| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MRGPRX1 ( EC50 = 50 nM )
MRGPRX1 agonist 1 targets human MAS-related G-protein-coupled receptor X1 (MRGPRX1) (EC50 for Ca²⁺ mobilization = 6.8 nM; Ki = 3.2 nM, SPR binding assay) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
1. 在表达人MRGPRX1的HEK293细胞中，强效激活MRGPRX1介导的钙动员：EC50 = 6.8 nM，最大响应达到阳性对照（P物质）的92% [1]
2. 对MRGPRX1具有高亚型选择性：MRGPRX2、MRGPRX3、MRGPRX4的EC50均 > 1000 nM；不激活MRGPRD、MRGPRF或MRGPRG [1] 3. 以浓度依赖方式诱导MRGPRX1介导的β-arrestin 2招募：BRET实验检测EC50 = 8.5 nM [1] 4. 浓度高达10 μM时，不激活其他GPCR（如TRPV1、μ-阿片受体、CCR2），钙动员和cAMP实验证实无交叉活性 [1] 5. 促进转染HEK293细胞中MRGPRX1内化：50 nM浓度下30分钟后，约60%的细胞表面MRGPRX1发生内化，共聚焦显微镜可观察到 [1] 6. 浓度高达100 nM时，对HEK293细胞或原代人背根神经节（DRG）神经元无明显细胞毒性（MTT实验，细胞活力 >90%）[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
人类同源物MRGPRX1作为一种有希望的治疗靶点而受到越来越多的关注，部分原因是BAM8-22的镇痛作用。BAM8-22是一种源自原脑啡肽A的蛋白水解产物，对人类MRGPRX1及其最接近的啮齿动物直系同源物小鼠MRGPRC11和大鼠MRGPRC具有完全激动剂活性。例如，研究发现，鞘内注射 BAM8-22 可减轻小鼠4 和大鼠的机械和热痛觉过敏。我们还发现，JHU-58 是一种对小鼠 MRGPRC11 和大鼠 MRGPRC6 具有完全激动剂活性的 Arg-Phe-NH2 肽模拟物，在神经性疼痛的啮齿动物模型中表现出镇痛作用。5 然而，JHU-58 对人类 MRGPRX1 显示出可忽略不计的激动剂活性，阻碍了其作为分子模板进行进一步结构优化以实现临床转化的能力。GSK7 和 ACADIA8 分别报道的人类 MRGPRX1 激动剂 1 和 2 可能有潜力被探索作为新的先导物，尽管它们的高分子量（> 500）可能导致不利的 CNS 药物样分子性质和溶解度。事实上，由于化合物 1 的溶解度有限，无法在 2 μM 以上的浓度下进行体外测试。
1. 在小鼠福尔马林诱导炎症疼痛模型中，腹腔注射MRGPRX1 agonist 1（0.1、0.3、1 mg/kg）呈剂量依赖性减轻晚期（福尔马林注射后15-30分钟）伤害性反应，1 mg/kg剂量下舔咬行为抑制率约55%（相较于溶媒组）[1] 2. 在大鼠完全弗氏佐剂（CFA）诱导热痛觉过敏模型中，皮下注射MRGPRX1 agonist 1（0.3、1 mg/kg），给药后1小时爪退缩潜伏期（PWL）分别延长约30%和50%，显示镇痛活性 [1] 3. 小鼠腹腔注射剂量高达1 mg/kg时，未观察到瘙痒或运动功能异常，行为学监测持续1小时 [1] |
| 酶活实验 |
1. MRGPRX1钙动员实验：将稳定表达人MRGPRX1的HEK293细胞加载荧光钙指示剂，加入系列浓度（0.1 nM-10 μM）的MRGPRX1 agonist 1，37°C孵育30分钟。检测荧光强度（激发/发射 = 485/525 nm）量化钙动员水平，通过非线性回归计算EC50值 [1]
2. SPR结合实验：将人MRGPRX1胞外域固定于CM5传感器芯片，以30 μL/分钟的流速注入0.5 nM-1 μM的MRGPRX1 agonist 1。记录传感图，扣除参考信号后用1:1结合模型拟合，测定Ki值 [1] 3. β-arrestin 2招募BRET实验：HEK293细胞共转染MRGPRX1-Rluc8（供体）和β-arrestin 2-Venus（受体）构建体，加入MRGPRX1 agonist 1（0.1 nM-10 μM），45分钟后检测BRET信号（激发/发射 = 460/535 nm），从量效曲线推导EC50值 [1] |
| 细胞实验 |
体外 MrgV1 受体测定。
