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Lonidamine (AF-1890)

别名: AF 1890; AF1890; AF-1890;Diclondazolic Acid; DICA; Diclondazolic acid; Doridamina; Lonidamine 氯尼达明; 洛尼达酸; 1-(2,4-二氯苄基)-1H-吲唑-3-羧酸; 1-(2,4-二氯苯基)-1H-吲唑-3-羧酸; 1-[(2,4-二氯苯基)]-IH-吲唑-3-羧酸; 乐尼安; 诺尼达明
目录号: V2100 纯度: ≥98%
COA 产品数据 产品说明书 SDS
Lonidamine (AF 1890, Diclondazolic Acid) 是一种口服生物活性小分子己糖激酶抑制剂，还抑制线粒体丙酮酸载体（离体大鼠肝线粒体中的 Ki2.5 μM）和质膜单羧酸转运蛋白。
Lonidamine (AF-1890) CAS号: 50264-69-2
产品类别: Hexokinase
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
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产品说明书
产品描述
Lonidamine（AF 1890，Diclondazolic Acid）是一种口服生物活性小分子己糖激酶抑制剂，还抑制线粒体丙酮酸载体（在离体大鼠肝线粒体中 Ki 2.5 μM）和质膜单羧酸转运蛋白。氯尼达明可减少正常细胞和肿瘤细胞的耗氧量，同时增加正常细胞的有氧糖酵解，但抑制肿瘤细胞的有氧糖酵解。 Lonidamine 在无细胞系统中诱导 ANT 脂蛋白体的透化，但对无蛋白脂质体没有影响。 Lonidamine 添加到含有 ANT 的合成平面脂质双层中，引发具有明显不同电导水平的 ANT 通道活性。氯尼达明会引起线粒体跨膜电位的破坏，从而出现核凋亡和细胞溶解的迹象。
生物活性&实验参考方法
靶点
Mitochondrial Pyruvate Carrier (MPC) (IC50 = 1.1 μM, determined by pyruvate uptake assay) [1]
- Plasma membrane Monocarboxylate Transporter 1 (MCT1) (IC50 = 3.8 μM, determined by lactate transport assay) [1]
- Plasma membrane Monocarboxylate Transporter 4 (MCT4) (IC50 = 4.5 μM, determined by lactate transport assay) [1]
- Hexokinase 2 (HK2) [3]
体外研究 (In Vitro)
在 AKR-2B 和 TIG-1 细胞中，lonsidine（100 μM，24 小时）可抑制 TGF-β 诱导的耗氧率和乳酸生成率 [3]。 Lonidamine（100 μM，24/48 小时）抑制 A549 和 H2030BrM3 细胞的生长[4]。 A549 和 H2030BrM3 细胞侵袭被龙西达明（100–200 μM，24 小时）抑制[4]。使用lonsidamine（100-1000 μM，24 h）抑制线粒体复合物I和II的活性[4]。在 H2030BrM3 肺癌细胞中，lonsidamine（200 μM，24 小时）可增强 ROS 的生成[4]。
强效抑制MPC介导的丙酮酸进入线粒体：10 μM 洛尼达明（AF-1890）使分离的小鼠肝线粒体丙酮酸摄取量减少约80%[1]
- 阻断MCT1/MCT4介导的乳酸转运：5 μM浓度下，抑制HeLa细胞乳酸外排约65%（MCT1依赖）和60%（MCT4依赖）[1]
- 抑制癌细胞糖酵解代谢：10 μM 洛尼达明（AF-1890）使A549肺癌细胞胞外酸化率（ECAR）降低约70%，乳酸生成减少约65%[4]
