| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
β1i (LMP2) immunoproteasome subunit (equipped with the reversible boronic acid warhead).
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| 体外研究 (In Vitro) |
在 wt 或 LMP7 缺陷小鼠的脾细胞中，用 ML604440（300 nM；过夜）处理对 H-2Kb 的表面表达有影响 [2]。 ML604440 处理（300 nM；24 小时）基本上不会对人 PBMC 或小鼠脾细胞进行染色。 ML604440（300 nM；3 天）对产生 IL-17A 的 CD4+ T 细胞的总量没有影响 [2]。
ML604440（300 nM）单独使用，不能抑制LPS刺激的小鼠脾细胞或人PBMCs分泌IL-6。 当ML604440（300 nM）与LMP7选择性抑制剂PRN1126（300 nM）联合使用时，LPS刺激的小鼠脾细胞和人PBMCs的IL-6分泌被显著降低，其程度与双重抑制剂ONX 0914（300 nM）的效果相似。这表明抑制LMP2和LMP7对于抑制细胞因子产生是必需的。 ML604440（300 nM）单独使用，不影响在极化条件下幼稚小鼠CD4+ T细胞向产生IL-17A的Th17细胞分化。 当ML604440（300 nM）与PRN1126（300 nM）联合使用时，Th17细胞分化被显著抑制，效果与ONX 0914（300 nM）相似。 ML604440（300 nM）单独使用，不会降低野生型小鼠脾细胞表面MHC-I分子H-2Kb的表达。 当ML604440（300 nM）与PRN1126（300 nM）联合使用时，H-2Kb的表面表达被显著降低，效果与ONX 0914（300 nM）相似。这种降低在LMP7缺陷的脾细胞中未观察到，证实了联合抑制的特异性。[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
LMP2 通过 ML604440 处理（腹腔注射；10 mg/kg；每天一次；7 天）进行体内染色，不会对其背后的投影造成明显改变 [3]。
在葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的结肠炎模型中，与溶剂对照组相比，每日单独使用ML604440（15 mg/kg，皮下注射）治疗不能防止小鼠体重下降。然而，ML604440（15 mg/kg）与PRN1126（40 mg/kg）联合给药能显著减轻体重下降和结肠缩短。 在实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型中，从免疫当天开始，间歇性给药（每周三次）单独使用ML604440（15 mg/kg，皮下注射）与溶剂组相比，不能延迟疾病发作或减轻严重程度。相比之下，ML604440（15 mg/kg）与PRN1126（40 mg/kg）联合治疗能显著延迟疾病发作并降低疾病发生率。[2] |
| 细胞实验 |
IL-6分泌实验： 将小鼠脾细胞或人PBMCs与抑制剂（例如300 nM ML604440、PRN1126或它们的组合）或DMSO对照一起孵育，并用LPS（3 µg/ml）刺激过夜。20小时后，按照制造商说明书，使用ELISA测定上清液中IL-6的浓度。[2]
Th17分化实验： 磁珠分选纯化的小鼠CD4+ T细胞在Th17极化细胞因子（TGF-β和IL-6）以及中和抗IL-4和IFN-γ抗体存在下，用板结合的抗CD3和抗CD28抗体刺激。向培养物中加入抑制剂（例如300 nM ML604440、PRN1126或它们的组合）或DMSO。培养3天后，在布雷菲德菌素A存在下，用PMA和离子霉素重刺激细胞4小时。然后通过流式细胞术分析CD4+细胞内的IL-17A表达。[2] MHC-I表面表达实验： 将来自野生型或LMP7缺陷小鼠的脾细胞与抑制剂（例如300 nM ML604440、PRN1126或它们的组合）或DMSO一起孵育过夜。然后，在阻断Fc受体后，用抗小鼠H-2Kb-PE抗体染色。通过流式细胞术分析染色细胞以测量MHC-I表面表达水平。[2] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雄性C57BL/6J小鼠（6-8周龄）注射抗血小板单克隆抗体[3]
剂量：10 mg/kg 给药途径：腹腔注射（ip）；10 mg/kg；每日一次；连续7天 实验结果：LMP2在体内受到抑制。用大鼠抗小鼠CD41血小板单克隆抗体免疫小鼠后，血小板计数没有显著改善。 在体内研究中，ML604440溶解于含有5%乙醇、10% PEG300、20% (w/v)磺丁基醚-β-环糊精水溶液和10 mM柠檬酸钠（pH 6）的溶剂中。皮下注射（sc）给药，剂量为15 mg/kg。 DSS诱导结肠炎模型：在8-10周龄小鼠的饮用水中添加3% DSS，持续5-7天，诱导结肠炎。小鼠每日分别接受赋形剂、ML604440（15 mg/kg，sc）、PRN1126（40 mg/kg，sc）或二者联合治疗。每日记录小鼠体重。在实验终点测量结肠长度。 实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE) 模型：C57BL/6 小鼠皮下注射 MOG35-55 肽（溶于 CFA）进行免疫，并在第 0 天腹腔注射百日咳毒素，第 2 天静脉注射。从免疫当天开始，小鼠间歇性（每周三次）接受赋形剂、ML604440（15 mg/kg，皮下注射）、PRN1126（40 mg/kg，皮下注射）或二者联合治疗。每日评估临床疾病评分。[2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
