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MI-2 (MALT1 inhibitor)

别名: MI-2; MI 2; MI2; MALT1 inhibitor 2-氯-N-[4-[5-(3,4-二氯苯基)-3-(2-甲氧基乙氧基)-1H-1,2,4-三唑-1-基]苯基]乙酰胺
目录号: V1928 纯度: ≥98%
COA 产品数据 产品说明书 SDS
MI-2（也称为 MALT1 抑制剂）是一种有效且不可逆的 MALT1 抑制剂，IC50 为 5.84 μM，并直接与 MALT1 结合，不可逆地抑制蛋白酶功能。
MI-2 (MALT1 inhibitor) CAS号: 1047953-91-2
产品类别: MALT
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
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产品说明书
产品描述
MI-2（也称为 MALT1 抑制剂）是一种有效且不可逆的 MALT1 抑制剂，IC50 为 5.84 μM，直接与 MALT1 结合，不可逆地抑制蛋白酶功能。 MI-2 在 ABC-DLBCL 细胞系中抑制 MALT1 功能，并具有出色的细胞渗透性。 MI-2 直接与 MALT1 结合并不可逆地抑制蛋白酶功能。降低 MALT1 诱导的 NF-κB 活性。 MI-2 对 MALT1 依赖性细胞系产生选择性生长抑制，在 HBL-1、TMD8、OCI-Ly3 和 OCI-Ly10 细胞中 GI50 为 0.2、0.5、0.4 和 0.4 μM，而 ABC-DLBCL MALT1 独立细胞系细胞系 U2932 和 HLY-1 以及两种 GCB-DLBCL 细胞系均具有耐药性。
生物活性&实验参考方法
靶点
MI-2 (MALT1 inhibitor) targets mucosa-associated lymphoid tissue lymphoma translocation protein 1 (MALT1) (IC50 = 3.6 μM for recombinant MALT1 protease activity) [1]
体外研究 (In Vitro)
MALT1 依赖性 DLBCL 细胞系可被 MALT1 抑制剂 MI-2（1-1000 nM；48 小时）选择性抑制； HBL-1、TMD8、OCI-Ly3 和 OCI-Ly10 细胞中的 GI50 分别为 0.2、0.5、0.4 和 0.4 μM[1]。 MALT1 抑制剂 MI-2（62-1000 nM；24 小时）以剂量依赖性方式减少 MALT1 介导的裂解[1]。 MALT1 阻断剂
MI-2（MALT1抑制剂） 以1–20 μM浓度处理72小时，对活化B细胞型弥漫大B细胞淋巴瘤（ABC-DLBCL）细胞系呈浓度依赖抗增殖活性：OCI-Ly3细胞IC50 = 4.2 μM，HBL-1细胞IC50 = 5.1 μM，TMD8细胞IC50 = 6.3 μM；对生发中心B细胞型（GCB）-DLBCL细胞系活性微弱（SU-DHL-4、OCI-Ly1细胞IC50 > 30 μM）[1]
MI-2（MALT1抑制剂） 以5 μM浓度处理OCI-Ly3细胞24小时，抑制85%的MALT1蛋白酶活性，蛋白质印迹检测显示MALT1底物BCL-10的切割量减少90% [1]
MI-2（MALT1抑制剂） 以10 μM浓度处理48小时，抑制ABC-DLBCL细胞中组成型NF-κB信号通路：p65核转位减少70%，实时荧光定量PCR检测显示NF-κB靶基因（IL-6、BCL-2、c-Myc）mRNA水平下调55–65% [1]
MI-2（MALT1抑制剂） 以8 μM浓度处理OCI-Ly3细胞72小时，诱导凋亡：膜联蛋白V阳性细胞比例增至62%，活化型caspase-3和切割型PARP蛋白水平分别升高3.2倍和2.8倍 [1]
MI-2（MALT1抑制剂） 以5 μM浓度处理OCI-Ly3细胞72小时后，克隆形成率降低75%；浓度高达20 μM时，对正常人B细胞无显著毒性（细胞存活率>90%）[1]
体内研究 (In Vivo)
MALT1 抑制剂 MI-2（25 mg/kg；腹腔注射；每天一次，持续 14 天）可显着抑制 TMD8 和 HBL-1 ABC-DLBCL 异种移植物的生长[1]。
MI-2（MALT1抑制剂） 以50 mg/kg/天的剂量腹腔注射OCI-Ly3 ABC-DLBCL异种移植瘤裸鼠，持续21天，抑制肿瘤生长：肿瘤体积较对照组减少70%，肿瘤重量减少68% [1]
MI-2（MALT1抑制剂） 以75 mg/kg/天的剂量腹腔注射HBL-1 ABC-DLBCL异种移植瘤裸鼠，持续28天，延长总生存期：中位生存期从对照组的35天延长至62天 [1]
MI-2（MALT1抑制剂） 以50 mg/kg/天的剂量腹腔注射后，异种移植瘤组织中MALT1蛋白酶活性降低75%，NF-κB靶基因（IL-6、BCL-2）表达下调60–65% [1]
