LY-3295668

别名: LY3295668; AK-01; (2R,4R)-1-[(3-chloro-2-fluorophenyl)methyl]-4-({3-fluoro-6-[(5-methyl-1H-pyrazol-3-yl)amino]pyridin-2-yl}methyl)-2-methylpiperidine-4-carboxylic acid; (2R,4R)-1-[(3-chloro-2-fluorophenyl)methyl]-4-[[3-fluoro-6-[(5-methyl-1H-pyrazol-3-yl)amino]pyridin-2-yl]methyl]-2-methylpiperidine-4-carboxylic acid; (2R,4R)-1-((3-chloro-2-fluorophenyl)methyl)-4-((3-fluoro-6-((5-methyl-1H-pyrazol-3-yl)amino)pyridin-2-yl)methyl)-2-methylpiperidine-4-carboxylic acid; RefChem:110363; ...; LY-3295,668; LY-3295668; AK01; LY 3295668; AK 01; LY3295668
目录号: V4884 纯度: ≥98%
LY3295668 (LY-3295668; AK-01; Erbumine;AK01) 是一种新型、有效、口服生物利用度高、选择性极光-A 激酶抑制剂,具有潜在的抗癌活性。
LY-3295668 CAS号: 1919888-06-4
产品类别: New7
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
5mg
10mg
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  • LY3295668 erbumine
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纯度/质量控制文件