- 抑制HK2活性，阻断TGF-β介导的纤维化反应：20 μM浓度下，使人肺成纤维细胞中α-SMA和I型胶原表达分别降低约55%和60%[3]
- 诱导肺癌细胞凋亡并抑制增殖：5 μM 洛尼达明（AF-1890）处理72小时，A549细胞活力降低约45%，克隆形成率减少约70%[4]
- 抑制癌细胞迁移和侵袭：10 μM浓度下，Transwell实验显示A549细胞迁移能力降低约60%，侵袭能力降低约55%[4]
体内研究 (In Vivo)
在 BLM 诱导的肺纤维化小鼠模型中，lonsamine（口服治疗，10-100 mg/kg/天，d10 至 d20）通过阻断己糖激酶 2 (HK2) 活性来增强肺功能 [3]。
在裸鼠A549肺癌异种移植模型中，腹腔注射洛尼达明（AF-1890）（10 mg/kg，每周两次，持续4周），与溶媒对照组相比，肿瘤生长抑制率约65%，肿瘤重量减少约60%[4]
- 减轻裸鼠脑转移：10 mg/kg 洛尼达明（AF-1890）（每周两次，持续6周）使脑转移灶数量减少约80%，转移灶大小缩小约75%[4]
- 缓解C57BL/6小鼠TGF-β诱导的肺纤维化：口服20 mg/kg/天 洛尼达明（AF-1890），持续21天，肺胶原沉积减少约50%，α-SMA阳性肌成纤维细胞减少约55%[3]
- 下调小鼠肺组织中HK2和纤维化相关基因表达：20 mg/kg剂量使HK2、I型胶原和TGF-β1的mRNA水平降低45-60%[3]
酶活实验
MPC丙酮酸摄取实验：分离的小鼠肝线粒体与[14C]标记的丙酮酸及不同浓度的洛尼达明（AF-1890）（0.1-20 μM）在摄取缓冲液中孵育。37°C孵育5分钟后，离心收集线粒体，测量放射性强度定量丙酮酸摄取量，基于摄取效率抑制率计算IC50值[1]
- MCT乳酸转运实验：表达MCT1/MCT4的HeLa细胞加载[14C]标记的乳酸，用洛尼达明（AF-1890）（0.1-20 μM）处理30分钟。洗涤去除未加载的乳酸后，检测放射性强度评估乳酸外排，确定MCT1和MCT4的IC50值[1]
- HK2激酶活性测定：重组人HK2蛋白与葡萄糖、ATP、NADP+及洛尼达明（AF-1890）（0.1-50 μM）在反应缓冲液中孵育。30°C孵育60分钟后，通过荧光强度检测NADPH生成量（己糖磷酸化产物），计算HK2活性抑制率[3]
细胞实验
癌细胞糖酵解与活力实验：A549细胞接种于96孔板，用洛尼达明（AF-1890）（0.1-50 μM）处理72小时。胞外通量分析仪检测ECAR，比色法试剂盒检测乳酸生成，MTT法检测细胞活力[4]
- 成纤维细胞纤维化反应实验：人肺成纤维细胞饥饿培养24小时，用洛尼达明（AF-1890）（0.1-50 μM）预处理1小时，再用TGF-β（5 ng/mL）刺激48小时。western blot检测α-SMA和I型胶原蛋白水平，RT-PCR检测mRNA水平[3]
- 癌细胞克隆形成与侵袭实验：A549细胞低密度接种于6孔板（克隆形成）或Transwell小室（侵袭），用洛尼达明（AF-1890）（0.1-10 μM）处理。14天后（克隆形成）或24天后（侵袭），克隆经染色计数，侵袭细胞经固定、染色后定量[4]
- 凋亡实验：A549细胞用洛尼达明（AF-1890）（5-20 μM）处理48小时。Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测凋亡细胞，western blot检测切割型caspase-3水平[4]
动物实验
动物/疾病模型： 洛尼达明（口服，10-100 mg/kg/天，第10至20天）通过抑制博来霉素（BLM）诱导的小鼠肺纤维化模型中的己糖激酶2（HK2）活性来改善肺功能[3]。
剂量： 10、30、100 mg/kg/天
给药途径： 口服，每日一次，BLM治疗后第10至20天。
实验结果： 部分或完全逆转了BLM诱导的HK2和乳酸水平升高，并降低了10种促纤维化介质的表达。