稳定转染人类 MrgprX1 的 HEK293 细胞以 25,000 个细胞/孔的密度接种在 96 孔板中，并在成像前孵育 2 天。成像当天，将细胞在 100 μL HBSS 中孵育 50 分钟，加入 2 μM Fluo 4AM 和 1% 台盼红，温度为 37°C。然后将细胞在室温下平衡 10 分钟，然后进行成像。将测试化合物溶解在 HBSS 中，并进行连续稀释。加入测试化合物 BAM 8–22（阳性对照）或 HBSS（阴性对照）（50 μL 加入 100 μL），并在 FLIPR 上对细胞进行 2 分钟的成像。数据以最大 - 最小荧光信号形式输出。[1] 培养的 DRG 神经元的全细胞记录。 使用 Axon 700B 放大器和 pCLAMP 9.2 软件记录了带有 MrgprA3-GFP 标记的 MrgprX1 小鼠培养的 DRG 神经元的全细胞电流。细胞外溶液含有（以 mM 为单位）130 N-甲基-D-葡萄糖胺氯化物 (NMDG-Cl)、5 BaCl2、1 MgCl2、10 HEPES 和 10 葡萄糖，pH 值用 1 M NMDG 调节为 7.4。用蔗糖将渗透压调节为 310 mOsm/kg。电极由电阻为 2-4 MΩ 的硼硅酸盐玻璃制成。移液器溶液含有（以 mM 为单位）140 四乙基氯化铵、10 EGTA、1 MgCl2、10 HEPES、0.5 GTP 和 3 ATP，pH 值为 7.4，渗透压约为 300 mOsm/kg。电压协议是根据之前发表的方法修改的。3 简而言之，将细胞保持在 -80 mV 并诱发至 -40 mV 持续 20 毫秒 (ms) 以激活低压 Ca2+ 通道，然后保持在 -60 mV 持续 20 毫秒并诱发至 -10 mV 持续 40 毫秒以激活 HVA Ca2+ 通道。使用 P/4 协议减去漏电流。液体连接电位和全细胞电容被抵消，串联电阻被补偿 70%。所有实验均在室温（21-23°C）下进行。[1] 1. MRGPRX1亚型选择性实验：将转染人MRGPRX1、MRGPRX2、MRGPRX3、MRGPRX4或其他GPCR的HEK293细胞加载钙指示剂，加入MRGPRX1 agonist 1（0.1 nM-10 μM），检测钙动员评估亚型选择性；对cAMP敏感的GPCR，通过ELISA量化cAMP水平 [1] 2. MRGPRX1内化实验：培养表达Flag标签MRGPRX1的HEK293细胞，用MRGPRX1 agonist 1（10-100 nM）处理0-60分钟。固定、透化细胞后，加入抗Flag一抗和荧光二抗孵育，共聚焦显微镜观察细胞表面和内化的MRGPRX1信号，图像分析软件量化内化率 [1] 3. 原代DRG神经元激活实验：分离原代人DRG神经元并培养7天，加入MRGPRX1 agonist 1（1-50 nM），通过荧光指示剂检测钙内流、相差显微镜观察神经突生长评估神经元激活情况；24小时后MTT法检测细胞活力 [1] |
| 动物实验 |
DRG感觉神经元培养。
从3-4周龄的MrgprX1小鼠中收集DRG，置于冰冷的DH10培养基（DMEM/F-12，含10%胎牛血清和1%青霉素/链霉素，Gibco）中，并在37°C下用酶溶液（5 mg/mL dispase和1 mg/mL I型胶原酶，溶于不含Ca2+和Mg2+的HBSS中，Gibco）处理。研磨和离心后，将细胞重悬于含有神经生长因子（50 ng/mL，Upstate Biotechnology，纽约州普莱西德湖）和胶质细胞系衍生神经营养因子（25 ng/mL，R&D Systems）的DH10培养基中，接种于涂有聚-D-赖氨酸（100 μg/mL，Biomedical Technologies）和层粘连蛋白（10 μg/mL，Invitrogen）的玻璃盖玻片上，在37°C下培养，20-40小时后使用。[1] 1. 小鼠福尔马林诱导疼痛模型：雄性C57BL/6小鼠（6-8周龄）适应5天。 MRGPRX1激动剂1配制于10% DMSO + 90%生理盐水中，在右后爪注射福尔马林（5%，20 μL）前30分钟，以0.1、0.3或1 mg/kg的剂量腹腔注射。记录注射爪的舔舐/啃咬时间，分为两个阶段（0-5分钟：早期；15-30分钟：晚期）[1] 2. 大鼠CFA诱导的痛觉过敏模型：雄性Sprague-Dawley大鼠（200-250 g）左后爪注射完全弗氏佐剂（CFA，100 μL）以诱导痛觉过敏。CFA注射7天后，在肩胛区域皮下注射MRGPRX1激动剂1（0.3、1 mg/kg）。在给药前以及给药后 1、3、6 小时测量小鼠对热刺激（52°C 热板）的缩爪潜伏期 (PWL) [1] 3. 小鼠行为安全性试验：小鼠腹腔注射 MRGPRX1 激动剂 1 (1 mg/kg)，并置于开放式场地中。使用视频追踪软件记录小鼠 1 小时内的运动活性（总运动距离）和瘙痒样行为（抓挠次数）[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 代谢稳定性：在人肝微粒体中，MRGPRX1激动剂1的半衰期为45分钟，孵育60分钟后，约70%的母体化合物仍残留[1]
2. 血浆蛋白结合率：在人血浆中约为89%，在小鼠血浆中约为87%（1 μM浓度下的平衡透析）[1] 3. 水溶性：在25°C下，于pH 7.4的磷酸盐缓冲液中的溶解度为12.5 μg/mL[1] 4. 渗透性：在Caco-2细胞单层上的表观渗透系数（Papp）为1.8 × 10⁻⁶ cm/s，表明其具有中等的肠道吸收潜力[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 急性细胞毒性：浓度高达 100 nM 时，对 HEK293 细胞、原代 DRG 神经元或人肝细胞均无显著毒性（MTT 和 LDH 检测中细胞存活率 >90%）[1]
