| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Aurora A Kinase (AURKA). LY3295668 inhibits AURKA autophosphorylation in NCI-H446 cells with an IC50 of 0.46 nmol/L. It exhibits over 1,000-fold selectivity against AURKB (measured by inhibition of phospho-histone H3). [1]
LY-3295668 targets Aurora A kinase, a serine/threonine protein kinase that plays a critical role in regulating cell division and mitosis. It is a highly specific inhibitor with a Ki of 0.8 nM for Aurora A and 1038 nM for Aurora B, demonstrating >1000-fold selectivity. By inhibiting Aurora A kinase, the compound disrupts mitotic progression and induces cell death in proliferating cells. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
LY3295668 是一种影响 Aurora-A 的极强突变体，其对 AurA 的 Ki 值为 0.8 nM，对 AurB 的 Ki 值为 1038 nM。这种强效的 AurA 突变体 LY3295668 对正常细胞的影响可忽略不计。在一项针对 386 种变异体的研究中，仅有 5 种变异体被 LY3295668 (<10 nM) 成功抑制 [1]。
抗增殖活性和 RB1 合成致死性：在 2DT 细胞增殖实验中，LY3295668 对 RB1 突变型癌细胞（例如小细胞肺癌、三阴性乳腺癌）表现出强效的细胞毒活性，而对 RB1 野生型细胞则主要表现出细胞抑制作用。在包含 517 种癌细胞系的分析中，RB1 突变是与 LY3295668 敏感性关联最显著的遗传事件。[1] 诱导细胞凋亡：LY3295668 显著激活了 RB1 缺失细胞（NCI-H446 小细胞肺癌细胞、MDA-MB-468 三阴性乳腺癌细胞）中的 Caspase-3/7 和 TUNEL 阳性信号，表明其诱导了细胞凋亡。这种作用在 RB1 阳性细胞（例如 DMS-53、MDA-MB-231）中较弱。 [1] 对正常细胞的影响：与RB1突变癌细胞相比，人骨髓单核细胞对LY3295668的细胞毒性作用的敏感性大约低10倍（48小时处理后，骨髓细胞的IC50值比NCI-H446细胞高10倍）。[1] 作用机制：在RB1缺失细胞中，LY3295668处理导致细胞周期蛋白B1的稳定性增加，该过程依赖于有丝分裂检查点复合物（MCC）蛋白BUBR1和MAD2，并引起显著的有丝分裂阻滞。siRNA敲低BUB1B或MAD2L1可逆转这些效应并减少细胞凋亡，表明完整的纺锤体组装检查点是LY3295668发挥细胞毒性的必要条件。 [1]耐药性研究：在MDA-MB-361乳腺癌细胞中，由于长期药物筛选，这些细胞对CDK4/6抑制剂帕博西尼产生了耐药性，RB1表达降低，对LY3295668的敏感性显著增强。在另一种对帕博西尼耐药的MCF7细胞系中，RB1水平保持不变，未观察到对LY3295668的敏感性增加。[1]体外实验表明，LY-3295668能有效杀死Rb缺陷型癌细胞，对正常细胞的影响极小。该化合物对Aurora A的选择性远高于Aurora B（Ki = 0.8 nM vs 1038 nM），这使其具有靶向抗肿瘤活性。通过抑制Aurora A，该化合物破坏有丝分裂纺锤体的组装和染色体分离，导致癌细胞发生有丝分裂灾难和凋亡。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
体内抗肿瘤疗效：在携带RB1基因敲除小细胞肺癌异种移植瘤（NCI-H69、LXFS 615、LXFS 650）的裸鼠中，持续口服LY3295668（50 mg/kg，每日两次）可显著抑制肿瘤生长。相比之下，在RB1野生型小细胞肺癌PDX模型LXFS-1129中，相同剂量下未观察到肿瘤消退。[1]
LY-3295668已在癌症临床前模型中进行了体内评估。作为一种口服生物利用度高的Aurora A激酶抑制剂，它已在多种异种移植瘤模型中显示出抑制肿瘤生长的疗效。该化合物对Aurora A的高选择性有望降低泛Aurora激酶抑制剂相关的脱靶毒性。 |
| 酶活实验 |
激酶选择性分析：通过对全激酶组范围内的386种激酶进行检测，评估了LY3295668的选择性。结果表明，LY3295668仅能有效抑制5种激酶（IC50 < 10 nmol/L）。在酶活性测定中，AURKC对LY3295668的敏感性比AURKA低两个数量级以上。[1]
体外Aurora激酶抑制酶活性测定包括将重组Aurora A或Aurora B激酶与底物和ATP在不同浓度的LY-3295668存在下孵育。使用放射性或发光法测定激酶活性。根据剂量反应曲线计算Ki值，以确定化合物的效力和选择性。 |
| 细胞实验 |
2DT 细胞增殖筛选：为减少生长速率偏差，根据每种细胞系的平均群体倍增时间 (DT) 设定处理持续时间，确保细胞在处理期间经历约 2 次倍增。将 384 孔板中的细胞用 LY3295668（10 个浓度点，1:3 系列稀释，起始浓度为 10 μM）进行 2DT 处理，并使用 CellTiter-Glo (CTG) 试剂评估细胞活力，计算绝对 IC50 值。[1]
