.7%、46.0%和58.8%（r=-0.838，p<0.05）。出生后第28天（PND28），100-200 mg/kg组的肛门生殖器距离（AGD）缩短了17.7-24.6%（r=-0.873，p<0.05）。对妊娠20天胎儿的病理检查显示，泌尿生殖褶融合不全，生精小管受损并伴有核固缩和空泡，以及睾丸间质细胞的超微结构改变（粗面内质网扩张，线粒体肿胀）[3]。在植物中，施用利诺隆（以Afalon 50WP形式，有效浓度5 mg/L）对黑麦幼苗的生长和烷基间苯二酚含量有影响，且这种影响取决于温度和光照。在22℃时，利诺隆降低了绿色幼苗和黄化幼苗的鲜重和干重（例如，黄化植株的鲜重降低了61%）。在29℃时，利诺隆增加了鲜重和烷基间苯二酚含量；在22℃和15℃时，利诺隆通常会降低烷基间苯二酚的含量。该化合物还改变了烷基间苯二酚的同系物组成，通常有利于抗真菌活性[4]。
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| 酶活实验 |
为了进行与大鼠雄激素受体（AR）的竞争性结合实验：将去势24小时后90日龄SD大鼠的腹侧前列腺组织在TEDG缓冲液（1.5 mM EDTA、1.0 mM PMSF、1.0 mM钼酸钠、1.0 mM DTT、10 mM Tris、10%甘油）中以10 ml/g组织的比例匀浆。离心（30,000 × g）后，合并上清液。将浓度分别为0、0.312、1.0、3.12、10.0、31.2、100和312 µM的利诺隆与10 nM [3H] R1881和10 µM曲安奈德（溶于乙醇并在玻璃管中干燥）于4°C孵育过夜。使用 100 倍摩尔过量的未标记 R1881 评估非特异性结合。所有样品均与 300 µl 混合前列腺匀浆孵育。使用 500 µl 60% HAP 悬浮液（溶于 50 mM Tris 缓冲液）将配体结合的受体与未结合的配体分离。样品用 50 mM Tris 洗涤 3 次（600 × g 离心）。使用 2 ml 乙醇回收受体结合的配体，并通过液体闪烁计数法测定计数。[2]
对于 COS 全细胞 hAR 结合实验：使用 DEAE-葡聚糖将 pCMVhAR 表达载体（1 µg/孔）瞬时转染至 COS 细胞。 24小时后，将细胞暴露于5 nM [3H] R1881中，并分别加入或不加入不同剂量的未标记利谷隆（0、0.5、1.0、5.0、10、15和20 µM），于37°C孵育2小时。使用100倍摩尔过量的未标记R1881测定非特异性结合。用PBS洗涤细胞，用200 µl ZAP缓冲液（0.13 M乙基二甲基十六烷基溴化铵，含3%冰醋酸）裂解细胞，并通过液体闪烁计数法测定放射性。[2] 针对利谷隆特异性分解代谢基因的qPCR：使用Primer3web和Primer-BLAST设计引物。对于hylA基因，引物基于Variovorax sp.的序列设计。菌株 WDL1 和 PBS-H4。对于 dcaQ，引物基于 Variovorax 菌株 SRS16、WDL1、PBS-H4 和氯苯胺降解菌的序列设计。使用特异性引物组区分了核苷酸同一性约为 80% 的两个主要 dcaQ 组（dcaQ₁ 和 dcaQ₁₁）。qPCR 在 Rotor Gene 实时离心 DNA 扩增仪上进行，反应体系为：7.5 µl Absolute QPCR SYBR Green 混合液、0.30 µl 正向引物（200 nM）、0.30 µl 反向引物（200 nM）、3.90 µl 无核酸酶水和 3 µl 10 倍稀释的模板 DNA（例外：hylA 使用 100 nM 反向引物）。反应条件：95°C 15分钟，随后进行40个循环，每个循环包括94°C 15秒、60°C 15秒和72°C 15秒。标准曲线采用10倍系列稀释的扩增子（1至10⁸拷贝/µl）构建，这些扩增子由SRS16（dcaQ₁）和WDL1（hylA和dcaQ₁₁）菌株的基因组DNA经常规PCR扩增获得。使用凝胶回收试剂盒从琼脂糖凝胶中纯化片段，并用NanoDrop 1000分光光度计测定DNA浓度。检测限为1.2 × 10³拷贝/g干重。基因丰度以每拷贝细菌16S rRNA基因的拷贝数或占16S rRNA基因拷贝数的百分比表示。[1] |
| 细胞实验 |
