Maribavir   中文名称: 马立巴韦

HCMV
Human cytomegalovirus (HCMV) UL97 protein kinase (IC50 for wild-type UL97 autophosphorylation: ~35 nM; Ki for ATP-competitive inhibition: 10 nM).[1]

Maribavir 的平均 IC50 为 35 nM，是野生型和已研究的所有主要更昔洛韦 (GCV) 抗性 UL97 突变体的自磷酸化的强抑制剂。 M460I 突变的 IC50 为 4.8 nM，会导致对马利巴韦过敏。 L397R 是一种对马里巴韦耐药的 UL97 突变体，其更昔洛韦激酶和蛋白激酶的功能降低（约为野生型水平的 10%）。 Maribavir 是一种 ATP 竞争性抑制剂，酶动力学研究表明 Ki 为 10 nM [1]。使用多循环 DNA 杂交测定，maribavir (1263W94) 以剂量依赖性方式抑制病毒复制，IC50 为 0.12±0.01 μM。 Maribavir 显着抑制 pUL97 蛋白激酶，在 3 nM 时抑制 50% [2]。

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Maribavir 能强效抑制野生型HCMV UL97蛋白激酶的自磷酸化，平均IC50为35 nM [1]。
Maribavir 对主要更昔洛韦耐药UL97突变体（M460I, H520Q, A594V, L595F）的自磷酸化同样具有强效抑制作用，平均IC50相似（~35 nM）。其中M460I突变体对maribavir高度敏感，IC50为4.8 nM [1]。
Maribavir 作为ATP的竞争性抑制剂作用于UL97，计算得出的Ki为10 nM [1]。
Maribavir耐药UL97突变体（L397R）显示出严重受损的更昔洛韦激酶活性（约野生型水平的10%）和自磷酸化活性（约野生型水平的8%），其自磷酸化即使在高达100 µM的maribavir浓度下也不被抑制 [1]。

使用浓度不断增加的 ATP（2 μM 至 20 μM），对纯化的野生型和突变型 UL97 蛋白进行酶动力学分析。为了计算每个 UL97 物种的 ATP 的 Km，将掺入的放射性标记磷酸盐的量相对于 ATP 的浓度绘制在 Lineweaver Burke 图中。蛋白激酶测定用于测量 Maribavir 对野生型或突变型 UL97 放射性标记磷酸盐掺入率的影响。如前所述，测定可以在固定浓度 0.55 μM Maribavir 下进行，也可以在增加浓度的 Maribavir 下进行。 0.01 μM 至 5.0 μM Maribavir，以确定 Maribavir 对每种 UL97 的 IC50。随着 Maribavir 浓度的增加，创建 1/v 与 1/ATP 的图，以确定 Maribavir 介导的抑制类型。如果线族在 y 轴上收敛于 1/Vmax，则存在明显的竞争性抑制证据。 Ki 是利用添加 Maribavir 所带来的斜率变化来计算的[1]。

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通过标准蛋白激酶实验评估纯化的野生型和突变型UL97蛋白的自磷酸化活性。将纯化的UL97蛋白在含有Tris-HCl（pH 9.0）、MgCl2、DTT、NaCl、ATP（并加入痕量[γ-32P]ATP）的反应缓冲液中于37°C孵育。通过加入SDS上样缓冲液并煮沸来终止反应。通过SDS-PAGE分析并通过磷屏成像或光密度法定量自磷酸化掺入的放射性磷酸盐量 [1]。
为测定maribavir的IC50，使用递增浓度的maribavir（0.01 µM 至 5.0 µM）进行蛋白激酶实验。将抑制百分比与药物浓度作图，并拟合指数衰减曲线以计算IC50 [1]。
为确定抑制机制和Ki值，在不同固定浓度的maribavir存在下，使用递增浓度的ATP（2 µM 至 20 µM）进行蛋白激酶实验。使用Lineweaver-Burk图分析数据。直线在y轴1/Vmax处交汇表明是竞争性抑制，并使用竞争性抑制的标准方程计算Ki值 [1]。

MRC-5 细胞以大约 5×104 个细胞/孔的密度接种到 24 孔板中后，在 MEM 8-1-1 中培养三天直至汇合（~1.1×105 个细胞/孔）。在MEM 2-1-1中，用AD169以1至3的感染复数(MOI)感染细胞，并让感染在37℃吸附90分钟。添加一毫升 MEM 2-1-1 代替未吸附的病毒。 Maribavir、BDCRB 或 GCV 以每个实验指定的浓度添加到培养基中，以检查这些化合物对病毒 DNA 合成或成熟的影响[2]。

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在昆虫细胞中评估野生型和突变型UL97蛋白磷酸化更昔洛韦的能力。用高感染复数（MOI为10）表达UL97变体的重组杆状病毒感染Sf21昆虫细胞。感染后48小时，更换为含有1.0 mM GCV和氚标记[³H]GCV的新鲜培养基。继续孵育24小时后，收集细胞，通过酸水解和中和提取核苷酸。将上清液等分试样点样于DEAE-纤维素滤纸上以结合单磷酸化的GCV。洗涤、干燥滤纸后，通过液体闪烁计数测量保留的放射性，以定量GCV磷酸化 [1]。