高内涵成像检测细胞凋亡：用 LY3295668 处理后，用甲醛固定细胞，用 Triton X-100 透化细胞，并用 BSA 封闭细胞。随后将细胞与针对裂解型 caspase-3 或 TUNEL 的一抗孵育，再与 Alexa-647 标记的二抗孵育，最后用 Hoechst 33342 或 DAPI 进行核染色。使用高内涵成像仪（例如 CellInsight NXT 或 Acumen eX3）采集图像，以量化阳性细胞的百分比。[1] 实时细胞凋亡监测（IncuCyte）：将 NCI-H446 和 Calu-6 细胞接种于 96 孔板中，并用不同浓度的 LY3295668 处理 24、48 和 72 小时。加入 caspase-3/7 试剂，并使用 IncuCyte Zoom 活细胞成像系统每 2 小时采集一次绿色荧光图像，以实时监测 caspase-3/7 的激活情况。 [1] 基因敲低实验：将靶向RB1、BUB1B或MAD2L1的shRNA或siRNA转染至细胞中。通过Western blot验证敲低效率。敲低后，用LY3295668处理细胞，并通过细胞计数、PI染色或CTG检测评估细胞活力，同时通过Western blot分析蛋白表达变化（例如，细胞周期蛋白B1、裂解型PARP）。[1] Western blot分析：在含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液中裂解细胞。测定蛋白浓度，并通过SDS-PAGE分离蛋白并转移至膜上。采用针对 RB1、AURKA、p-AURKA (Thr288)、cleaved caspase-3、cyclin B1、MAD2、BUBR1 等的特异性抗体进行免疫印迹分析，以检测蛋白表达水平和磷酸化状态。[1] 使用包括 Rb 缺陷细胞在内的癌细胞系进行细胞实验。将细胞用不同浓度的 LY-3295668 处理 48-72 小时。使用 MTT 或 CellTiter-Glo 法评估细胞活力。通过流式细胞术进行细胞周期分析，并通过蛋白质印迹或免疫荧光法评估有丝分裂标志物，例如磷酸化组蛋白 H3。 |
| 动物实验 |
体内疗效研究：将NCI-H69小细胞肺癌（SCLC）细胞皮下植入7-8周龄无胸腺裸鼠雌性小鼠的后侧腹部。当肿瘤体积达到80-200 mm³时，将小鼠随机分组（治疗组n=10，对照组n=8）。LY3295668以50 mg/kg的剂量每日两次（bid）口服给药，持续至少3周。每周测量肿瘤体积（体积 = 长 × 宽² × 0.536）。[1]
患者来源异种移植研究：将源自患者手术标本的小细胞肺癌PDX模型（LXFS 615、LXFS 650、LXFS 1129）皮下植入裸鼠体内。当肿瘤体积达到80-200 mm³时，将小鼠随机分组。 LY3295668 以 50 mg/kg 的剂量每日两次口服给药。标准治疗组接受依托泊苷（30 mg/kg，皮下注射，每 7 天一次，连续 4 天）联合顺铂（3.2 mg/kg，皮下注射，每 7 天一次，连续 4 天）。每周测量肿瘤体积。[1] 在荷瘤小鼠模型中进行体内研究。LY-3295668 以不同剂量口服给药。定期测量肿瘤体积，并收集肿瘤进行组织病理学分析。通过蛋白质印迹法和免疫组织化学法进行生物标志物分析，包括评估 Aurora A 磷酸化及其下游信号通路。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
药物暴露：小鼠每日两次口服 50 mg/kg LY3295668 后，在整个给药间隔内，平均游离血药浓度均超过 AURKA 抑制的 IC90 值；即使在峰值浓度 (Cmax) 下，也未达到 AURKB 抑制的 IC90 值。在一项为期 1 个月的鼠毒理学研究中，持续给药可达到与小鼠异种移植疗效研究中相当的稳态血浆浓度。[1] LY-3295668（分子量 489.95，分子式 C₂₄H₂₆ClF₂N₅O₂）是一种小分子化合物。它具有口服活性，可溶于 DMSO。该化合物通常储存在 -20°C。其理化性质有利于口服生物利用度和良好的类药特性。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
骨髓抑制：在一项为期1个月的大鼠毒理学研究中，持续给药LY3295668（达到与小鼠异种移植模型中有效浓度相当的稳态血浆浓度）未引起股骨和胸骨骨髓的组织学改变。循环红细胞、白细胞总数、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞的绝对数量仅有轻微变化，对网织红细胞、血小板、中性粒细胞或单核细胞无影响。[1]
临床前耐受性：在小鼠中，每日两次、每次50 mg/kg的LY3295668给药方案耐受性良好。[1] 临床前毒性研究已在动物模型中评估了LY-3295668。作为一种Aurora A激酶抑制剂，其毒性主要体现在抑制增殖组织中的细胞分裂。该化合物对Aurora A的选择性远高于Aurora B，有望降低非选择性Aurora激酶抑制剂相关的骨髓和胃肠道毒性。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
LY3295668 是一种 Aurora A 激酶抑制剂，具有口服生物利用度高的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶抑制剂特性，并具有潜在的抗有丝分裂和抗肿瘤活性。给药后，LY3295668 靶向并抑制 Aurora A 激酶的活性。这可能导致有丝分裂纺锤体组装紊乱、染色体分离紊乱、细胞分裂抑制，并诱导 Aurora A 激酶过表达细胞凋亡。Aurora A 激酶在多种癌症中过表达，并在纺锤体组装和有丝分裂的调控中发挥关键作用。LY-3295668 (AK-01) 是一种高效、口服活性强且高度特异性的 Aurora A 激酶抑制剂，专为癌症治疗而开发。其作用机制包括选择性抑制 Aurora A 激酶，从而干扰有丝分裂进程并诱导癌细胞死亡。该化合物对 Aurora A 的选择性远高于 Aurora B（>1000 倍），能有效杀死 Rb 缺陷型癌细胞，且对正常细胞的影响极小。LY-3295668 尚未获得临床应用监管部门的批准。
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| 分子式 |
C24H26CLF2N5O2
