Monochlorobimane

别名: 荧光探针
目录号: V29395 纯度: ≥98%
一氯代二甲醚(Chlorobimane)是一种荧光染料试剂(λex=380 nm,λem=470 nm),用于测量细胞中的谷胱甘肽(GSH)。
Monochlorobimane CAS号: 76421-73-3
产品类别: New1
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
25mg
100mg
250mg
500mg
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产品描述
单氯双马来酸(氯双马来酸)是一种荧光染料试剂(激发波长λex=380 nm,发射波长λem=470 nm),用于测定细胞内谷胱甘肽(GSH)的含量。
单氯双马来酸(CAS号:76421-73-3),又称氯双马来酸或mBCl,是一种可透过细胞膜的非荧光双马来酸衍生物,它能选择性地与巯基反应,形成高荧光加合物。其分子量为226.66,分子式为C10H11ClN2O2。它是一种用于测定细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)的荧光探针。
生物活性&实验参考方法
靶点
Monochlorobimane targets glutathione (GSH), a key intracellular antioxidant molecule. It reacts with GSH thiols to form a fluorescent adduct. It is used for detecting and quantifying intracellular glutathione levels. Once bound, it emits high fluorescence, allowing for the tracking of GSH distribution and activity in live cells.
体外研究 (In Vitro)
建议(我们建议的步骤如下。此方案应根据您的具体需求进行调整;它仅提供指导原则。)1. 设置实验孔和对照孔:实验应按此顺序设置平行阴性对照孔、阳性对照孔和实验孔。测试孔:加入 200 μL 含有适量 GSH 效应物(例如 200 μM H₂O₂)的细胞培养基。2. 将培养板置于 37°C、5% CO₂ 的培养箱中过夜。根据您的标准操作流程,孵育时间可能有所不同。3. 将 1 mM 工作液中的一氯二甲烷 (mBCl) 加入细胞中,使其最终浓度达到 20–100 μM。使用二甲基亚砜 (DMSO) 配制 50 mM 的 mBCl 储备液,并保存在 -20°C。使用前,将储备液用 0.1 M PBS 缓冲液 (pH 7.0) 稀释。在实验中,最终浓度为 20–100 μM。 DMSO浓度低于0.2% (v/v)。4. 将细胞悬液与mBCl在25°C避光孵育约两小时。5. 以700×g离心5分钟去除染料。向每个孔中加入200 μL检测缓冲液,然后进行您选择的检测方法。6. 细胞内GSH检测:荧光酶标仪可直接读取培养板上的荧光信号,适用于贴壁细胞。若使用悬浮细胞,则需取200 μL培养悬液加入白色不透明的酶标板中,并在激发/发射波长分别为380/465 ±20 nm处记录荧光(蓝色)。
体外实验中,单氯双胺是一种非荧光、可透过细胞膜的硫醇反应探针。它与谷胱甘肽(GSH)反应生成荧光加合物。它广泛用于测定细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)水平。它具有激发波长。激发波长 (λex) 为 380 nm,发射波长 (λem) 为 470 nm。
体内研究 (In Vivo)
单氯双胺不作为体内治疗药物使用。其用途仅限于体外作为荧光探针检测谷胱甘肽(GSH)。
酶活实验
体外单氯双胺检测包括将细胞与探针(通常为 1-100 µM)孵育 15-60 分钟。然后洗涤细胞,并使用荧光显微镜、流式细胞仪或荧光酶标仪测量荧光强度,激发波长为 380 nm,发射波长为 470 nm。荧光强度与细胞内 GSH 水平成正比。
细胞实验
单氯双胺的细胞检测采用多种细胞类型进行。将细胞与浓度为 1 至 100 µM 的探针孵育 15 至 60 分钟。洗涤后,通过流式细胞术或荧光显微镜测量荧光强度。该探针可用于研究氧化应激、药物处理或基因操作引起的 GSH 动态变化。
动物实验
单氯双胺不用于体内动物研究作为治疗剂。它可用于离体应用,以测量从动物研究中采集的组织中的谷胱甘肽(GSH)水平。
药代性质 (ADME/PK)
代谢/代谢物
单氯二马来酸的已知代谢物包括双马来酸-谷胱甘肽。
单氯双马来酸是一种荧光探针,不具备药物的药代动力学特性。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
单氯双胺是一种荧光探针,不宜供人食用。使用时应遵守标准实验室安全操作规程。
参考文献

[1]. Monochlorobimane fluorometric method to measure tissue glutathione. Anal Biochem. 2000 Nov 1;286(1):35-7.

[2]. Assessment of cellular reduced glutathione content in Pseudokirchneriella subcapitata using monochlorobimane. Journal of Applied Phycology volume 24, pages1509–1516(2012).

其他信息
一氯二马来酸是一种属于吡唑并吡唑类的有机氯化合物,可用作荧光染料。
一氯双马来酸 (mBCl) 是一种细胞可渗透的非荧光探针,可与谷胱甘肽 (GSH) 反应生成荧光加合物,用于测定细胞内 GSH 水平。其激发波长为 380 nm,发射波长为 470 nm,分子量为 226.66,分子式为 C10H11ClN2O2。它并非药物。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C10H11N2O2CL
分子量
226.65954
精确质量
226.051
CAS号
76421-73-3
PubChem CID
114886
外观&性状
Light yellow to yellow solid powder
密度
1.4g/cm3
沸点
314.9ºC at 760 mmHg
熔点
135-136ºC(lit.)
闪点
144.2ºC
折射率
1.61
LogP
0.861
tPSA
42.96
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
3
可旋转键数目(RBC)
1
重原子数目
15
分子复杂度/Complexity
437
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
SUIPVTCEECPFIB-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C10H11ClN2O2/c1-5-7(3)12-8(4-11)6(2)10(15)13(12)9(5)14/h4H2,1-3H3
化学名
7-(chloromethyl)-1,2,6-trimethylpyrazolo[1,2-a]pyrazole-3,5-dione
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~50 mg/mL (~220.59 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (11.03 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (11.03 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 4.4119 mL 22.0595 mL 44.1189 mL
5 mM 0.8824 mL 4.4119 mL 8.8238 mL
10 mM 0.4412 mL 2.2059 mL 4.4119 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们