| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The research community is using ML228 (CID-46742353) as a new chemotype to investigate HIF activation and its possible therapeutic applications. In addition to having a highly different structure from well-known HIF activators, ML228 is devoid of the nearly universally present acidic functional groups seen in PHD inhibitors, which could be crucial for the treatment of specific diseases [1][2].
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| 体外研究 (In Vitro) |
研究界正在使用 ML228 (CID-46742353) 作为新的化学型来研究 HIF 激活及其可能的治疗应用。除了与众所周知的 HIF 激活剂具有高度不同的结构外，ML228 缺乏 PHD 抑制剂中几乎普遍存在的酸性官能团，而这对于特定疾病的治疗至关重要 [1][2]。
ML228 在三个HIF特异性活性检测中均为活性最高的化合物之一：缺氧反应元件 (HRE)-荧光素酶报告基因检测 (EC50 = 1.23 μM)、HIF-1α核转位高内涵成像检测 (EC50 = 1.40 μM) 以及诱导VEGF转录的实时PCR检测 (EC50 = 1.63 μM)。它在蛋白酶体抑制反筛检测中无活性，表明其效应并非源于非特异性的蛋白酶体抑制。[1] 为了研究金属螯合在其机制中的潜在作用，测试了过量铁或锌对ML228在HRE-荧光素酶检测中活性的影响。向培养基中添加50 μM铁导致剂量反应曲线显著右移 (EC50从1.12 μM移至15.6 μM)，并大幅降低反应幅度。添加50 μM锌产生较小的右移 (EC50 = 5.01 μM)。这表明ML228能够螯合铁，这与某些已知的HIF激活机制一致。细胞毒性检测排除了添加金属后活性降低是由于细胞死亡所致。[1] 将ML228以10 μM浓度提交至包含68个GPCR、离子通道、激酶和转运蛋白的放射性配体结合实验组。它在六个靶点上抑制了超过75%的放射性配体结合：人腺苷A3受体 (80%抑制)、人多巴胺转运蛋白 (DAT) (87%抑制)、人阿片μ受体 (85%抑制)、人钾离子通道hERG (86%抑制)、人5-羟色胺5-HT2B受体 (92%抑制) 以及大鼠钠离子通道位点2 (105%抑制)。在另外十个靶点上观察到中度结合抑制 (50-75%)。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
脊髓损伤（SCI）后，用ML228（注射；1 µg/kg；7天）治疗可以增强局部缺氧缺血环境，减轻随后的SCI损伤，并促进神经功能恢复[3]。
在大鼠脊髓损伤模型中，与未治疗的对照组相比，使用ML228（1 µg/kg）治疗能显著改善功能恢复，这在术后第3天和第7天通过Basso, Beattie, and Bresnahan（BBB）运动功能评分量表评估得到证实。[3] 对损伤脊髓组织的蛋白质印迹分析显示，在术后第1、3、7天，ML228治疗组的HIF-1α和VEGF蛋白表达水平均显著高于未治疗的对照组。[3] 脊髓切片的免疫组织化学分析证实，在所有检查时间点（损伤后第1、3、7天），ML228治疗组的HIF-1α和VEGF表达及阳性染色均比未治疗的对照组更强、更广泛。[3] 术后第7天脊髓组织的苏木精-伊红（H&E）染色显示，与未治疗的对照组相比，ML228治疗组的组织结构更有序、清晰，观察到的坏死区域和胶质疤痕更少。[3] |
| 细胞实验 |
使用稳定转染了由缺氧反应元件 (HREs) 控制表达荧光素酶的人U2OS骨肉瘤细胞系，进行了基于表型的高通量HIF介导的报告基因筛选。化合物最初在7.5 μM浓度下筛选，对命中化合物进行了完整的剂量反应曲线表征。阳性对照去铁胺 (DFO, 100 μM) 在此检测中的EC50为17.8 μM。[1]
采用高内涵成像检测来观察表达与绿色荧光蛋白 (GFP) 融合的HIF-1α的U2OS细胞中HIF-1α的积累和核转位。该检测为HIF通路激活提供了二级确认。[1] 进行了实时PCR检测，以评估化合物诱导HIF通路下游靶基因VEGF转录的能力。[1] 使用商业化的基于细胞的蛋白酶体抑制检测作为反筛，以排除作为广谱蛋白酶体抑制剂起作用的化合物。ML228在此检测中无活性。[1] 在相同的U2OS细胞系中进行了细胞毒性检测 (CellTiter-Glo®)，以排除观察到的HIF活性变化（尤其是在添加金属的情况下）是由于化合物诱导的细胞死亡所致。在测试条件下未观察到毒性。[1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： SD大鼠 [3]
剂量： 1 µg/kg 给药途径： 注射；7天 实验结果： 中枢神经系统脊髓损伤减轻，相关症状缓解。 共使用90只12周龄雌性Sprague Dawley大鼠（体重220-255 g）。[3] 将大鼠随机分为三组（每组n=30）：假手术组（未进行脊髓损伤手术）、对照组（脊髓损伤但未进行治疗）和治疗组（脊髓损伤后接受ML228治疗）。[3] 治疗组接受ML228治疗，剂量为1 µg/kg。具体给药途径和频率未在正文中详细描述。 [3] 在麻醉状态下，通过在T10节段进行脊髓半切术诱导脊髓损伤。假手术组大鼠接受相同的手术操作，但不进行脊髓横断。[3] 在术前以及术后1、3和7天进行行为学测试（BBB评分）。在这些时间点处死动物，用于组织采集和分析。[3] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