吸收、分布和排泄
接受每日两次400mg马立巴韦治疗的患者群体药代动力学模型显示，AUC0-tau和Cmax分别为128 µg·h/mL和17.2 µg/mL。其Tmax中位数为1至3小时。
马立巴韦主要通过肝脏代谢消除。口服放射性标记的马立巴韦后，61%的剂量经尿液排出（<2%为原药），14%经粪便排出（5.7%为原药）。
马立巴韦的平均表观稳态分布容积为27.3 L。
在移植后患者中，马立巴韦的平均口服清除率为2.85 L/h。

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代谢/代谢物
口服马立巴韦后主要通过CYP3A4代谢，其次通过CYP1A2代谢。其主要循环代谢物是VP 44469，一种无活性的N-去烷基化代谢物。

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生物半衰期
在移植后患者中，平均消除半衰期为4.32小时。

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在人成纤维细胞（MRC-5）中进行的代谢研究表明，在未感染或HCMV感染的细胞中，马立巴韦均未磷酸化为单磷酸或三磷酸形式。采用阴离子交换和反相高效液相色谱法分析细胞提取物，未检测到磷酸化代谢物。该方法的灵敏度足以检测低至10 nM的细胞内浓度[2]。

肝毒性
在大型预注册临床试验中，接受造血干细胞移植后难治性巨细胞病毒感染的患者中，马立巴韦组的ALT升高发生率为3.5%，而标准治疗组的发生率低于1%。ALT升高均为短暂、轻微且无症状。在上市前研究中，未出现伴有黄疸的临床明显肝损伤病例。自马立巴韦获批上市以来，尚未有与使用马立巴韦相关的伴有黄疸的临床明显肝损伤病例报告。然而，目前关于马利巴韦治疗的临床经验仍然有限。
可能性评分：E（不太可能是临床上明显的肝损伤的原因）。

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蛋白结合
在所有测试浓度范围内，马利巴韦在血浆中均与蛋白质广泛结合（约98%），主要结合物可能是血清白蛋白和α1-酸性糖蛋白。

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与更昔洛韦相比，马利巴韦对原代人骨髓祖细胞的细胞毒性较低。抑制粒细胞-巨噬细胞集落形成单位（CFU-GM）的平均IC50值，马利巴韦为90 ± 4 μM，更昔洛韦为15 ± 3 μM。对红系爆发形成单位 (BFU-E) 抑制的平均 IC50 值，马立巴韦为 88 ± 4 μM，更昔洛韦为 39 ± 10 μM [2]。
在人白血病细胞系（Molt-4、CEM、CEM-CD4+、IM9）中进行的生长抑制研究，得到的 IC50 值范围为 35 μM 至 72 μM [2]。

[1]. The effects of Maribavir on the autophosphorylation of ganciclovir resistant mutants of the cytomegalovirus UL97 protein. Herpesviridae. 2010 Dec 7;1(1):4.

[2]. Potent and selective inhibition of human cytomegalovirus replication by 1263W94, a benzimidazole L-riboside with a unique mode of action. Antimicrob Agents Chemother. 2002 Aug;46(8):2365-72.

马立巴韦是一种巨细胞病毒（CMV；HHV5）pUL97激酶抑制剂，用于治疗移植后患者的CMV感染。大多数标准CMV疗法，例如更昔洛韦或膦甲酸钠，靶向CMV DNA聚合酶——虽然这些药物通常有效，但它们往往会促进CMV对基于DNA聚合酶的疗法产生耐药性，并且其使用常常受到骨髓抑制和肾损伤等毒性的限制。马立巴韦的创新之处在于它靶向CMV pUL97激酶，从而为耐药感染病例提供了一种有效的替代治疗方案。马立巴韦于2021年11月获得FDA批准，商品名为Livtencity（武田制药），用于治疗移植后患者的耐药性CMV感染。该药物于2022年9月获得加拿大卫生部批准，并于2022年11月获得欧盟委员会批准。
马立巴韦是一种巨细胞病毒pUL97激酶抑制剂。马立巴韦的作用机制是作为巨细胞病毒pUL97激酶抑制剂、细胞色素P450 3A4抑制剂、P-糖蛋白抑制剂和乳腺癌耐药蛋白抑制剂。
马立巴韦是一种口服抗病毒药物，可抑制巨细胞病毒（CMV）的pUL97激酶，用于治疗移植后难治性CMV感染。马立巴韦治疗期间，血清转氨酶轻度至中度升高的发生率较低，但尚未发现与临床上明显的急性肝损伤病例相关。
马立巴韦是一种口服苯并咪唑核苷类化合物，具有抗巨细胞病毒（CMV）活性。马立巴韦是一种选择性ATP竞争剂，可抑制病毒UL97激酶，该激酶参与病毒核成熟过程，例如病毒DNA组装和病毒衣壳从感染细胞核中移出。马立巴韦对耐标准抗巨细胞病毒（CMV）药物的CMV毒株有效。

