| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MLS000544460 targets Eya2 phosphatase. Eya2 is a member of the Eyes Absent (Eya) family of proteins, which function as transcriptional co-activators and tyrosine phosphatases. Eya2 plays a critical role in various developmental processes, including organogenesis, and is also involved in cancer. Eya2 phosphatase activity is required for cell migration, and its overexpression has been linked to tumor metastasis. MLS000544460 is a highly selective and reversible inhibitor of Eya2 phosphatase. It binds to the Eya2 phosphatase domain with a Kd of 2.0 μM and inhibits its enzymatic activity with an IC₅₀ of 4 μM. The compound does not bind to Eya3 phosphatase, demonstrating its selectivity for Eya2. It is also ineffective against other tyrosine phosphatases, including Eya3 and PTP1B. The compound's binding to Eya2 is enhanced in the absence of Mg²⁺, indicating that this class of compounds does not require Mg²⁺ for its interaction with the Eya2 ED. By inhibiting Eya2 phosphatase, MLS000544460 can modulate cell migration and other Eya2-dependent processes.
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| 体外研究 (In Vitro) |
MLS000544460 不与 ED 或 Eya3 磷酸酶结合 [1]。在表达人 Eya2、Eya2 磷酸酶失活突变体 (D274N) 和 YFP（作为阴性对照）的 MCF10A 细胞中，MLS000544460 (10 μM) 可抑制 Eya2 介导的细胞迁移 [1]。这类化合物与 Eya2 ED 的相互作用不需要 Mg2+，这体现在用 10 μM EDTA 透析去除 Mg2+ 后，其与 MLS000544460 的亲和力显著增强 (Kd=0.80 μM) [1]。体外实验表明，MLS000544460 可抑制 Eya2 磷酸酶活性，IC50 为 4 μM，Kd 为 2.0 μM。该化合物不与Eya3磷酸酶结合，表明其对Eya2具有选择性。该化合物（10 μM）可抑制表达Eya2的人MCF10A细胞中Eya2介导的细胞迁移。这种抑制作用是Eya2介导的细胞迁移所特有的，因为该化合物不抑制表达Eya2磷酸酶失活突变体（D274N）的细胞或表达YFP的对照细胞的迁移。该化合物抑制Eya2介导的细胞迁移的能力与其作为Eya2磷酸酶抑制剂的作用相符。该化合物还具有抗癌活性，这可能是由于其抑制了参与肿瘤进展和转移的Eya2。该化合物对Eya2相对于其他磷酸酶的选择性使其成为研究Eya2在细胞迁移和癌症中具体作用的宝贵工具。
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| 体内研究 (In Vivo) |
现有文献中关于MLS000544460的详细体内活性数据报道并不多。然而，其体外抗癌活性以及抑制Eya2介导的细胞迁移的能力表明，它可能具有治疗体内癌症的潜力。Eya2在多种癌症中过度表达，且与预后不良相关。抑制Eya2磷酸酶活性可能有助于减少肿瘤生长和转移。该化合物对Eya2相对于其他磷酸酶的选择性表明其可能具有良好的安全性。然而，仍需开展体内研究，以评估其在动物癌症模型中的疗效和安全性。此外，还需要评估该化合物的药代动力学特性，例如口服生物利用度和组织分布。目前，MLS000544460主要用作体外研究的工具。
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| 酶活实验 |
MLS000544460 对 Eya2 磷酸酶的抑制作用通常采用磷酸酶活性测定法进行测定。该测定在 96 孔板中进行。反应混合物包含 50 mM Tris-HCl 缓冲液（pH 7.5）、50 mM NaCl、1 mM DTT、0.1 mg/mL BSA 和荧光底物，例如 6,8-二氟-4-甲基伞形酮磷酸酯 (DiFMUP)。底物被磷酸酶脱磷酸化，释放出荧光产物，并在激发波长 358 nm 和发射波长 450 nm 处进行测定。加入 Eya2 酶启动反应。监测荧光强度随时间的变化。计算每种化合物浓度下的抑制百分比，并以不含抑制剂的对照组为基准。IC₅₀ 值通过将数据拟合到四参数逻辑模型来确定。为了测定Kd值，可采用等温滴定量热法（ITC）或表面等离子共振（SPR）等结合分析方法。化合物对Eya2相对于其他磷酸酶（如Eya3和PTP1B）的选择性，则使用相同的磷酸酶分析方法，并分别针对相应的酶进行评估。
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| 细胞实验 |
对于体外细胞实验，通常使用划痕愈合实验或Transwell迁移实验来评估MLS000544460对细胞迁移的影响。在划痕愈合实验中，将表达Eya2的MCF10A细胞接种于6孔板中，培养至汇合。使用移液器吸头在细胞单层上划出伤口。然后用不同浓度（例如1-10 μM）的MLS000544460处理细胞。使用显微镜观察细胞向伤口区域的迁移情况。在不同时间点计算伤口愈合百分比。在Transwell迁移实验中，将细胞接种于含有多孔膜的Transwell小室的上室。下室含有趋化因子。在上室中加入MLS000544460处理细胞。孵育后，固定、染色并计数迁移至膜下侧的细胞。细胞迁移抑制率是相对于未处理的对照细胞计算的。这些检测方法可以衡量化合物抑制Eya2介导的细胞迁移的能力。
