| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
O6-methylguanine-DNA methyltransferase (MGMT) （IC50 = 6-9 nM
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| 体外研究 (In Vitro) |
Lomeguatrib（化合物 10）是一种 O6-甲基鸟嘌呤甲基转移酶 (MGMT) 抑制剂，在无细胞测定中 [1] 的 IC50 为 9 nM，在 MCF-7 细胞中的 IC50 为 ∼6 nM。 Lomeguatrib (10 μM) 显着改善 MCF-7 细胞中替莫唑胺的生长抑制作用（使用 Lomeguatrib 时的 D60=10 μM 与不使用 Lomeguatrib 时的 400 μM）[2]。
Lomeguatrib (PaTrin-2) 对MCF-7细胞MGMT活性和替莫唑胺敏感性的影响[2] MCF-7细胞表达高水平的MGMT（约1540 fmoles mg−1总蛋白）。暴露于Lomeguarib（PaTrin-2）2小时导致MCF-7细胞中MGMT的广泛失活：灭活50%MGMT所需的浓度约为6 nM（图1）。 Lomeguarib（PaTrin-2）显著提高了MCF-7细胞对替莫唑胺生长抑制作用的敏感性。单独使用400μM替莫唑胺后，生长量达到对照组的60%，但在与10μM PaTrin-2预孵育后，10μM替莫唑胺下生长了60%（图2），表明敏感性增加了40倍。PaTrin-2本身没有生长抑制作用。 |
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| 体内研究 (In Vivo) |
在 MCF-7 异种移植物中，memeguatrib (20 mg/kg ip) 在不到两小时内完全灭活 MGMT，但对肿瘤生长没有明显影响[2]。
Lomeguatrib (PaTrin-2) 对宿主组织和肿瘤中MGMT活性的影响 单次腹腔注射20 mg kg−1 PaTrin-2后，所有宿主组织中的MGMT活性都出现了广泛的耗竭（图3）。肾脏的贫化率低于检测限值，而肝脏、肺和骨髓的贫化率分别为预处理值的20%、35%和40%。最低点通常在2至8小时之间，给药后24小时，大量活性（超过预处理水平的50%）已经恢复。在MCF-7异种移植物中，MGMT在2至8小时之间完全失活，给药后24小时，其水平仅恢复到预处理水平的约20%。异种移植物恢复较慢可能反映了人类MGMT启动子的相对强度，或者人类蛋白质被PaTrin-2或其推定的代谢产物更广泛地灭活。 Lomeguatrib (PaTrin-2) 和替莫唑胺对MCF-7肿瘤生长的影响[2] 溶媒对照组和仅PaTrin-2组的MCF-7 tqt中位数分别为21天和17天。替莫唑胺（tqt∼17天）和PaTrin-2单独使用对异种移植物生长均无显著影响。然而，PaTrin-2和替莫唑胺的组合导致肿瘤的中位五倍增长时间约为43天，增加了约22天）。以体重减轻衡量的毒性基本上不受替莫唑胺治疗方案中添加PaTrin-2的影响。在治疗期结束时，替莫唑胺单独组和联合组的体重减轻了约5%。 |
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| 酶活实验 |
MGMT检测。[1]
MGMT测定已在前面描述。45简而言之，将200μg从HeLa S3细胞中提取的细胞蛋白在200μL 70 mM HEPES缓冲液（含1 mM二硫苏糖醇（DTT），5 mM EDTA，pH 7.8）中于37°C下与规定浓度的MGMT抑制剂（以DMSO溶液形式添加）一起孵育。30分钟后，加入过量[3H]-甲基化DNA（120 000 cpm），并继续孵育90分钟。通过加入400μL TCA（13%）停止反应，并在98°C下加热反应混合物30分钟水解DNA。用400-μL 5%TCA洗涤沉淀的蛋白质三次，溶解在0.1 N NaOH中，并使用Rotiszint eco-plus鸡尾酒和TRI-CARB 2100 TR液体闪烁分析仪通过液体闪烁计数进行分析。酶活性表示为每毫克总细胞蛋白中转移到TCA不溶性蛋白质材料的[3H]甲基fmol。相对于未处理的对照样品计算抑制百分比。每次测定重复三次，IC50值由抑制百分比与抑制剂浓度的图以图形方式确定。 |
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| 细胞实验 |
MCF-7细胞（一种人乳腺腺癌细胞系）在含有10%胎牛血清的RPMI培养基中，在37°C、5%CO2/95%空气的加湿气氛中生长为单层。[2]
为了确定MGMT失活，将细胞（5×10~6）在37°C、5%CO2的条件下，在浓度越来越高的Lomeguatrib (PaTrin-2) 的存在下孵育。2小时后，将细胞沉淀并重新悬浮在10毫升PBS中。重复三次，以去除任何残留的洛美加替布（PaTrin-2）。最后，如前所述，将细胞制成颗粒并检测MGMT活性。基于蛋白质依赖曲线线性部分的至少三个点，剩余活性以未处理细胞中活性的百分比计算。[2] 为了确定毒性，基于Carmichael等人（1987）的方法，采用MTT[3′（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基溴化四唑]生长抑制试验。将细胞（每孔1000个）铺在96孔板上，在24小时的附着期后，向细胞中加入Lomeguarib（PaTrin-2）。在37°C、5%CO2的条件下，用Lomeguarib（PaTrin-2）（10μM）孵育2小时后，加入越来越多剂量的替莫唑胺或载体，并将细胞再孵育4-5天。在曝光期结束时，向每个孔中加入150μg MTT，在37°C、5%CO2下孵育3小时。移除培养基，将活细胞中形成的甲酰胺晶体溶解在200μl DMSO中。使用Titertek Multiscan ELISA平板读数器测定540和690 nm处的吸光度，并计算未处理孔的A540-A690的生长抑制百分比。[2] |
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| 动物实验 |
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
我们合成了一系列潜在的人DNA修复蛋白O(6)-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）抑制剂，并通过核磁共振（NMR）对其进行了详细表征，并测试了它们在体外抑制MGMT活性的能力。这些新化合物为ω-[O(6)-R-鸟嘌呤-9-基]-(CH(2))(n)-β-D-葡萄糖苷，其中R为苄基或4-溴噻吩基，ω=n=2,4,12。我们将这些新化合物与已知的抑制剂O(6)-苄基鸟嘌呤（O(6)-BG）、8-氮杂-O(6)-苄基鸟嘌呤（8-aza-BG）和O(6)-(4-溴噻吩基)鸟嘌呤（4-BTG）进行了比较。体外实验表明，O(6)-BG、8-氮杂-O(6)-苄基鸟嘌呤（8-aza-BG）和4-溴噻吩基鸟嘌呤（4-BTG）的IC(50)值分别为0.62、0.038和0.009 μM。糖苷类化合物的潜在优势在于其水溶性提高以及对肿瘤细胞的选择性摄取。n = 2、4、6 的 4-BTG 糖苷表现出中等程度的抑制作用，IC50 值约为 0.5 μM，而源自 BG 和 8-aza-BG 的糖苷类化合物的抑制作用与母体化合物相比显著降低。n = 8、10、12 的 4-BTG 糖苷是有效的抑制剂，IC50 值约为 0.03 μM。