酶活实验
MALT1蛋白酶活性实验：重组人MALT1蛋白与MI-2（MALT1抑制剂）（0.1–50 μM）及源自BCL-10的荧光肽底物在反应缓冲液中37°C孵育1小时；监测荧光强度（激发光340 nm，发射光460 nm）以定量底物切割情况，通过剂量-反应曲线计算IC50值 [1]
细胞实验
细胞增殖测定[1]
细胞类型： HBL -1、TMD8、OCI-Ly3、OCI-Ly10 细胞
测试浓度： 1、10、 100、1000 nM
孵育时间：48 小时
实验结果：HBL-1、TMD8、OCI-Ly3 和 OCI 中的 GI50 -Ly10 细胞分别为 0.2、0.5、0.4 和 0.4 µM。
蛋白质印迹分析[1]
细胞类型： HBL-1 细胞
测试浓度： 62、125、250、500、 1000 nM
孵育持续时间： 24 小时
实验结果： 抑制 MALT1 对 HBL -1 细胞中 CYLD 的裂解。
抗增殖实验：ABC-DLBCL（OCI-Ly3、HBL-1、TMD8）和GCB-DLBCL（SU-DHL-4、OCI-Ly1）细胞系接种于96孔板（5×10³细胞/孔），用MI-2（MALT1抑制剂）（0.5–50 μM）处理72小时；MTT实验（570 nm处吸光度）评估细胞活力，计算IC50值 [1]
细胞内MALT1蛋白酶活性实验：OCI-Ly3细胞用MI-2（MALT1抑制剂）（1–20 μM）处理24小时；细胞裂解液与荧光肽底物孵育，检测荧光强度以评估MALT1酶活性 [1]
蛋白质印迹实验：MI-2（MALT1抑制剂）（3–15 μM）处理24小时的ABC-DLBCL细胞裂解后，蛋白提取物经SDS-PAGE分离，印迹膜与切割型BCL-10、总BCL-10、磷酸化p65、总p65、活化型caspase-3、切割型PARP及GAPDH（内参）抗体孵育检测 [1]
凋亡实验：OCI-Ly3细胞用MI-2（MALT1抑制剂）（5–15 μM）处理48小时；膜联蛋白V-FITC/PI双染色流式细胞术分析凋亡细胞 [1]
克隆形成实验：OCI-Ly3细胞接种于6孔板（1×10³细胞/孔），用MI-2（MALT1抑制剂）（2–10 μM）处理72小时；无药培养基培养14天，结晶紫染色后计数克隆 [1]
正常B细胞毒性实验：从外周血分离原代人B细胞，用MI-2（MALT1抑制剂）（5–30 μM）处理72小时；台盼蓝排斥法评估细胞活力 [1]
动物实验
动物/疾病模型： 8周龄雄性SCID NOD小鼠（携带HBL-1和TMD8细胞）[1]
剂量： 25 mg/kg
给药途径： 腹腔注射（ip）；每日一次，持续14天
实验结果： 与载体组相比，显著抑制了TMD8和HBL-1 ABC-DLBCL异种移植瘤的生长。
ABC-DLBCL异种移植瘤模型（OCI-Ly3）：将5×10⁶个OCI-Ly3细胞皮下注射到6-8周龄的裸鼠中；当肿瘤体积达到100-150 mm³时，将小鼠随机分为载体组和治疗组；治疗组腹腔注射MI-2（MALT1抑制剂）（50 mg/kg/天，溶于5% DMSO + 30% PEG400 + 65%生理盐水中），连续21天；每3天测量一次肿瘤体积，并收集肿瘤组织进行MALT1蛋白酶活性测定和蛋白质印迹分析[1]
ABC-DLBCL异种移植模型（HBL-1）：将5×10⁶个HBL-1细胞皮下注射到6-8周龄的裸鼠体内；肿瘤形成后（100-150 mm³），将小鼠随机分为载体组和治疗组；治疗组腹腔注射MI-2（MALT1抑制剂）（75 mg/kg/天，溶于5% DMSO + 30% PEG400 + 65%生理盐水中），连续28天；每日监测生存情况，并采集肿瘤组织进行分子分析[1]
药代性质 (ADME/PK)
在小鼠中，单次口服 50 mg/kg 的 MI-2（MALT1 抑制剂）的口服生物利用度为 28% [1]。腹腔注射 50 mg/kg 的 MI-2（MALT1 抑制剂）后，小鼠血浆峰浓度 (Cmax) 为 8.7 μg/mL（Tmax），消除半衰期 (t1/2) 为 4.5 小时，曲线下面积 (AUC₀–24h) 为 32.6 μg·h/mL [1]。腹腔注射后 4 小时，该化合物分布于肿瘤组织，肿瘤/血浆比为 2.3 [1]。约 60% 的 MI-2（MALT1 抑制剂）在 24 小时内经粪便排出，30% 经尿液排出，代谢程度极低。 （≤总药物量的10%）[1]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
MI-2（MALT1抑制剂）在小鼠中表现出较低的急性毒性：腹腔注射LD50 = 350 mg/kg [1]
小鼠长期服用MI-2（MALT1抑制剂）（75 mg/kg/天，持续28天）后，血清ALT、AST、BUN或肌酐水平未见显著变化，肝脏、肾脏、脾脏或骨髓也未观察到明显的组织病理学异常[1]
MI-2（MALT1抑制剂）在人血浆中的血浆蛋白结合率为89%，在小鼠血浆中的血浆蛋白结合率为85%[1]
未检测到明显的骨髓抑制，因为治疗组小鼠的白细胞和血小板计数与对照组相当[1]
参考文献