CV-1转录激活实验：使用Fugene试剂（每60 mm培养皿5 µl Fugene + 95 µl无血清培养基）将1 µg pCMVhAR和5 µg MMTV-荧光素酶报告基因瞬时转染至CV-1细胞。转染24小时和48小时后，将细胞暴露于0.1 nM DHT和不同浓度的利尿素（0、0.5、1.0、5、10、15和20 µM）的DMEM-5%葡聚糖活性炭处理的胎牛血清中。利尿素处理5-6小时后，用PBS洗涤细胞一次，并用500 µl裂解缓冲液（Promega）收集细胞。取0.05 ml裂解细胞进行荧光素酶活性检测，并使用Monolight 2010发光仪测定相对光单位。 [2]
为评估 CV-1 细胞的细胞毒性：将 CV-1 细胞（每 60 mm 培养皿 200,000 个细胞）用 50 ng CMV-ABC 和 5 µg MMTV-荧光素酶进行转染。转染后 24 和 48 小时，分别用 0.5、1 和 10 µM 利尿隆和 0.1 nM DHT 处理细胞。荧光素酶活性的降低表明存在细胞毒性。[2] 为进行 MDA-MB-453-KB2 稳定细胞转录激活分析：将 MDA-MB-453-KB2 细胞（含有内源性 hAR，稳定转染 MMTV.neo.荧光素酶）在 37°C、无 CO₂ 的 L-15 培养基（含 10% FBS）中培养。将细胞以 10,000 个/孔的密度接种于发光 96 孔板中。用乙醇储备液配制给药溶液，方法是将 1 µl 乙醇储备液分装到 1 ml 培养基中。细胞贴壁后（5-6 小时），移除培养基，并更换为含有利尿隆（0、1、5、10、15 或 20 µM）和 0.1 nM 二氢睾酮 (DHT) 的给药培养基。对照孔中加入 100 µl/孔（1 µl 乙醇/ml 培养基）。细胞在 37°C 下孵育过夜。24 小时后，移除培养基，用 25 µl PBS 洗涤细胞一次，然后在室温下用 25 µl 裂解缓冲液（Promega）收集细胞。使用微孔板发光仪测定相对光单位 (RLU)。 [2] 对于靶向 hylA、dcaQ₁ 和 dcaQ₁₁ 的常规 PCR：PCR 反应体系包含 5 µl DreamTaq Green 缓冲液 (10×)、5 µl 1% BSA、4 µl 2.5 mM dNTPs、0.25 µl 0.1 mM 正向和反向引物，以及 0.25 µl DreamTaq 聚合酶 (5 单位/µl)，用无核酸酶水补足至 50 µl。反应条件：95°C 预变性 15 分钟，然后进行 30 个循环，每个循环包括 94°C 变性 1 分钟、60°C 退火 1 分钟和 72°C 延伸 1 分钟，最后在 72°C 下延伸 10 分钟。扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳（1%琼脂糖，75分钟，90伏）进行可视化，使用GelRed作为核酸染料。[1] |
| 动物实验 |
在大鼠生殖毒性研究中，妊娠Sprague-Dawley大鼠（9周龄，雄性240±10 g，雌性180±10 g）饲养于受控条件下（21±1°C，湿度55±5%，12小时光照/12小时黑暗）。每日检查阴道涂片；精子阳性涂片标记为妊娠第0天（GD0）。在妊娠第13天（GD13），各组母鼠连续5天（GD13-GD18）每日一次灌胃给予溶于花生油的利诺隆（2 mL/kg体重），剂量分别为0（对照组）、50、100、150或200 mg/kg。在妊娠第20天（GD20），每组处死4只母鼠；收集胎儿进行病理学和免疫组织化学检查。其余母鼠继续分娩。在出生后第2天（PND2），通过断头法采集雄性幼崽的血液，用于测定血清睾酮水平（1000×g，4℃，30分钟）。在出生后第28天（PND28），记录肛门生殖器距离（AGD）和体重[3]。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
吸收、分布和排泄
在慢性毒性研究中……以25至2500 ppm的膳食剂量给大鼠和犬饲喂利诺隆……连续两年……血液和……（肌肉、脂肪、肝脏、肾脏、脾脏）中的苯胺总残留量为几ppm至100 ppm。……这些残留量仅占动物摄入除草剂总量的一小部分。利诺隆最容易通过根部吸收；通过叶和茎的吸收较少。然而，叶面吸收……显著高于敌草隆、蒙脱石或芬草隆。……运输主要向上进入木质部。……在短期消除实验中获得的残留数据……72小时后血液和各种组织中残留的放射性物质总量……不超过且通常远低于给药剂量的1%。代谢/代谢产物……从球形芽孢杆菌（Bacillus spheroidae）中获得了一种利诺隆诱导酶。