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药物适应症
马立巴韦适用于治疗移植后巨细胞病毒（CMV）感染（造血干细胞移植或实体器官移植后），且该感染对[更昔洛韦]、[缬更昔洛韦]、[西多福韦]或[膦甲酸钠]等标准治疗无效。在美国，接受该治疗的患者体重应超过35公斤，且年龄至少为12岁。在加拿大和欧洲，马立巴韦仅获准用于成人。
LIVTENCITY适用于治疗对一种或多种既往疗法（包括更昔洛韦、缬更昔洛韦、西多福韦或膦甲酸钠）无效（伴或不伴耐药性）的巨细胞病毒 (CMV) 感染和/或疾病，适用于接受过造血干细胞移植 (HSCT) 或实体器官移植 (SOT) 的成人患者。应参考关于合理使用抗病毒药物的官方指南。
巨细胞病毒 (CMV) 感染的治疗
巨细胞病毒疾病

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作用机制
人巨细胞病毒 (CMV) 是一种疱疹病毒，常引起干细胞或器官移植后患者的感染。与其他疱疹病毒一样，巨细胞病毒（CMV）倾向于在宿主体内持续存在，并在免疫抑制状态下重新激活——因此，需要服用多种免疫抑制药物来对抗移植排斥反应的患者发生严重CMV感染的风险要高得多。马立巴韦属于一类称为苯并咪唑核苷的抗巨细胞病毒药物。它通过竞争性抑制人CMV pUL97病毒蛋白激酶，导致病毒复制后仍能存活但存在严重缺陷，尽管其具体机制尚不完全清楚。此外，马立巴韦还能通过抑制核纤层成分层粘蛋白A/C的pUL97依赖性磷酸化来抑制病毒从细胞核释放到细胞质，但这种活性对其抗病毒疗效的贡献程度尚不明确。

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药效学
与传统的CMV抗病毒药物相比，马立巴韦通过不同的靶点发挥抗病毒作用，因此可用于治疗对标准疗法产生耐药性的CMV感染。马立巴韦不应与更昔洛韦或缬更昔洛韦同时使用，因为这两种分子都需要通过CMV pUL97激活才能发挥其抗病毒作用。因此，将它们与马立巴韦（一种针对同一激酶的抑制剂）同时服用会显著降低它们的抗病毒活性。

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马立巴韦（也称为 1263W94 和苯并咪达韦）是一种苯并咪唑核苷化合物，是一种新型的 HCMV 复制抑制剂，靶向 UL97 蛋白激酶 [1]。
它对 HCMV 和 Epstein-Barr 病毒 (EBV) 具有强效的抗病毒活性。据报道，其体外对 HCMV 的 IC50 值比更昔洛韦低 4 至 10 倍，并且对耐更昔洛韦、膦甲酸钠和西多福韦的 HCMV 毒株有效 [1]。
在马立巴韦存在下长期培养 HCMV 细胞会导致耐药性，这主要与 UL97 中的单个氨基酸改变有关：L397R。 UL97 中的其他耐药突变（例如，氨基酸 411、409 和 353 位点的突变）也已被报道 [1]。
该研究得出结论，马立巴韦 是 UL97 激酶的强效 ATP 竞争性抑制剂。UL97 中的 GCV 耐药突变（M460I 除外）不赋予对 马立巴韦 的交叉耐药性。M460I 突变赋予对 马立巴韦 的超敏反应。相反，马立巴韦耐药突变 L397R 严重损害了 UL97 的 GCV 激酶活性和蛋白激酶活性 [1]。

C15H19CL2N3O4

376.23506

375.075

C, 47.89; H, 5.09; Cl, 18.84; N, 11.17; O, 17.01

176161-24-3

471161

Solid powder

1.7±0.1 g/cm3

611.0±65.0 °C at 760 mmHg

323.3±34.3 °C

0.0±1.8 mmHg at 25°C

1.703

2.71

99.77

4

6

4

24

447

4

ClC1=C(Cl)C=C2C(N=C(NC(C)C)N2[C@@H]3[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O3)=C1

KJFBVJALEQWJBS-XUXIUFHCSA-N

InChI=1S/C15H19Cl2N3O4/c1-6(2)18-15-19-9-3-7(16)8(17)4-10(9)20(15)14-13(23)12(22)11(5-21)24-14/h3-4,6,11-14,21-23H,5H2,1-2H3,(H,18,19)/t11-,12-,13-,14-/m0/s1

5,6-Dichloro-2-(isopropylamino)-1-beta-L-ribofuranosyl-1H-benzimidazole

1263-W94; GW-1263; SHP-620; 1263 W94; 1263W-94; BW1263W 94; GW1263; SHP620; BW-1263W94; VP41263; Livtencity; BW 1263W94; VP-41263; GW-257406X; GW257406-X; GW 257406X; GW 257406 X; GW257406X

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~200 mg/mL (~531.58 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.87 mg/mL (7.63 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.87 mg/mL (7.63 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 95% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.64 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 4 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.64 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100μL 25.0mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 5 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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配方 6 中的溶解度: 5% DMSO+40% PEG300+5% Tween-80+50% Saline: ≥ 2.87 mg/mL (7.63 mM)

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。