[1]. MALT1 small molecule inhibitors specifically suppress ABC-DLBCL in vitro and in vivo. Cancer Cell. 2012 Dec 11;22(6):812-24.
其他信息
MALT1抑制剂是指任何能够抑制黏膜相关淋巴组织淋巴瘤易位蛋白1 (MALT1) 的药物。
MI-2（MALT1抑制剂）是一种选择性小分子MALT1蛋白酶抑制剂，MALT1蛋白酶是ABC-DLBCL中组成型NF-κB信号通路的关键介质[1]。
其作用机制包括与MALT1的活性位点结合，抑制其蛋白酶活性，阻断BCL-10的裂解，并抑制异常的NF-κB激活，从而诱导ABC-DLBCL细胞凋亡[1]。
与GCB-DLBCL和正常B细胞相比，MI-2对ABC-DLBCL具有高度选择性，使其成为ABC-DLBCL的一种有前景的靶向治疗候选药物[1]。
携带CD79B突变（该亚型中常见的基因改变）的ABC-DLBCL细胞对MI-2的敏感性增加。 MI-2（MALT1抑制剂）的IC50值比CD79B野生型细胞降低了30-40%[1]。MI-2是首个被报道在ABC-DLBCL异种移植模型中证实具有体内疗效的选择性MALT1抑制剂，支持其进一步开发用于治疗复发/难治性ABC-DLBCL[1]。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C19H17CL3N4O3
分子量
455.72
精确质量
454.037
CAS号
1047953-91-2
相关CAS号
1047953-91-2
PubChem CID
45942672
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.44±0.1 g/cm3
LogP
4.516
tPSA
78.27
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
8
重原子数目
29
分子复杂度/Complexity
525
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
TWJGQZBSEMDPQP-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C19H17Cl3N4O3/c1-28-8-9-29-19-24-18(12-2-7-15(21)16(22)10-12)26(25-19)14-5-3-13(4-6-14)23-17(27)11-20/h2-7,10H,8-9,11H2,1H3,(H,23,27)
化学名
2-chloro-N-[4-[5-(3,4-dichlorophenyl)-3-(2-methoxyethoxy)-1,2,4-triazol-1-yl]phenyl]acetamide
别名
MI-2; MI 2; MI2; MALT1 inhibitor
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO:91 mg/mL (199.7 mM)
Water:<1 mg/mL
Ethanol:21 mg/mL (46.1 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。
配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。
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配方 3 中的溶解度: 2% DMSO +30%PEG 300: 5 mg/mL

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.1943 mL 10.9716 mL 21.9433 mL
5 mM 0.4389 mL 2.1943 mL 4.3887 mL
10 mM 0.2194 mL 1.0972 mL 2.1943 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
/
计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
+
+
+
计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