该酰胺酶通过水解酰胺键降解利诺隆，释放二氧化碳和N,O-二甲基羟胺。该酶对甲氧基苯脲类化合物具有特异性，不水解1,1-二甲基苯脲类化合物。温室研究表明，利诺隆通过吸收水分进入玉米（Zea mays L）、大豆（Glycine max L）和马唐（Digitaria sanguinalis L）的组织。在这些植物组织中检测到了去甲基利诺隆和3,4-二氯苯胺。……植物中存在一些利诺隆…… 利诺隆……被喂给白化大鼠。尿液代谢物分析显示，尿液中存在游离的N-(3,4-二氯苯基)脲、N-(3,4-二氯苯基)-N'-甲基脲和3,4-二氯苯胺。N-(2-羟基-4,5-二氯苯基)-N'-甲基脲、N-(5-羟基-3,4-二氯苯基)脲和6-乙酰氨基-2,3-二氯苯酚被鉴定为葡萄糖醛酸苷或硫酸盐。在大鼠体内，利谷隆主要通过脱甲氧基化和苯环羟基化代谢。尿液中的主要代谢物是脲衍生物；未检测到未代谢的利谷隆。仅检测到痕量的3,4-二氯苯胺。如果利谷隆在人体内的主要代谢途径是生成二氯苯胺，那么在中毒剂量后应该会出现高铁血红蛋白血症。有关利谷隆（共9种代谢物）更完整的代谢物数据，请访问HSDB记录页面。 血清睾酮水平：在接受去势睾酮植入的成年雄性大鼠中，以100 mg/kg/天的剂量连续7天接受利谷隆治疗，血清睾酮水平为1.23 ± 0.09 ng/ml，与对照组（1.40 ± 0.12 ng/ml）或氟他胺治疗组（1.28 ± 0.07 ng/ml）相比无显著差异。[2] 在为期4天的实验中，利谷隆治疗组的血清睾酮水平为2.2 ng/ml，氟他胺治疗组为2.1 ng/ml，对照组（去势+睾酮）为1.9 ng/ml。 [2] 在成年大鼠中，利谷隆以 200 mg/kg（神经毒性剂量）给药仅使 LH 水平升高 25%，而以 100 mg/kg/天的剂量给药则对血清激素水平无影响。利谷隆治疗并未使青春期雄性大鼠的血清 LH 水平升高（下降 25%）或睾酮水平升高（升高 12%）。[2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
毒性概述
利诺隆是一种弱效的雄激素受体竞争性抑制剂，可在体外抑制雄激素诱导的基因表达。这可能部分导致雄性大鼠出现雄激素依赖性组织畸形。 （A9961）毒性数据 LC50（大鼠）= 48 mg/m³/4h 非人类毒性值 LD50 兔经皮给药 > 5000 mg ai（基于 50% 可湿性粉剂）/kg LD50 雌性大鼠口服给药 4000 mg/kg（淀粉粘液/技术级利诺隆） LC50 大鼠吸入 > 4.06 mg/l 空气/4 小时 LD50 兔口服给药 2250 mg/kg 有关利诺隆更完整的非人类毒性数据（共 11 项），请访问 HSDB 记录页面。 在大鼠中，母体暴露于利诺隆会导致雄性后代出现发育性生殖毒性，包括血清睾酮水平降低、肛门生殖器距离缩短以及生殖器官结构异常。未提供 LD50 或其他急性毒性值。在植物中，浓度为 5 mg/L 的利诺隆在 22°C 时抑制植物生长（降低鲜重/干重），尤其是在黄化幼苗中（鲜重降低 61%），但在其他温度下则表现出较小的作用或刺激作用 [4]。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
根据美国环境保护署 (EPA) 的说法，利谷隆可能具有发育毒性。利谷隆是一种无色、无腐蚀性的晶体，用作除草剂。利谷隆属于苯脲类化合物，其结构为N-甲基脲，1位被甲氧基取代，3位被3,4-二氯苯基取代。它是一种外源物质，属于环境污染物、除草剂和农用化学品。它是一种二氯苯类化合物，属于苯脲类化合物，其作用机制与N-甲基脲相关。利谷隆是一种用于控制一年生禾本科杂草和阔叶杂草出苗前和出苗后生长的除草剂。它具有选择性和内吸性作用，兼具触杀和残效。已知它能抑制光合作用（光系统II）。它是一种选择性出苗前和出苗后除草剂。 （摘自《默克索引》第11版）作用机制：抑制光合作用。
利诺隆是一种苯脲类除草剂（C2亚组），可抑制光系统II（PSII）的光合作用。它用于大豆、玉米、棉花、胡萝卜、小麦、花生、甘蔗和蔬菜的杂草控制。据报道，该化合物通过与雄激素受体竞争而具有抗雄激素作用，导致生殖畸形。本研究证实了该物质对大鼠的发育毒性及其对黑麦幼苗次生代谢产物（烷基间苯二酚）的影响，这可能影响其抗病性[3][4]。 在植物实验中，黑麦种子经表面消毒后，置于浸有除草剂悬浮液（10 mg/L 市售制剂，含 5 mg/L 活性成分利诺隆）或水（对照）的湿纤维素棉絮上，在 15、22 或 29°C 下，于持续光照或黑暗条件下培养 5 天。测定种子鲜重和干重，并提取烷基间苯二酚，采用薄层色谱法 (TLC) 和气相色谱-质谱联用 (GC/MS) 进行分析[4]。 |
| 分子式 |
C9H10CL2N2O2
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|---|---|
| 分子量 |
249.09
|
| 精确质量 |
248.011
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| CAS号 |
330-55-2
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| 相关CAS号 |
Linuron-d6;1219804-76-8
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| PubChem CID |
9502
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
361.7±52.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
93-94°C
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| 闪点 |
172.6±30.7 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±0.9 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.556
|
| LogP |
3.33
|
| tPSA |
41.57
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
2
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
15
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| 分子复杂度/Complexity |
228
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
XKJMBINCVNINCA-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C9H10Cl2N2O2/c1-13(15-2)9(14)12-6-3-4-7(10)8(11)5-6/h3-5H,1-2H3,(H,12,14)
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| 化学名 |
Urea, 3-(3,4-dichlorophenyl)-1-methoxy-1-methyl-
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| 别名 |
Garnitan Herbicide 326Linuron
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~401.46 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (10.04 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (10.04 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.0146 mL | 20.0731 mL | 40.1461 mL | |
| 5 mM | 0.8029 mL | 4.0146 mL | 8.0292 mL | |
| 10 mM | 0.4015 mL | 2.0073 mL | 4.0146 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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