为了理解这种现象，我们利用已发表的 MGMT 晶体结构（PDB 登录号：）进行了广泛的分子建模研究。将抑制剂分子对接至 BG 结合口袋，并进行了包含显式水分子的分子动力学模拟。计算了抑制剂特定区域与各个氨基酸残基相互作用的稳定化能。烷基间隔基位于 MGMT 螺旋 6 的一个裂隙中。随着间隔区长度的增加，其与多个氨基酸残基的相互作用也随之增强，这些氨基酸残基在DNA修复所需的核苷酸翻转机制中发挥着重要作用。[1]肿瘤对含甲基化药物（如达卡巴嗪和替莫唑胺）的化疗药物产生耐药性，这与DNA修复蛋白O(6)-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶（MGMT）的表达有关。人们对通过预先灭活MGMT来提高此类O(6)-烷基化化疗药物的疗效表现出浓厚的兴趣。我们研究了修饰的鸟嘌呤碱基O(6)-(4-溴苯基)鸟嘌呤（PaTrin-2，Patrin，Lomeguatrib）对MGMT活性以及替莫唑胺在人乳腺癌肉瘤细胞系MCF-7中抑制细胞或异种移植瘤生长的影响。 PaTrin-2 能有效灭活 MCF-7 细胞中的 MGMT（IC50 约为 6 nM），在异种移植瘤中，给药后 2 小时内（20 mg kg⁻¹，腹腔注射）MGMT 完全失活，24 小时后仅有轻微恢复。在多种小鼠宿主组织中，MGMT 的失活程度在完全失活至约 60% 之间，24 小时后均有明显恢复。PaTrin-2 (10 μM) 显著增强了替莫唑胺对 MCF-7 细胞的生长抑制作用（PaTrin-2 处理组 D₆₀ = 10 μM，未处理组为 400 μM）。在 MCF-7 异种移植瘤中，替莫唑胺（100 mg kg⁻¹，每日一次，连续 5 天）和 PaTrin-2（20 mg kg⁻¹，每日一次，连续 5 天）均未对肿瘤生长产生显著影响。相比之下，PaTrin-2 与替莫唑胺联合用药可显著延缓肿瘤生长：肿瘤五倍增长的中位时间延长了 22 天（P<0.005），且根据动物体重评估，未观察到明显的毒性增加。因此，PaTrin-2 与替莫唑胺联合用药可能对人类乳腺癌的治疗有益。[2]
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| 分子式 |
C10H8BRN5OS
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|---|---|---|
| 分子量 |
326.17
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| 精确质量 |
324.963
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| 元素分析 |
C, 36.82; H, 2.47; Br, 24.50; N, 21.47; O, 4.91; S, 9.83
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| CAS号 |
192441-08-0
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
3025944
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
1.9±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
683.8±65.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
367.3±34.3 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.1 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.797
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| LogP |
2.36
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| tPSA |
117.95
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
18
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| 分子复杂度/Complexity |
299
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
BrC1=CSC(COC2=C3N=CNC3=NC(N)=N2)=C1
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| InChi Key |
JUJPKFNFCWJBCX-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C10H8BrN5OS/c11-5-1-6(18-3-5)2-17-9-7-8(14-4-13-7)15-10(12)16-9/h1,3-4H,2H2,(H3,12,13,14,15,16)
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| 化学名 |
6-[(4-bromothiophen-2-yl)methoxy]-7H-purin-2-amine
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| 别名 |
PaTrin-2; Lomeguatrib; PaTrin 2; 192441-08-0; PaTrin-2; PaTrin 2; Lomeguatrib [INN]; Lomeguatrib [INN:BAN]; C10H8BrN5OS; 6-[(4-bromothiophen-2-yl)methoxy]-7H-purin-2-amine; PaTrin2; 2-Amino-6-[(4-bromo-2-thienyl)methoxy]-9H-purine
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.38 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.38 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.38 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.0659 mL | 15.3294 mL | 30.6589 mL | |
| 5 mM | 0.6132 mL | 3.0659 mL | 6.1318 mL | |
| 10 mM | 0.3066 mL | 1.5329 mL | 3.0659 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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DNMT2-IN-2
DNMT1 aptamer sodium
MH44
METTL1-WDR4-IN-1 TFA
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
