| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
SREBP1c (transcription inhibition) [2]
SREBP2 (transcription inhibition) [2] miR-33a (level reduction) [2] miR-33b (level reduction) [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
甲基原薯蓣皂苷以剂量和时间依赖的方式抑制A549人肺癌细胞的增殖。MTT实验显示,48小时处理后,甲基原薯蓣皂苷具有剂量依赖性的细胞毒性,IC50值未明确列出,但在20 μM浓度下具有显著的抑制作用。[1] 用20 μM甲基原薯蓣皂苷处理48小时后,Hoechst 33258染色观察到典型的细胞凋亡形态学变化,包括细胞收缩、核碎裂和凋亡小体形成。[1] 流式细胞术分析显示,甲基原薯蓣皂苷(20 μM,48小时)以时间依赖的方式显著诱导A549细胞发生G2/M期细胞周期阻滞和凋亡。 [1]蛋白质印迹分析显示,甲基原薯蓣皂苷处理导致Bcl-2蛋白表达显著降低,而Bax和Bak蛋白表达则急剧升高。[1]甲基原薯蓣皂苷在A549细胞中诱导线粒体跨膜去极化(线粒体膜电位降低)并伴随细胞色素c从线粒体释放到胞质溶胶的时间依赖性变化。[1]甲基原薯蓣皂苷处理(20 μM,48 h)后,caspase-3活性升高;而用caspase-3抑制剂z-DEVD-fmk(20 μM,2 h)预处理则显著抑制了甲基原薯蓣皂苷诱导的细胞死亡和caspase-3活化。[1]
|
| 细胞实验 |
MTT 法检测细胞活力:将 A549 细胞以 4.0 × 10^4 个细胞/孔的密度接种于 24 孔板中,培养 24 小时后,用不同浓度的甲基原薯蓣皂苷(0、5、10、15、25、35 μM)处理 48 小时。加入 MTT 染料(5 mg/ml),再加入 DMSO(150 μl)溶解结晶。使用 Bliss 软件测量吸光度并计算 IC50 值。[1] Hoechst 33258 荧光染色法检测细胞凋亡形态:将 A549 细胞(2 × 10^5 个)接种于 6 孔板中,用 20 μM 甲基原薯蓣皂苷处理 48 小时。细胞用Hoechst 33258染色,观察染色质浓缩和断裂情况。[1]
流式细胞术细胞周期分析:A549细胞用20 μM甲基原薯蓣皂苷处理48小时,用PBS洗涤,在4℃下用70%冰乙醇固定过夜,然后重悬于含有1% Triton X-100、0.1 mg/ml RNase和6 μg/ml碘化丙啶(PI)的染色液中。在37℃避光孵育30分钟后,用流式细胞仪分析样品。 [1] 线粒体膜电位测定:将A549细胞(1 × 10^6 个细胞/ml)与10 μM罗丹明123在37°C孵育10分钟,用PBS洗涤两次,然后重悬于PBS中。使用荧光分光光度计在530 nm处测量荧光强度。细胞用20 μM甲基原薯蓣皂苷处理不同时间。[1] Caspase-3活性测定:将A549细胞用20 μM甲基原薯蓣皂苷处理48小时,收集细胞,洗涤,并在冰上用裂解缓冲液裂解30分钟。裂解液以 10,000 × g 离心 10 分钟,收集上清液 (20 μl),使用 DEVD-pNA 作为特异性底物进行 caspase-3 活性测定。pNA 浓度在 405 nm 处测定。在抑制实验中,细胞在 MPD 处理前用 20 μM z-DEVD-fmk 预处理 2 小时。[1] 线粒体细胞色素 c 释放测定:将 A549 细胞 (1 × 10^6 个细胞/ml) 与 20 μM 甲基原薯蓣皂苷孵育至多 4 小时。将细胞悬浮于裂解缓冲液(195 mM 甘露醇、65 mM 蔗糖、2 mM HEPES pH 7.4、0.05 mM EGTA、0.01 mM MgCl2、0.5 mg/ml BSA)中,并用 0.01% 洋地黄皂苷裂解。通过 10,000 × g 离心 10 分钟获得胞质组分,并收集用于细胞色素 c 检测的商业免疫测定试剂盒。[1] 蛋白质印迹分析:裂解细胞后,采用 Bradford 法测定蛋白浓度。将蛋白提取物(每份样品 20 μg)进行 SDS-PAGE 电泳分离,转移至 PVDF 膜上,与一抗(抗 Bax、Bak、Bcl-2)于 4°C 孵育 12 小时,洗涤后,与 HRP 标记的二抗于室温孵育 1 小时。采用化学发光检测法对蛋白质条带进行显影。[1] |
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
甲基原薯蓣皂苷是一种甾体皂苷。据报道,它存在于菝葜、西伯利亚黄精以及其他具有相关数据的生物体中。甲基原薯蓣皂苷(MPD)是一种呋喃甾醇双糖苷,经高效液相色谱法(HPLC)纯化,从科氏薯蓣(Dioscorea collettii var. hypoglauca)中纯度>97%。它曾被美国国家癌症研究所(NCI)的抗癌药物筛选系统用于测试其对60种人类癌细胞系的活性。在A549细胞中,其作用机制涉及G2/M期细胞周期阻滞和线粒体介导的细胞凋亡,具体表现为Bcl-2下调、Bax和Bak上调、线粒体膜电位丧失、细胞色素c释放到胞质以及caspase-3激活。潜在的治疗应用:肺癌(非小细胞肺癌、腺癌)。 [1]
|
| 分子式 |
C52H86O22
|
|---|---|
| 分子量 |
1063.2261
