| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The probe targets acidic cellular compartments (specifically lysosomes). Its mechanism of action is based on a physicochemical property rather than a biological receptor. The weak base moiety becomes protonated within the acidic lysosomal environment (pH ~4.5-5.0), which prevents it from diffusing back across the membrane, leading to selective accumulation of the fluorescent dye. LysoTracker probes are not fixable, so they must be used on live cells.
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| 体外研究 (In Vitro) |
建议(以下是我们建议的实验方案,仅供参考,请根据您的具体情况进行调整)。定量 GAPDH LysoTracker Yellow HCK 123 检测 [1]:1. 使用 8 孔细胞培养板培养 EMT6 细胞。采用标准方法进行细胞培养。2. 向每个孔中加入 TONS504,使其最终浓度达到 30 µg/mL。将细胞在 37 °C 下孵育 4 小时。3. 向每个孔中加入 LysoTracker Yellow HCK 123,直至最终浓度达到 50 μM。4. 将细胞在 37°C、5% CO2 条件下孵育 30 分钟。使用共聚焦激光扫描显微镜观察样品。
作为一种成像荧光探针,它并不像药物那样具有药理活性。它的“活性”在于其在激发光(Ex=465 nm)照射下发出荧光并聚集在溶酶体中的能力。荧光强度与细胞器的酸度成正比,使其成为研究溶酶体pH动态、自噬通量以及其他涉及酸性囊泡的细胞过程的有效工具。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
LysoTracker是一种体外诊断成像探针,并非用于药物的体内“活性”评估。因此,它不像治疗药物那样具有体内疗效数据。它用于临床前体外试验,以研究溶酶体生物学,并可用作动物组织来源细胞中自噬或内吞作用的标志物。
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| 酶活实验 |
这是一种用于细胞染色的荧光染料;它不是酶抑制剂,也不用于无细胞酶结合实验。因此,它不适用于无细胞应用。其选择性基于细胞的完整生理状态,而非纯化的蛋白质。
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| 细胞实验 |
LysoTracker Yellow HCK 123 的标准操作流程如下:1. 配制 1 mM 的 DMSO 储备液。2. 将储备液用温热的无血清细胞培养基稀释至工作浓度(通常为 50-75 nM)。3. 对于活细胞,吸出培养基,加入预热的含 LysoTracker 的培养基。4. 将细胞置于 37℃、CO2 培养箱中孵育 30-120 分钟。5. 用预热的 PBS 或培养基轻轻洗涤细胞 2-3 次。6. 立即使用荧光显微镜或共聚焦显微镜,并配备黄色荧光滤光片组(激发/发射波长约为 465/535 nm)对活细胞进行成像。
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| 动物实验 |
LysoTracker Yellow HCK 123 是一种专用于体外活细胞成像的探针。典型的溶酶体追踪细胞实验步骤如下:1. 将细胞(例如 HeLa、EMT6)接种于 8 孔培养皿或 96 孔成像板中,使其贴壁。2. 根据实验设计进行细胞处理(例如药物刺激、饥饿处理)。3. 在 37℃ 避光条件下,用 LysoTracker (50-75 nM) 对活细胞进行染色 30-120 分钟。4. (可选)用 Hoechst 33342 对细胞核进行复染。5. 洗涤并更换新鲜培养基,然后立即进行成像。该探针不能用于固定/透化的细胞。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
由于背景信号和代谢率较高,LysoTracker Yellow HCK 123 不适用于体内动物实验。虽然一些类似的探针可用于活体成像,但该产品通常用于体外实验。体内实验需要进行尾静脉注射,然后进行全身荧光成像,但由于清除迅速和非特异性蓄积,其应用受到限制。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
不适用。这是一种显像染料,而非全身用药。由于它直接用于培养细胞进行即时显像,因此药代动力学特性无关紧要。其特性由光谱特征(激发波长λex=465 nm,发射波长λem=535 nm)、细胞渗透性和溶酶体滞留决定。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
HCK-123染料是一种苯并恶二唑化合物,可用作荧光染料。
不适用(标准工作浓度下无毒荧光染料)。该化合物是一种弱碱性胺,在推荐的纳摩尔浓度下通常被认为对细胞无毒。其作用机制依赖于进入亚细胞区室,而非诱导细胞毒性,因此常用于短期活细胞成像实验。 |
| 分子式 |
C16H24N6O4
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|---|---|
| 分子量 |
364.4
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| 精确质量 |
364.185
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| CAS号 |
1064123-31-4
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| PubChem CID |
25195435
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| 外观&性状 |
Yellow to orange solid powder
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| LogP |
1.3
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| tPSA |
129
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
10
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| 重原子数目 |
26
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| 分子复杂度/Complexity |
459
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
N(C1=CC=C(N(=O)=O)C2=NON=C12)CCCCCC(=O)NCCN(C)C
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| InChi Key |
WIOHDRVBBRICQL-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C16H24N6O4/c1-21(2)11-10-18-14(23)6-4-3-5-9-17-12-7-8-13(22(24)25)16-15(12)19-26-20-16/h7-8,17H,3-6,9-11H2,1-2H3,(H,18,23)
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| 化学名 |
N-[2-(dimethylamino)ethyl]-6-[(4-nitro-2,1,3-benzoxadiazol-7-yl)amino]hexanamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~62.5 mg/mL (~171.51 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.71 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7442 mL | 13.7212 mL | 27.4424 mL | |
| 5 mM | 0.5488 mL | 2.7442 mL | 5.4885 mL | |
| 10 mM | 0.2744 mL | 1.3721 mL | 2.7442 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。