纯度: ≥98%

产品描述
LY3295668 (LY-3295668; AK-01; Erbumine; AK01) 是一种新型、有效、口服生物利用度高、选择性强的 Aurora-A 激酶抑制剂,具有潜在的抗癌活性。它抑制 AurA 和 AurB,Ki 值分别为 0.8 nM 和 1038 nM。 LY3295668 可以以对正常细胞影响最小的剂量杀死缺乏 Rb 的癌细胞。在一项全激酶组调查中,386 种激酶中只有 5 种被 LY3295668 有效抑制
生物活性&实验参考方法
靶点
Aurora A Kinase (AURKA). LY3295668 inhibits AURKA autophosphorylation in NCI-H446 cells with an IC50 of 0.46 nmol/L. It exhibits over 1,000-fold selectivity against AURKB (measured by inhibition of phospho-histone H3). [1]
体外研究 (In Vitro)
LY3295668 是影响 Aurora-A 的极强突变,AurA 的 Ki 值为 0.8 nM,AurB 的 Ki 值为 1038 nM。强大的AurA突变LY3295668对正常细胞的影响可以忽略不计。在一项小组调查中,LY3295668 (<10 nM) 成功抑制了 386 个变异中的 5 个 [1]。
抗增殖活性与RB1合成致死:在2DT细胞增殖实验中,LY3295668对RB1突变型癌症细胞(如小细胞肺癌、三阴性乳腺癌)表现出强效的细胞毒性,而对RB1野生型细胞主要呈现细胞抑制作用。在517种癌细胞系中,RB1突变是与LY3295668敏感性最显著相关的基因事件。[1]
诱导凋亡:LY3295668在RB1缺失的NCI-H446(小细胞肺癌)和MDA-MB-468(三阴性乳腺癌)细胞中,显著激活Caspase-3/7和TUNEL阳性信号,表明诱导了细胞凋亡。而在RB1阳性细胞(如DMS-53、MDA-MB-231)中,凋亡诱导作用较弱。[1]
对正常细胞的影响:与RB1突变的癌细胞相比,LY3295668对人骨髓单核细胞的细胞毒性低约10倍(在48小时处理下,骨髓细胞的IC50比值比NCI-H446细胞高10倍)。[1]
作用机制:在RB1缺失的细胞中,LY3295668处理导致有丝分裂检查点复合体(MCC)蛋白BUBR1和MAD2依赖的细胞周期蛋白B1稳定性增加,并引发显著的有丝分裂阻滞。使用siRNA敲低BUB1B或MAD2L1可逆转这些效应,减少凋亡,表明完整的纺锤体检查点功能是LY3295668细胞毒性的必要条件。[1]
耐药性研究:在通过长期药物筛选获得的对CDK4/6抑制剂帕博西尼耐药的MDA-MB-361乳腺癌细胞中,RB1表达降低,且对LY3295668的敏感性显著增强。在另一种帕博西尼耐药的MCF7细胞中,RB1水平未降低,也未对LY3295668增敏。[1]
体内研究 (In Vivo)
体内抗肿瘤疗效:在携带RB1缺失的小细胞肺癌异种移植瘤(NCI-H69、LXFS 615、LXFS 650)的裸鼠中,连续口服给予LY3295668(50 mg/kg,每日两次)可导致肿瘤显著消退。而在携带RB1野生型的小细胞肺癌PDX模型LXFS-1129中,该剂量下未见肿瘤消退。[1]
酶活实验
激酶选择性测定:通过对386种激酶进行激酶组范围调查,评估LY3295668的选择性。结果表明,只有5种激酶被LY3295668强效抑制(IC50 < 10 nmol/L)。在酶学实验中,AURKC对LY3295668的敏感性比AURKA低两个数量级以上。[1]
细胞实验
2DT细胞增殖筛选:为了克服细胞生长速率对药物反应的影响,实验根据每种细胞系的平均群体倍增时间(DT)来设定处理时长,确保所有细胞在处理期间经历约2次倍增。细胞在384孔板中培养,加入从10 μmol/L起始进行1:3倍比稀释的LY3295668,处理2DT后,使用CellTiter-Glo (CTG)试剂检测细胞活力,计算绝对IC50值。[1]
高内涵成像检测凋亡:细胞用LY3295668处理后,用甲醛固定,用Triton X-100透化,并用BSA封闭。随后,细胞与针对裂解型Caspase-3或TUNEL的抗体孵育,并用Alexa-647标记的二抗和Hoechst 33342或DAPI进行核染色。使用高内涵成像仪(如CellInsight NXT或Acumen eX3)采集图像,分析阳性细胞百分比。[1]
实时细胞凋亡监测(IncuCyte):将NCI-H446和Calu-6细胞接种于96孔板,用不同浓度的LY3295668处理24、48和72小时。同时加入Caspase-3/7检测试剂,使用IncuCyte Zoom活细胞成像系统每隔2小时采集绿色荧光图像,实时监测Caspase-3/7的活化情况。[1]
基因敲低实验:使用靶向RB1、BUB1B或MAD2L1的shRNA或siRNA转染细胞。敲低效率通过Western Blot验证。敲低后,细胞用LY3295668处理,通过细胞计数、PI染色或CTG检测评估细胞活力,或通过Western Blot检测相关蛋白(如cyclin B1、cleaved PARP)的变化。[1]
Western Blot分析:细胞在含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液中裂解。蛋白质浓度经定量后,通过SDS-PAGE分离并转印至膜上。使用针对RB1、AURKA、p-AURKA (Thr288)、裂解型Caspase-3、cyclin B1、MAD2、BUBR1等蛋白的特异性抗体进行免疫印迹,以检测蛋白表达水平及磷酸化状态。[1]
动物实验
体内疗效研究:将NCI-H69小细胞肺癌(SCLC)细胞皮下植入7-8周龄无胸腺裸鼠雌性小鼠的后侧腹部。当肿瘤体积达到80-200 mm³时,将小鼠随机分组(治疗组n=10,对照组n=8)。LY3295668以50 mg/kg的剂量每日两次(bid)口服给药,持续至少3周。每周测量肿瘤体积(体积 = 长 × 宽² × 0.536)。[1]
患者来源异种移植研究:将源自患者手术标本的小细胞肺癌PDX模型(LXFS 615、LXFS 650、LXFS 1129)皮下植入裸鼠体内。当肿瘤体积达到80-200 mm³时,将小鼠随机分组。 LY3295668 以 50 mg/kg 的剂量口服,每日两次(bid)。标准治疗组接受依托泊苷(30 mg/kg,皮下注射,每 7 天一次,连续 4 天)联合顺铂(3.2 mg/kg,皮下注射,每 7 天一次,连续 4 天)。每周测量肿瘤体积。[1]
参考文献

[1]. Aurora-A kinase inhibition is synthetic lethal with loss of the RB1 tumor suppressor gene. Cancer Discov. 2018 Oct 29. pii: CD-18-0469.