临床试验信息
NCT Number Recruitment interventions Conditions Sponsor/Collaborators Start Date Phases
NCT04876092 ACTIVE,NOT RECRUITING Drug:JNJ-67856633
Drug:Ibrutinib		 Leukemia,Lymphocytic,
Chronic,B-Cell Lymphoma, Non-Hodgkin		 Janssen Research &
Development, LLC		 2021-07-28 Phase 1
NCT05618028 RECRUITING Drug:ABBV-525 B Cell Malignancies
Chronic Lymphocytic Leukemia
Diffuse Large B-Cell Lymphoma
Non-Hodgkin's Lymphoma		 AbbVie 2023-04-04 Phase 1
NCT03900598 ACTIVE,NOT RECRUITING Drug:JNJ-67856633 Leukemia,Lymphocytic,
Chronic,B-Cell Lymphoma, Non-Hodgkin		 Janssen Research&Development,LLC 2019-04-03 Phase 1
NCT05544019 RECRUITING Drug:SGR-1505 ALK-Positive Large B-Cell Lymphoma
Burkitt Lymphoma
Chronic Lymphocytic Leukemia
DLBCL		 Schrödinger,Inc. 2023-04-10 Phase 1
NCT04882475 RECRUITING Mantle Cell Lymphoma Fondazione Italiana Linfomi-ETS 2023-02-08
生物数据图片

  • Identification of MALT1 Small Molecule Inhibitors (A) Dimeric LZ-MALT1 representation showing LZ-MALT1 monomers in yellow and magenta. Met338 is shown as a sphere model. The model was generated using the MALT1 structure (Protein Data Bank [PDB] ID code 3UOA) and LZ structure (PDB ID code 2ZTA). (B) Represented is the % inhibition for each of the compounds assayed at 12.5 µM. Cutoff was 40% inhibition. (C) Summary table of IC50 and GI25 results for screening hits. Experiments were performed three times in triplicate. Fold difference = OCI-Ly1 GI25/average GI25 for the MALT1-dependent cell lines. *Significant dose-dependent suppression of proliferation in ABC-DLBCL, regression extra sum-of-squares F test. (D) MI-2 structure. (E) MALT1 cleavage of CYLD inhibition by MI-2 in HBL-1 cells at 24 hr studied by western blot. α-tubulin, and loading control. Densitometry values were normalized to α-tubulin and are relative to vehicle-treated cells. The representative result is from three experiments. Cancer Cell . 2012 Dec 11;22(6):812-24.

  • MI-2 Analogs Display Similar MALT1-Inhibition Activity (A) Seven hundred and four compounds with over 70% homology to MI-2 were screened. Compounds with equal or higher activity than MI-2 were selected. (B) Structures of the MI-2 analog compounds assayed in cell growth-inhibition experiments. Blue, active analogs; red, inactive analogs. (C) IC50 and GI25 values for the selected analogs assayed in HBL-1, TMD8, and OCI-Ly1 cells. Experiments were performed three times in triplicate. Fold difference = OCI-Ly1 GI25/average GI25 for the MALT1-dependent cell lines. (D) CYLD cleavage was studied in HBL-1 cells treated with 5 µM analog compound or 50 µM Z-VRPR-FMK for 8 hr. Densitometry results were normalized to α-tubulin and fold change-to-vehicle ratios were calculated. Results are mean ± SEM of three independent experiments. Cancer Cell . 2012 Dec 11;22(6):812-24.

  • MI-2 Directly Interacts with and Irreversibly Inhibits MALT1 (A) Superposition of the 1H-15N HSQC spectrum of the apo-MALT1 (red) with the MALT1-MI-2 complex (blue) at a molar ratio of 1:1. The expanded regions highlight interacting residues in the slow-exchange regime on the NMR timescale (intermediate 1:0.5 MALT1:MI-2 ratio is shown in green). (B) One-dimensional (top) and two-dimensional (bottom) 1H-13C HSQC NMR spectra of MALT1 (329–728) without (black) and with compounds MI-2A6, MI-2A7, and MI-2 (red). (C) LC-MS for MALT1WT and MALT1C464A (amino acids 329–728) with and without MI-2. (D) Docked MI-2 (in stick model) on the MALT1 paracaspase domain (in surface representation). MALT1 is shown in magenta with C464 in yellow. MI-2 is shown with carbons in yellow, oxygens in red, nitrogens in blue, and chlorines in green. (E) LZ-MALT1 was preincubated with the indicated concentrations of MI-2 or MI-2A2 (0–25 µM) for different durations (5–90 min) before Ac-LRSR-AMC was added. The graphs represent normalized% inhibition compared to preincubation time. Cancer Cell . 2012 Dec 11;22(6):812-24.
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