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|---|---|
| 分子量 |
489.9454
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| 精确质量 |
489.174
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| 元素分析 |
C, 58.84; H, 5.35; Cl, 7.24; F, 7.76; N, 14.29; O, 6.53
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| CAS号 |
1919888-06-4
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| 相关CAS号 |
1919888-07-5 (LY3295668 erbumine)
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| PubChem CID |
121333423
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| LogP |
2.4
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| tPSA |
94.1
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
7
|
| 重原子数目 |
34
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| 分子复杂度/Complexity |
708
|
| 定义原子立体中心数目 |
2
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| SMILES |
ClC1=CC=CC(=C1F)CN1CC[C@](C(=O)O)(CC2=C(C=CC(NC3C=C(C)NN=3)=N2)F)C[C@H]1C
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| InChi Key |
YQQZZYYQTCPEAS-OYLFLEFRSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H26ClF2N5O2/c1-14-10-21(31-30-14)29-20-7-6-18(26)19(28-20)12-24(23(33)34)8-9-32(15(2)11-24)13-16-4-3-5-17(25)22(16)27/h3-7,10,15H,8-9,11-13H2,1-2H3,(H,33,34)(H2,28,29,30,31)/t15-,24-/m1/s1
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| 化学名 |
(2R,4R)-1-(3-chloro-2-fluorobenzyl)-4-((3-fluoro-6-((5-methyl-1H-pyrazol-3-yl)amino)pyridin-2-yl)methyl)-2-methylpiperidine-4-carboxylic acid
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| 别名 |
LY3295668; AK-01; (2R,4R)-1-[(3-chloro-2-fluorophenyl)methyl]-4-({3-fluoro-6-[(5-methyl-1H-pyrazol-3-yl)amino]pyridin-2-yl}methyl)-2-methylpiperidine-4-carboxylic acid; (2R,4R)-1-[(3-chloro-2-fluorophenyl)methyl]-4-[[3-fluoro-6-[(5-methyl-1H-pyrazol-3-yl)amino]pyridin-2-yl]methyl]-2-methylpiperidine-4-carboxylic acid; (2R,4R)-1-((3-chloro-2-fluorophenyl)methyl)-4-((3-fluoro-6-((5-methyl-1H-pyrazol-3-yl)amino)pyridin-2-yl)methyl)-2-methylpiperidine-4-carboxylic acid; RefChem:110363; ...; LY-3295,668; LY-3295668; AK01; LY 3295668; AK 01;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~204.10 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.10 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 5 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.02 mM) (饱和度未知) in 1% DMSO + 99% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加),澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0410 mL | 10.2051 mL | 20.4102 mL | |
| 5 mM | 0.4082 mL | 2.0410 mL | 4.0820 mL | |
| 10 mM | 0.2041 mL | 1.0205 mL | 2.0410 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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