| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
ERK2/1; PKCβII
ML192 targets the orphan G protein-coupled receptor GPR55, which has been implicated as a potential cannabinoid receptor subtype. By antagonizing GPR55, ML192 blocks the receptor-mediated recruitment of β-arrestin and inhibits downstream signaling pathways including ERK1/2 phosphorylation and PKCβII translocation. The compound exhibits an IC50 of 702 nM for GPR55 and shows >45-fold selectivity over GPR35, CB1, and CB2. This selectivity makes ML192 a valuable tool for studying the physiological and pathological roles of GPR55. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
ML192 和 ML186 的 IC50 值分别为 0.70 μM 和 0.29 μM，在 10 μM L-α 溶血磷脂酰肌醇 (LPI) 或 1 μM ML186 的刺激下，二者均能抑制 β-arrestin 的转运 [1]。在表达 GPRSS 的 U2OS 细胞中，ML192 能强烈抑制 ERK1/2 磷酸化（0、10、30 和 100 μM），而在野生型 GPR55 阻滞细胞中，ML192 会干扰 PKCβII 的转位 [1]。[1] 体外实验表明，ML192 作为 GPR55 的选择性拮抗剂，能够抑制 β-arrestin 的募集、ERK1/2 磷酸化以及 PKCβII 的转位。该化合物对GPR55的IC50值为702 nM，并且对大麻素受体CB1和CB2以及GPR35（IC50值>32 μM）具有选择性。这些体外研究通常使用表达重组GPR55或内源性GPR55的细胞系进行。ML192用于研究GPR55在各种细胞过程中的作用，包括炎症、代谢调节和神经信号传导。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，ML192尚未在动物模型中进行广泛表征。然而，GPR55因其被认为是内源性大麻素受体亚型以及在治疗肥胖等行为障碍方面的潜在应用价值而备受关注。该化合物是研究GPR55生理功能的工具，但仍需进一步的体内研究来评估其治疗潜力。其调节GPR55介导的信号传导的能力提示其可能在代谢和神经系统疾病的治疗中具有应用前景。
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| 酶活实验 |
化合物库筛选[1]
本研究采用β-arrestin（见下文方法）高通量、高内涵筛选（HCS）方法，对30万个化合物进行筛选，以鉴定有效的GPR55选择性拮抗剂。这项工作是与分子库探针生产中心网络（Molecular Libraries Probe Production Centers Network）项目合作完成的。有关该化合物库的更多详细信息，请访问http://mli.nih.gov/mli/compound-repository/mlsmr-compounds/。筛选化合物的GPR55拮抗活性（PubChem AID 2026，以LPI为激动剂），以及GPR35（PubChem AID 2809、2815）、CB1（PubChem AID 2814、2835）和CB2（PubChem AID 2822、2836）的激动和拮抗活性。在高内涵成像分析中，我们使用了一种永久表达β-arrestin GFP生物传感器和目标增强受体（例如GPR55、GPR35、CB1或CB2）的细胞系。分析方案的详细描述（根据AID编号）可在PubChem网站（http://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）上查阅。我们进一步评估了对GPR55具有强效拮抗作用且对GPR35、CB1或CB2无激动或拮抗作用的化合物，以检测其对GPR55激动剂LPI或ML186诱导的pERK激活和PKCβII易位的抑制作用（详见下文方法）。从筛选中选出了一组新型GPR55拮抗剂分子骨架ML191 (CID23612552)、ML192 (CID1434953)和M193 (CID1261822)，并利用GPR55非活性状态的计算机模型研究了每种化合物的结合情况。ML192的体外酶/受体结合（非细胞）测定通常采用放射性配体结合测定，使用表达重组人GPR55的细胞膜。化合物的结合亲和力（Ki或IC50）取决于其从受体上置换标记配体的能力。此外，还可以使用[35S]GTPγS结合等功能性测定来测量ML192对GPR55的拮抗活性。这些测定证实了化合物与受体的直接相互作用及其作为拮抗剂的作用机制。 |
| 细胞实验 |
基于细胞的检测[1]