|
| 精确质量 |
1062.561
|
| CAS号 |
54522-52-0
|
| PubChem CID |
11263254
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
|
| 折射率 |
1.620
|
| LogP |
4.17
|
| tPSA |
335.06
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
12
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
22
|
| 可旋转键数目(RBC) |
15
|
| 重原子数目 |
74
|
| 分子复杂度/Complexity |
1920
|
| 定义原子立体中心数目 |
31
|
| SMILES |
C[C@H]1[C@H]2[C@H](C[C@@H]3[C@@]2(CC[C@H]4[C@H]3CC=C5[C@@]4(CC[C@@H](C5)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O[C@H]7[C@@H]([C@@H]([C@H]([C@@H](O7)C)O)O)O)O)O[C@H]8[C@@H]([C@@H]([C@H]([C@@H](O8)C)O)O)O)C)C)O[C@@]1(CC[C@@H](C)CO[C@H]9[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O9)CO)O)O)O)OC
|
| InChi Key |
HSSJYSJXBOCKQM-GVTGEURHSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C52H86O22/c1-21(20-66-46-40(61)39(60)36(57)31(18-53)70-46)10-15-52(65-7)22(2)33-30(74-52)17-29-27-9-8-25-16-26(11-13-50(25,5)28(27)12-14-51(29,33)6)69-49-45(73-48-42(63)38(59)35(56)24(4)68-48)43(64)44(32(19-54)71-49)72-47-41(62)37(58)34(55)23(3)67-47/h8,21-24,26-49,53-64H,9-20H2,1-7H3/t21-,22+,23+,24+,26+,27-,28+,29+,30+,31-,32-,33+,34+,35+,36-,37-,38-,39+,40-,41-,42-,43+,44-,45-,46-,47+,48+,49-,50+,51+,52-/m1/s1
|
| 化学名 |
(2S,3R,4R,5R,6S)-2-[(2R,3S,4S,5R,6R)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[[(1S,2S,4S,6R,7S,8R,9S,12S,13R,16S)-6-methoxy-7,9,13-trimethyl-6-[(3R)-3-methyl-4-[(2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxybutyl]-5-oxapentacyclo[10.8.0.02,9.04,8.013,18]icos-18-en-16-yl]oxy]-5-[(2S,3R,4R,5R,6S)-3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-6-methyloxane-3,4,5-triol
|
| 别名 |
NSC-698790; Smilax saponin B; NSC 698790; NSC698790
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~94.05 mM)
H2O : ~25 mg/mL (~23.51 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 3.5 mg/mL (3.29 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 35.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 3.5 mg/mL (3.29 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 35.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 3.5 mg/mL (3.29 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.9405 mL | 4.7027 mL | 9.4053 mL | |
| 5 mM | 0.1881 mL | 0.9405 mL | 1.8811 mL | |
| 10 mM | 0.0941 mL | 0.4703 mL | 0.9405 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。