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| 动物实验 |
现有文献中关于MLS000544460的体内动物实验方案报道较少。通常，为了评估一种抑制细胞迁移并具有抗癌活性的化合物的体内疗效，会采用异种移植小鼠模型。在该研究中，将过表达Eya2的癌细胞注射到免疫缺陷小鼠体内。当肿瘤达到一定大小后，以不同剂量口服或腹腔注射MLS000544460。定期测量肿瘤体积，并记录最终肿瘤重量。同时评估转移灶的数量和大小。通过比较治疗组和对照组的肿瘤体积、重量和转移负荷，评估该化合物抑制肿瘤生长和转移的能力。通过测量肿瘤组织中Eya2底物的磷酸化状态，可以评估该化合物对体内Eya2磷酸酶活性的影响。这些研究将提供关于该化合物体内疗效和作用机制的关键数据。目前，尚未发表针对 MLS000544460 的此类详细的体内实验方案。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
现有文献中关于MLS000544460的药代动力学性质报道较少。该化合物分子量为341.36，可溶于DMSO（125 mg/mL）。其体内给药制剂包括DMSO、PEG300、Tween-80和生理盐水的组合，或DMSO和玉米油的组合。这些制剂表明该化合物的水溶性可能有限。目前尚未通过实验测定其具体的药代动力学参数，例如半衰期、分布容积、清除率和口服生物利用度。该化合物的代谢可能涉及肝细胞色素P450酶。其消除途径尚不清楚。需要进一步研究以全面表征该化合物的药代动力学特征。该化合物的体内活性取决于其能否以足够的浓度到达靶组织。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于 MLS000544460 是一种研究用化学品，其毒理学数据有限。处理该化合物时应遵守标准安全预防措施。目前尚未公开披露任何具体的毒性研究，例如动物模型中的急性或慢性毒性研究。该化合物对 Eya2 的选择性高于其他磷酸酶，这表明其脱靶效应的风险可能较低。然而，与所有研究用化学品一样，应谨慎处理，使用适当的个人防护装备并遵循机构安全指南。该化合物尚未获准用于临床，仅可用于临床前研究。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
MLS000544460 是一种用于研究 Eya2 磷酸酶在细胞迁移和癌症中作用的研究工具。其作用机制是选择性抑制 Eya2 磷酸酶。它对 Eya2 的 Kd 值为 2.0 μM，IC₅₀ 值为 4 μM。该药物尚未获准用于临床。
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| 分子式 |
C17H12FN3O2S
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|---|---|
| 分子量 |
341.3595
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| 精确质量 |
341.063
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| CAS号 |
352336-36-8
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| PubChem CID |
7285259
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
4
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| tPSA |
92.8
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
452
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
S(C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=N1)C1=C([H])C([H])=C(/C(/[H])=N/N([H])C(C2C([H])=C([H])C([H])=C(C=2[H])F)=O)O1
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| InChi Key |
VDKNIVFIPSLUFD-RGVLZGJSSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H12FN3O2S/c18-13-5-3-4-12(10-13)17(22)21-20-11-14-7-8-16(23-14)24-15-6-1-2-9-19-15/h1-11H,(H,21,22)/b20-11+
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| 化学名 |
3-fluoro-N-[(E)-(5-pyridin-2-ylsulfanylfuran-2-yl)methylideneamino]benzamide
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| 别名 |
MLS 000544460; MLS-000544460
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~125 mg/mL (~366.18 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.09 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.09 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9295 mL | 14.6473 mL | 29.2946 mL | |
| 5 mM | 0.5859 mL | 2.9295 mL | 5.8589 mL | |
| 10 mM | 0.2929 mL | 1.4647 mL | 2.9295 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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