| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
mGlu3 (negative allosteric modulator, noncompetitive antagonist, IC50 = 190 ± 26 nM, efficacy = 100 ± 0.68%); no activity (IC50 >12,500 nM for antagonist mode, >25,000 nM for agonist mode, >12,500 nM for potentiator mode) at mGlu1, mGlu2, mGlu4, mGlu5, mGlu7, mGlu8, and GABAB receptors. [1]
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
实时定量PCR[2]
在用Aβ(25-35)刺激的混合大鼠皮质培养物中，LY2389575（0.1至1 μM）消除了双重mGlu2/3激动剂LY379268（1 μM）的神经保护活性。 在最高浓度（1 μM）下，LY2389575单独作用增强了Aβ(25-35)诱导的神经毒性，使神经元死亡程度超过了Aβ单独作用造成的死亡程度。 在没有Aβ的情况下，LY2389575（1 μM）不影响神经元活力。 在含有野生型星形胶质细胞的小鼠混合皮质培养物中，LY2389575增强了Aβ的毒性并消除了LY379268的神经保护活性；当星形胶质细胞缺乏 mGlu3 受体时，这些效应消失。 在 LY2389575 存在的情况下，双重激动剂 LY379268 表现出神经毒性，揭示了由 mGlu2 受体激活介导的毒性活性。 在纯神经元培养物中，LY2389575 阻止了从经 LY379268 处理的星形胶质细胞中收集的胶质细胞条件培养基对 Aβ 毒性的保护作用。[1] |
| 酶活实验 |
LY2389575采用荧光成像板读数仪 (FLIPR) 检测法，在稳定表达人 mGlu1、mGlu2、mGlu3、mGlu4、mGlu5、mGlu7、mGlu8 或 GABAB 受体以及 Ga15 亚基（mGlu1 和 mGlu5 不需要 Ga15）的 AV-12 细胞系中进行表征。细胞培养于含高糖和盐酸吡哆醇的 DMEM 培养基中，并补充 5% 热灭活透析胎牛血清、1 mM 丙酮酸钠、10 mM HEPES、1 mM L-谷氨酰胺和筛选剂。在检测前 18-24 小时收集细胞，并以每孔 115,000 个细胞的密度接种于 96 孔黑色聚赖氨酸包被板中（mGlu3 检测）。将细胞与 8 μM Fluo-3AM (50 μl/孔) 在 25°C 下孵育 90-120 分钟。用检测缓冲液（Hanks 平衡盐溶液 + 20 mM HEPES）替换染料溶液。采用单次添加 FLIPR 检测法生成谷氨酸的 10 点浓度-反应曲线，以计算 EC90 和 EC10 值。将 LY2389575 用 DMSO 进行 3 倍稀释系列稀释，并在双次添加 FLIPR 检测法中进行测试，该检测法具有 10 点浓度-反应曲线（激动剂检测起始浓度为 25 μM，增强剂/拮抗剂检测起始浓度为 12.5 μM；最终 DMSO 浓度为 0.625%）。首先加入化合物，每秒采集一次数据，持续30秒，然后每3秒采集一次数据，持续90秒，以检测激动剂活性。随后立即加入EC90或EC10谷氨酸。每秒采集一次数据，共采集29张图像，然后每3秒采集一次数据，共采集15张图像。最大反应定义为100 μM谷氨酸。化合物效应以最大-最小峰高差值（相对荧光单位）表示，并校正基线荧光。激动剂效应量化为最大谷氨酸反应的百分比；拮抗剂效应量化为EC90谷氨酸反应的抑制百分比；增强效应量化为EC10谷氨酸反应相对于ECmax的增加百分比。数据采用四参数逻辑曲线进行拟合。为了确定竞争性或变构性质，在有无递增浓度的LY2389575存在的情况下，以拮抗剂模式生成12点谷氨酸剂量-反应曲线。 LY2389575 表现为 mGlu3 受体的非竞争性拮抗剂。[1]
|
| 细胞实验 |
实时定量PCR[2]
细胞类型： 小胶质细胞 测试浓度： 5 μM 孵育时间： 1 小时 实验结果： Mrc1 水平升高。LY2389575 水解物 (5 μM；1 小时) 可诱导小星形胶质细胞中 Mrc1 水平升高[2]。 大鼠胚胎混合皮层培养：将皮层分离的细胞在含 10% 马血清、10% 胎牛血清、2 mM 谷氨酰胺和 6 mg/ml 葡萄糖的 DMEM/F12 (1:1) 培养基中培养 7-10 天，然后用 10 μM 阿糖胞苷抑制胶质细胞分裂 3 天，再转移到无血清培养基中。成熟的细胞培养物中含有35-40%的神经元和60-65%的星形胶质细胞。在Aβ毒性实验中，将细胞培养物与25 μM Aβ(25-35)或100 nM Aβ(1-42)寡聚体（>50 kDa）孵育24小时，同时加入1 μM MK-801和30 μM DNQX以阻断离子型谷氨酸受体。此外，还添加了浓度为0.1-1 μM的LY2389575。采用相差显微镜和台盼蓝染色法评估神经元损伤（每个孔随机选取三个视野计数死亡神经元）。 大鼠胚胎第15天纯神经元培养：在无Ca2+/Mg2+缓冲液中解剖皮层，机械分离，以2×10^6个细胞/皿的密度接种于聚赖氨酸包被的35 mm培养皿中，培养基为DMEM/Ham's F12 (1:1)，并添加BSA、胰岛素、转铁蛋白、腐胺、孕酮、硒、谷氨酰胺、葡萄糖、青霉素/链霉素和10 μM阿糖胞苷，培养3天以抑制非神经元细胞增殖。可获得纯度>99%的神经元。