ML228 属于 1,2,4-三嗪类化合物，其三嗪环的 3、5 和 6 位分别被吡啶-2-基、([联苯]-4-基甲基)氨基和甲基取代。它是缺氧诱导因子 (HIF) 通路的激活剂。它属于联苯类、1,2,4-三嗪类、仲胺类和吡啶类化合物。ML228 代表了一种用于研究 HIF 激活的新型化学类型，其结构与已知的 PHD 抑制剂不同，因为它缺乏此类抑制剂中常见的酸性官能团（例如羧酸）。这一特性可能有利于某些应用，例如需要穿透血脑屏障的潜在中枢神经系统靶点。 [1]
基于过量铁存在下其HRE-荧光素酶活性显著降低，推测其作用机制涉及铁螯合。[1] 分子建模（使用SurflexSim进行基于形状的相似性评分）表明，ML228与PHD2的结合模式与已发表的PHD抑制剂相似的可能性较低。基于形状的相似性评分较低（1-10分制，5.5分），且手动对接结果表明PHD2活性位点存在负向空间位阻。这意味着其HIF激活机制可能不同于经典的竞争性PHD抑制。[1] ML228被推荐为一种分子探针工具化合物，供研究人员用于研究HIF通路激活及其治疗潜力。[1] |
| 分子式 |
C₂₇H₂₁N₅
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|---|---|---|
| 分子量 |
415.49
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| 精确质量 |
415.179
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| CAS号 |
1357171-62-0
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
46742353
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
686.0±65.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
368.7±34.3 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.1 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.671
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| LogP |
5.05
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| tPSA |
63.59
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
536
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
QNRODODTMXCRKU-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C27H21N5/c1-3-9-21(10-4-1)22-16-14-20(15-17-22)19-29-27-25(23-11-5-2-6-12-23)31-32-26(30-27)24-13-7-8-18-28-24/h1-18H,19H2,(H,29,30,32)
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| 化学名 |
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.02 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.02 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.02 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4068 mL | 12.0340 mL | 24.0680 mL | |
| 5 mM | 0.4814 mL | 2.4068 mL | 4.8136 mL | |
| 10 mM | 0.2407 mL | 1.2034 mL | 2.4068 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Complete response curves forML228.Bioorg Med Chem Lett.2012 Jan 1;22(1):76-81. |
Effects of metals on HRE luciferase activity ofML228.Bioorg Med Chem Lett.2012 Jan 1;22(1):76-81. |
Shape based molecular graphics aligned with the SurflexSim conformational ensemble illustrate the large dissimilarity in shape and volume ofML228(green surface) with the composite shape of the published PHD2 ligands. |
PHD2-IN-6
HIF-1α-IN-8
JNJ-42905343
CHNQD-03301
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粤公网安备 44011102003439号
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