化合物LPI、ML191、ML192、ML193和ML186（MolPort）溶于DMSO中，配制成10 mM的溶液。将10 mM的储备液溶于Hanks平衡盐溶液（HBSS）中，配制成工作浓度。 β-Arrestin转位[1] 先前已描述过永久表达HA-GPR55E和βarr2-GFP的U2OS细胞。将细胞以80-85%的汇合度接种于玻璃盖玻片上，并置于24孔板（BD Falcon™）中。细胞在37°C、5% CO2条件下培养过夜。给药前用HBSS短暂清洗细胞。实验均使用HBSS作为检测缓冲液。在室温下用药物处理 40 分钟后，评估激动剂刺激的 βarr2-GFP 重分布。然后用 4% 多聚甲醛在室温下固定细胞 25 分钟，之后用 PBS 洗涤三次，再用双蒸水洗涤一次。拮抗方案包括用拮抗剂预孵育 15 分钟，然后与激动剂共同孵育 40 分钟。 PKCβII 易位 GPR55 激活分析 [1] 将 HEK 293 细胞接种于 35 mm 玻璃孔 Matek 塑料培养皿中，使用标准磷酸钙转染方案，将含有 1.5 μg/ml PKCβII-GFP cDNA 或 PKC 质粒和 5 μg/ml 人 GPR55 cDNA 的 pCMV-Sport6 质粒的 175 μl 溶液瞬时转染至细胞中。转染24小时后，使用表达GPR55和PKCβII-GFP的细胞。用温热的MEM培养基洗涤细胞，并在给药后于37°C、5% CO2条件下培养30-45分钟。在室温下进行药物处理后，评估激动剂刺激的PKCβII-GFP重分布的抑制情况。 细胞外信号调节激酶1/2 (ERK1/2) 检测[1] 细胞外信号调节激酶1/2 (ERK1/2) 的磷酸化水平采用免疫印迹法测定，方法如前所述。将表达GPR55E的U2OS细胞培养至亚融合状态，置于60 mm培养皿中，并在检测前进行过夜血清饥饿处理。用HBSS缓冲液洗涤细胞一次，并在激动剂（LPI 10 μM，10分钟）处理前30分钟加入拮抗剂。药物处理后，将细胞置于裂解缓冲液（50 mM Hepes、150 mM NaCl、1 mM EDTA、1 mM EGTA、10% 甘油、1% Triton X-100、10 μM MgCl₂、20 mM 对硝基苯磷酸酯、1 mM Na₃VO₄、25 mM NaF 和蛋白酶抑制剂混合物（1:25，pH 7.5））中裂解。裂解液立即置于冰上 10 分钟，然后在 4°C 下以 16,000 × g 离心 30 分钟。收集上清液（胞质组分），并使用牛血清白蛋白作为标准品，通过 Bradford 法测定蛋白质浓度。将胞质组分（20 μg）进行 10% SDS-PAGE 电泳分离，然后进行免疫印迹分析。使用 LI-COR Odyssey IR 成像仪检测双磷酸化 ERK1/2 抗体（1:5000）。使用针对总 ERK1/2 的多克隆抗体（1:1000）确认蛋白上样量一致。使用 LI-COR Odyssey IR 成像仪进行密度分析。ERK1 和 ERK2 的值均以总 ERK1/2 水平进行标准化。数据以 10 μM LPI 处理后的反应进行标准化，并以抑制百分比表示。 使用表达重组 GPR55 或内源性 GPR55 的细胞系进行 ML192 的体外细胞实验。用 ML192 处理细胞，并使用 β-arrestin 募集实验（例如 PathHunter 或 Tango 实验）测量 GPR55 介导的 β-arrestin 募集的抑制情况。通过蛋白质印迹法或酶联免疫吸附试验（ELISA）检测ERK1/2磷酸化水平，并通过免疫荧光显微镜监测PKCβII的转位。这些检测证实了ML192对GPR55的功能性拮抗作用及其对下游信号通路的影响。 |
| 动物实验 |
关于ML192的体内动物实验报道不多。然而，作为一种GPR55拮抗剂，ML192可用于肥胖、疼痛、炎症或其他与GPR55信号通路相关的疾病的动物模型中进行评估。标准实验方案包括对啮齿动物进行口服或腹腔注射ML192，随后评估其行为、代谢或炎症终点指标。可通过检测靶组织中ERK1/2磷酸化等药效学标志物来确认药物是否与靶点结合。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
ML192 的详细药代动力学性质尚未得到充分表征。该化合物的分子量为 382.48 g/mol，分子式为 C20H22N4O2S，可溶于 DMSO。作为一种研究化合物，ML192 主要用于体外研究，其体内药代动力学尚需进一步研究。现有文献中关于其生物利用度、半衰期和组织分布等参数的记载尚不充分。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
ML192的毒理学特征尚未得到广泛报道。作为一种研究化合物，ML192并非用于人体，其毒性也未经过系统评估。需要开展包括细胞系细胞毒性评估和动物模型急性毒性评估在内的标准毒理学研究，以确定其安全性。该化合物对GPR55受体的选择性高于其他受体，提示其脱靶效应风险较低，但目前尚无全面的毒性测试数据。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
2-呋喃基-[4-(2-甲基-5,6,7,8-四氢-[1]苯并噻唑环戊烯基[2,3-d]嘧啶-4-基)-1-哌嗪基]甲基酮是一种N-芳基哌嗪类化合物。
ML192是一种选择性GPR55拮抗剂，用作研究工具，用于研究GPR55在各种生理和病理过程中的作用。它也被称为MLS000526305和CID1434953。GPR55是一种孤儿G蛋白偶联受体（GPCR），与大麻素信号传导、疼痛、炎症和代谢调节有关。ML192目前尚未获批上市，但它是靶点验证和药物发现的重要工具。需要进一步研究以探索其在肥胖症和行为障碍等疾病中的治疗潜力。 |