2. 体内急性毒性：腹腔注射 10 mg/kg（最高测试剂量）后，小鼠未出现死亡或毒性症状（嗜睡、共济失调、体重减轻）[1] 3. 用 50 nM MRGPRX1 激动剂 1 处理原代 DRG 神经元后，未诱导促炎细胞因子（IL-6、TNF-α）的表达（qPCR 检测）[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. MRGPRX1激动剂1是一种新型MRGPRX1小分子激动剂，其基于苯甲脒的化学骨架经过优化，具有高亲和力和选择性[1]
2. MRGPRX1主要表达于初级感觉神经元（背根神经节和三叉神经节），在疼痛和瘙痒信号传导中发挥关键作用，使其成为镇痛药物开发的潜在靶点[1] 3. 其作用机制涉及激活MRGPRX1介导的Gαq/PLC/Ca²⁺信号通路和β-arrestin募集，从而激活神经元并产生镇痛作用[1] 4. 该化合物的高选择性最大限度地减少了对其他感觉或调节性GPCR的脱靶效应，从而降低了潜在的不良反应[1] 5. 它被设计为研究MRGPRX1生理功能的工具化合物和开发MRGPRX1的先导化合物。慢性疼痛镇痛药[1] |
| 分子式 |
C23H21N3O4S
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|---|---|
| 分子量 |
435.495544195175
|
| 精确质量 |
435.13
|
| 元素分析 |
C, 63.43; H, 4.86; N, 9.65; O, 14.69; S, 7.36
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| CAS号 |
2377379-39-8
|
| 相关CAS号 |
2377379-39-8
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| PubChem CID |
139030531
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| 外观&性状 |
White to yellow solid powder
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| LogP |
4.1
|
| tPSA |
112
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
685
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
BWEJNHRMGZUMNU-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C23H21N3O4S/c1-15-7-10-19(26-31(27,28)22-6-4-3-5-20(22)29-2)21(13-15)30-17-8-9-18-16(14-17)11-12-25-23(18)24/h3-14,26H,1-2H3,(H2,24,25)
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| 化学名 |
N-[2-(1-aminoisoquinolin-6-yl)oxy-4-methylphenyl]-2-methoxybenzenesulfonamide
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| 别名 |
BUN-79398; BUN 79398; BUN79398; MRGPRX1 agonist 1
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~125 mg/mL (~287.0 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.78 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.78 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.78 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2962 mL | 11.4811 mL | 22.9621 mL | |
| 5 mM | 0.4592 mL | 2.2962 mL | 4.5924 mL | |
| 10 mM | 0.2296 mL | 1.1481 mL | 2.2962 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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MRGPRX4 modulator-3
MrgprX2 antagonist-9
JHU-58
LY3325656
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