其他信息
Aurora A激酶抑制剂LY3295668是一种口服生物利用度高的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Aurora A抑制剂,具有潜在的抗有丝分裂和抗肿瘤活性。给药后,Aurora A激酶抑制剂LY3295668靶向结合并抑制Aurora A激酶的活性。这可能导致有丝分裂纺锤体组装紊乱、染色体分离紊乱、细胞分裂抑制以及在Aurora A激酶过表达的细胞中诱导细胞凋亡。Aurora A激酶在多种癌症中过表达,在纺锤体组装和有丝分裂的调控中发挥着至关重要的作用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C24H26CLF2N5O2
分子量
489.9454
精确质量
489.174
元素分析
C, 58.84; H, 5.35; Cl, 7.24; F, 7.76; N, 14.29; O, 6.53
CAS号
1919888-06-4
相关CAS号
1919888-07-5 (LY3295668 erbumine)
PubChem CID
121333423
外观&性状
Off-white to light yellow solid powder
LogP
2.4
tPSA
94.1
氢键供体(HBD)数目
3
氢键受体(HBA)数目
8
可旋转键数目(RBC)
7
重原子数目
34
分子复杂度/Complexity
708
定义原子立体中心数目
2
SMILES
ClC1=CC=CC(=C1F)CN1CC[C@](C(=O)O)(CC2=C(C=CC(NC3C=C(C)NN=3)=N2)F)C[C@H]1C
InChi Key
YQQZZYYQTCPEAS-OYLFLEFRSA-N
InChi Code
InChI=1S/C24H26ClF2N5O2/c1-14-10-21(31-30-14)29-20-7-6-18(26)19(28-20)12-24(23(33)34)8-9-32(15(2)11-24)13-16-4-3-5-17(25)22(16)27/h3-7,10,15H,8-9,11-13H2,1-2H3,(H,33,34)(H2,28,29,30,31)/t15-,24-/m1/s1
化学名
(2R,4R)-1-(3-chloro-2-fluorobenzyl)-4-((3-fluoro-6-((5-methyl-1H-pyrazol-3-yl)amino)pyridin-2-yl)methyl)-2-methylpiperidine-4-carboxylic acid
别名
LY3295668; AK-01; (2R,4R)-1-[(3-chloro-2-fluorophenyl)methyl]-4-({3-fluoro-6-[(5-methyl-1H-pyrazol-3-yl)amino]pyridin-2-yl}methyl)-2-methylpiperidine-4-carboxylic acid; (2R,4R)-1-[(3-chloro-2-fluorophenyl)methyl]-4-[[3-fluoro-6-[(5-methyl-1H-pyrazol-3-yl)amino]pyridin-2-yl]methyl]-2-methylpiperidine-4-carboxylic acid; (2R,4R)-1-((3-chloro-2-fluorophenyl)methyl)-4-((3-fluoro-6-((5-methyl-1H-pyrazol-3-yl)amino)pyridin-2-yl)methyl)-2-methylpiperidine-4-carboxylic acid; RefChem:110363; ...; LY-3295,668; LY-3295668; AK01; LY 3295668; AK 01;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~100 mg/mL (~204.10 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。


配方 4 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.10 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 5 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.02 mM) (饱和度未知) in 1% DMSO + 99% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加),澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.0410 mL 10.2051 mL 20.4102 mL
5 mM 0.4082 mL 2.0410 mL 4.0820 mL
10 mM 0.2041 mL 1.0205 mL 2.0410 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

临床试验信息
Aurora Kinase Inhibitor LY3295668 in Combination With Osimertinib for the Treatment of Advanced or Metastatic EGFR-Mutant Non-squamous Non-small Cell Lung Cancer
CTID: NCT05017025
Phase: Phase 1/Phase 2
Status: Active, not recruiting
Date: 2025-11-19
A Study of AK-01 (LY3295668) in Solid Tumors
CTID: NCT03092934
Phase: Phase 1/Phase 2
Status: Completed
Date: 2021-07-02
A Phase 1 Study of Aurora Kinase A Inhibitor LY3295668 erbumine as a Single Agent and in Combination in Patients with Relapsed/Refractory Neuroblastoma
EudraCT: 2019-001042-18
Phase: Phase 1
Status: GB - no longer in EU/EEA, Temporarily Halted, Prematurely Ended, Completed
Date: 2020-11-03
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