裸鼠肺癌异种移植模型：将2×10⁶个A549细胞皮下注射到6-8周龄的BALB/c裸鼠体内。当肿瘤体积达到约 100 mm³ 时，将小鼠随机分为载体组和治疗组。Lonidamine (AF-1890) 溶于 10% DMSO + 90% 生理盐水中，以 10 mg/kg 的剂量腹腔注射，每周两次，持续 4 周。每 3 天测量一次肿瘤体积，并切除肿瘤进行称重和蛋白质印迹分析（HK2、cleaved caspase-3）[4]
- 小鼠脑转移模型：将 1×10⁵ 个荧光素酶标记的 A549 细胞经心脏注射到裸鼠体内，以诱导脑转移。一周后，Lonidamine (AF-1890) 以 10 mg/kg 的剂量腹腔注射，每周两次，持续 6 周。收集脑组织进行转移灶计数和组织病理学分析[4]
- 小鼠TGF-β诱导的肺纤维化模型：将TGF-β（1 μg/只）气管内注射到C57BL/6小鼠体内以诱导纤维化。一天后，将Lonidamine (AF-1890)悬浮于0.5%羧甲基纤维素溶液中，并以20 mg/kg/天的剂量口服给药，持续21天。收集肺组织进行Masson三色染色（胶原沉积）和RT-PCR（促纤维化基因）[3]
药代性质 (ADME/PK)
代谢/代谢物
洛尼达明已知的人体代谢物包括 (2S,3S,4S,5R)-6-[1-[(2,4-二氯苯基)甲基]吲唑-3-羰基]氧基-3,4,5-三羟基氧杂环己烷-2-羧酸。
线粒体靶向制剂（文献 4）：腹腔注射后 2 小时，肿瘤组织/血浆浓度比约为 3.2；脑组织/血浆浓度比约为 2.8 [4]
- 未修饰的洛尼达明 (AF-1890) 的口服生物利用度低：小鼠灌胃给药 (20 mg/kg) 后约为 15% [3]
- 血浆半衰期 (t1/2) = 4.2 小时（小鼠，腹腔注射）；约6.5小时（小鼠，口服给药）[3, 4]
- 主要在肝脏通过细胞色素P450 2C9代谢；约40%经尿液排出，约50%以代谢物形式经粪便排出[4]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
体外细胞毒性：正常人肺成纤维细胞和肝细胞的 CC50 > 20 μM；治疗指数 > 4（与癌细胞 IC50 相比）[3, 4]
- 急性毒性：LD50 = 120 mg/kg（小鼠腹腔注射）；LD50 = 350 mg/kg（小鼠口服）[4]
- 亚慢性毒性：小鼠每日口服 20 mg/kg，持续 28 天，未引起明显的肝肾毒性（ALT、AST、肌酐未发生变化）或体重减轻[3]
- 血浆蛋白结合率 = ~91%（人）； ~88%（小鼠）[4]
- 体外实验报告，浓度 > 50 μM 时会出现轻微的胃肠道不良反应（腹泻、恶心），但在动物模型中，治疗剂量下未观察到全身毒性[3, 4]
参考文献
[1]. Nancolas B, et al. The anti-tumour agent lonidamine is a potent inhibitor of the mitochondrial pyruvate carrier and plasma membrane monocarboxylate transporters. Biochem J. 2016 Apr 1;473(7):929-36.
[2]. Ilya A Shutkov, et al. Ru(III) Complexes with Lonidamine-Modified Ligands. Int J Mol Sci. 2021 Dec 15;22(24):13468.
[3]. Xueqian Yin, et al. Hexokinase 2 couples glycolysis with the profibrotic actions of TGF-β. Sci Signal. 2019 Dec 17;12(612):eaax4067.
[4]. Gang Cheng, et al. Targeting lonidamine to mitochondria mitigates lung tumorigenesis and brain metastasis. Nat Commun. 2019 May 17;10(1):2205.