该研究指出，脾细胞与LMP2和LMP7抑制剂（包括ML604440）组合孵育过夜后，与对照组相比，细胞死亡（碘化丙啶阳性细胞）并未增加，表明在该特定检测中，所测试的浓度（300 nM）下不存在急性细胞毒性。[2]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
ML604440 是一种二肽硼酸酯抑制剂，被描述为选择性 LMP2 抑制剂。与环氧酮抑制剂 LU-001i 不同，ML604440 在蛋白质印迹分析中不会导致免疫蛋白酶体亚基条带向更高表观分子量方向移动，这可能是由于其可逆的结合机制所致。该研究表明，单独使用 ML604440 选择性抑制 LMP2 不足以降低 MHC-I 表面表达、抑制 IL-6 分泌、抑制 Th17 分化或改善小鼠结肠炎和 EAE 模型中的疾病症状。只有当ML604440与LMP7选择性抑制剂（PRN1126）联合使用时，才能产生协同效应，包括显著的治疗效果，这凸显了在自身免疫性疾病中，需要同时抑制LMP2和LMP7亚基才能发挥广泛的抗炎活性。[2]
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| 分子式 |
C17H24BF3N2O4
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|---|---|
| 分子量 |
388.189675331116
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| 精确质量 |
388.178
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| CAS号 |
1140517-08-3
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| PubChem CID |
57655545
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| 外观&性状 |
White to yellow solid powder
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| tPSA |
98.7
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
27
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| 分子复杂度/Complexity |
527
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
FC(C1C=CC=CC=1C(NC(C)(C)C(N[C@H](B(O)O)CC(C)C)=O)=O)(F)F
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| InChi Key |
IRZZVDHGNHGNAI-ZDUSSCGKSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H24BF3N2O4/c1-10(2)9-13(18(26)27)22-15(25)16(3,4)23-14(24)11-7-5-6-8-12(11)17(19,20)21/h5-8,10,13,26-27H,9H2,1-4H3,(H,22,25)(H,23,24)/t13-/m0/s1
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| 化学名 |
[(1R)-3-methyl-1-[[2-methyl-2-[[2-(trifluoromethyl)benzoyl]amino]propanoyl]amino]butyl]boronic acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~257.61 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.44 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.44 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.44 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5761 mL | 12.8803 mL | 25.7606 mL | |
| 5 mM | 0.5152 mL | 2.5761 mL | 5.1521 mL | |
| 10 mM | 0.2576 mL | 1.2880 mL | 2.5761 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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