| 分子式 |
C20H22N4O2S
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|---|---|
| 分子量 |
382.482
|
| 精确质量 |
382.146
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| 元素分析 |
C, 62.81; H, 5.80; N, 14.65; O, 8.37; S, 8.38
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| CAS号 |
460331-61-7
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| 相关CAS号 |
460331-61-7;
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| PubChem CID |
1434953
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.664
|
| LogP |
3.07
|
| tPSA |
90.7
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
|
| 重原子数目 |
27
|
| 分子复杂度/Complexity |
556
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O1C=CC=C1C(N1CCN(C2C3C4CCCCC=4SC=3N=C(C)N=2)CC1)=O
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| InChi Key |
GDPDARVUXXOYAJ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H22N4O2S/c1-13-21-18(17-14-5-2-3-7-16(14)27-19(17)22-13)23-8-10-24(11-9-23)20(25)15-6-4-12-26-15/h4,6,12H,2-3,5,7-11H2,1H3
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| 化学名 |
furan-2-yl-[4-(2-methyl-5,6,7,8-tetrahydro-[1]benzothiolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperazin-1-yl]methanone
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| 别名 |
MLS000526305; ML192; CID1434953; ML 192; MLS-000526305; ML-192; 460331-61-7; MLS000526305; 2-furanyl[4-(5,6,7,8-tetrahydro-2-methyl[1]benzothieno[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-1-piperazinyl]-methanone; furan-2-yl(4-(2-methyl-5,6,7,8-tetrahydrobenzo[4,5]thieno[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperazin-1-yl)methanone; furan-2-yl-[4-(2-methyl-5,6,7,8-tetrahydro-[1]benzothiolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperazin-1-yl]methanone; SMR000116779; 2-furanyl-[4-(2-methyl-5,6,7,8-tetrahydro-[1]benzothiolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-1-piperazinyl]methanone; CID-1434953; ML192
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~261.45 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6145 mL | 13.0726 mL | 26.1452 mL | |
| 5 mM | 0.5229 mL | 2.6145 mL | 5.2290 mL | |
| 10 mM | 0.2615 mL | 1.3073 mL | 2.6145 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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