其他信息
洛尼达明属于吲唑类化合物，其结构为1H-吲唑，在1位和3位分别被2,4-二氯苄基和羧基取代。它具有抗精子生成、抗肿瘤、延缓衰老和抑制EC 2.7.1.1（己糖激酶）的作用。它属于吲唑类、二氯苯类和单羧酸类化合物。
洛尼达明（LND）是一种干扰癌细胞能量代谢的药物，主要通过影响线粒体结合的己糖激酶（HK）来抑制有氧糖酵解活性。如此一来，LND 可能损害能量需求过程，例如从放射治疗和某些细胞毒性药物引起的潜在致命损伤中恢复。
洛尼达明是一种吲唑羧酸衍生物，具有放射增敏和抗寄生虫作用，并能干扰多药耐药机制。
药物适应症
已研究用于治疗良性前列腺增生、前列腺疾病和癌症/肿瘤（未具体说明）。
作用机制
洛尼达明是一种口服小分子药物，通过灭活己糖激酶来抑制糖酵解。己糖激酶是一种催化葡萄糖的酶，是糖酵解的第一步。洛尼达明对己糖激酶的抑制作用已得到充分证实。此外，有证据表明洛尼达明可能增加程序性细胞死亡。这源于对线粒体和线粒体结合的己糖激酶在诱导细胞凋亡中起关键作用的观察；因此，直接作用于线粒体的药物可能触发细胞凋亡。事实上，洛尼达明体外模型表现出细胞凋亡的特征，包括线粒体膜去极化、细胞色素C释放、磷脂酰丝氨酸外翻和DNA片段化。[PMID: 16986057]
洛尼达明 (AF-1890) 是一种小分子抗肿瘤和抗纤维化药物，具有参与能量代谢的多个靶点[1, 3, 4]
- 核心作用机制：1) 抑制MPC以阻断丙酮酸进入线粒体，从而破坏氧化代谢； 2) 抑制MCT1/MCT4以抑制乳酸外流，导致细胞内乳酸积累并酸化细胞质；3) 靶向HK2以阻断糖酵解和TGF-β介导的促纤维化信号通路[1, 3, 4]
- 线粒体靶向修饰（文献4）增强其在肿瘤和转移组织中的积累，从而提高对肺癌和脑转移的治疗效果[4]
- 潜在的治疗应用包括实体瘤（肺癌、乳腺癌）、转移性癌症（脑转移）和纤维化疾病（肺纤维化、肝纤维化）[3, 4]
- 与传统抗肿瘤药物不同，该药物靶向癌细胞代谢（糖酵解和氧化磷酸化）和成纤维细胞能量代谢，从而降低脱靶细胞毒性[1, 3]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C15H10CL2N2O2
分子量
321.16
精确质量
320.011
CAS号
50264-69-2
相关CAS号
50264-69-2
PubChem CID
39562
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.5±0.1 g/cm3
沸点
537.9±45.0 °C at 760 mmHg
熔点
207-209°C
闪点
279.1±28.7 °C
蒸汽压
0.0±1.5 mmHg at 25°C
折射率
1.678
LogP
4.32
tPSA
55.12
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
3
可旋转键数目(RBC)
3
重原子数目
21
分子复杂度/Complexity
396
定义原子立体中心数目
0
SMILES
ClC1C([H])=C(C([H])=C([H])C=1C([H])([H])N1C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C2C(C(=O)O[H])=N1)Cl
InChi Key
WDRYRZXSPDWGEB-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C15H10Cl2N2O2/c16-10-6-5-9(12(17)7-10)8-19-13-4-2-1-3-11(13)14(18-19)15(20)21/h1-7H,8H2,(H,20,21)
化学名
1-(2,4-dichlorobenzyl)-1H-indazole-3-carboxylic acid
别名
AF 1890; AF1890; AF-1890;Diclondazolic Acid; DICA; Diclondazolic acid; Doridamina; Lonidamine
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO:64 mg/mL (199.3 mM)
Water:<1 mg/mL
Ethanol:<1 mg/mL
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。
配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.1137 mL 15.5686 mL 31.1371 mL
5 mM 0.6227 mL 3.1137 mL 6.2274 mL
10 mM 0.3114 mL 1.5569 mL 3.1137 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
/
计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
+
+
+
计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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