采用 MTT 法评估神经元损伤（0.9 mg/ml MTT，37°C 孵育 2 小时，然后用 20% SDS 处理 1 小时，在 560 nm 处测定甲臜的吸光度）。 取 1-3 日龄大鼠或野生型/mGlu3(-/-) 小鼠的星形胶质细胞纯培养物：用 0.25% 胰蛋白酶消化皮层胶质细胞，接种于含 10% 胎牛血清、青霉素/链霉素和 2 mM 谷氨酰胺的 DMEM 培养基中，摇晃过夜以去除小胶质细胞/少突胶质细胞，重新接种后于 6-8 天后使用。对于胶质细胞条件培养基 (GCM) 实验，将星形胶质细胞用 1 μM LY379268 ± LY341495 或 LY2389575 处理 24 小时，收集培养基并在 Aβ 刺激前转移至纯神经元培养物中。采用 ELISA 法测定 TGF-β1 水平，采用实时 RT-PCR 法测定 TGF-β1 mRNA 水平（引物：正向引物 5'-ataggctgagtggctgtct-3'，反向引物 5'-tgggactgatcaccattgatt-3'，以 β-actin 为内参进行标准化）。向 GCM 中添加中和性抗 TGF-β1 抗体 (2 μg/ml) 或 1 型 TGF-β 受体抑制剂 SB431542。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在混合皮质培养中，1 μM 的 LY2389575 在无 Aβ 存在的情况下不影响神经元存活率（死亡神经元数量：对照组 41±3，处理组 42±1，每组 n=3）。未报告其他毒性数据。[1]
|
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
LY2389575 是一种选择性 mGlu3 受体负变构调节剂（CAS#: 885104-09-6）。它被用于证明，激活神经胶质细胞 mGlu3 受体可通过旁分泌 TGF-β1 机制保护机体免受 Aβ 神经毒性，而选择性激活 mGlu2 受体（例如，通过 PAM LY566332）则会增强 Aβ 毒性。该化合物揭示，当 mGlu3 受体被阻断时，像 LY379268 这样的双重 mGlu2/3 激动剂会产生神经毒性，从而揭示 mGlu2 介导的毒性。这些发现表明，选择性 mGlu2 受体 PAM 可能对阿尔茨海默病有害，而双重 mGlu2/3 激动剂可能对治疗阿尔茨海默病相关精神病 (PAD) 有益。[1]
|
| 分子式 |
C15H16BRCL3N4
|
|---|---|
| 分子量 |
438.57
|
| 精确质量 |
435.962
|
| CAS号 |
885104-09-6
|
| 相关CAS号 |
885102-71-6;885104-09-6 (HCl);
|
| PubChem CID |
11503054
|
| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
|
| tPSA |
41
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
23
|
| 分子复杂度/Complexity |
354
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
|
| SMILES |
C1CN(C[C@H]1NCC2=C(C=C(C=C2)Cl)Cl)C3=NC=C(C=N3)Br.Cl
|
| InChi Key |
IRIBLLOEUZMCQY-ZOWNYOTGSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C15H15BrCl2N4.ClH/c16-11-7-20-15(21-8-11)22-4-3-13(9-22)19-6-10-1-2-12(17)5-14(10)18;/h1-2,5,7-8,13,19H,3-4,6,9H2;1H/t13-;/m0./s1
|
| 化学名 |
(3S)-1-(5-bromopyrimidin-2-yl)-N-[(2,4-dichlorophenyl)methyl]pyrrolidin-3-amine;hydrochloride
|
| 别名 |
LY 2389575 LY2389575 LY-2389575
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~228.01 mM)
MEthanol : ~8.33 mg/mL (~18.99 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.70 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.70 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.70 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2801 mL | 11.4007 mL | 22.8014 mL | |
| 5 mM | 0.4560 mL | 2.2801 mL | 4.5603 mL | |
| 10 mM | 0.2280 mL | 1.1401 mL | 2.2801 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
|
|
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
