| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
FLT3 (IC50 = 0.64 nM); MERTK (IC50 = 1.3 nM)
MRX-2843 is a potent dual inhibitor of Mer tyrosine kinase (MERTK) and FMS-like tyrosine kinase 3 (FLT3). In enzymatic assays, its IC50 is 1.3 nM for MERTK and 0.64 nM for FLT3. It shows selectivity over other TAM family kinases (AXL and TYRO-3) and other relevant tyrosine kinases, as detailed in Supplemental Table 1. It also retains inhibitory activity against clinically relevant FLT3-ITD mutant proteins with point mutations at D835 (e.g., D835Y, IC50 = 7.2 ± 1.3 nM in BA/F3 cells) and F691 (e.g., F691L, IC50 = 20.4 ± 4.3 nM in BA/F3 cells). |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在 Kasumi-1 细胞系中，用 MRX-2843 处理会导致 MERTK 磷酸化的剂量依赖性抑制。在浓度低至 10 nM 时，磷酸化作用明显降低，在 100 至 300 nM 时，MERTK 激活几乎完全消失。同样，用 MRX-2843 处理 Kasumi-1 细胞可通过对肿瘤细胞存活和增殖重要的途径介导下游信号传导的抑制。 MRX-2843治疗导致相对细胞数减少，IC50为143.5±14.1 nM，表明MRX-2843显着抑制肿瘤细胞增殖和/或存活。同样，在用 150 nM 或 300 nM MRX-2843 处理的 NOMO-1 培养物中，分别有 34.1%±5.6% 和 67.1%±2.7% 的凋亡和死亡细胞，而在用媒介物处理的培养物中，凋亡和死亡细胞的比例为 6.8%±0.7%（ P<0.001）。在 Kasumi-1 培养物中，用 50 nM 和 100 nM MRX-2843 处理分别可抑制 62.3%±6.4% 和 84.1%±7.8% 的集落形成（P<0.01）。同样，在 NOMO-1 培养物中，100 nM MRX-2843 处理后集落形成被抑制 54.8%±18.1%（P<0.001）。在 MOLM-14 细胞中，MRX-2843 处理可抑制 FLT3 的磷酸化以及通过 STAT5、ERK1/2 和 AKT 的下游信号传导。使用 50 nM MRX-2843 处理后，FLT3 及其信号通路的激活几乎完全消除，表明相对于 MERTK，针对 FLT3 的细胞效力略高[1]。
MRX-2843 在AML细胞系（Kasumi-1、NOMO-1、MOLM-14、MV4-11）中能剂量依赖性地抑制MERTK和FLT3的磷酸化及其下游信号通路（STAT6、STAT5、AKT、ERK1/2），起效浓度可低至10-50 nM。 它抑制细胞增殖/克隆扩增，在Kasumi-1（MERTK依赖）细胞中的IC50为143.5 ± 14.1 nM，在MOLM-14（FLT3-ITD依赖）细胞中为29.5 ± 3.4 nM。 它能剂量依赖性地诱导细胞凋亡，例如在150 nM浓度下，诱导Kasumi-1细胞51.9% ± 12.4%的凋亡/死亡细胞，诱导MOLM-14细胞91.0% ± 2.7%的凋亡/死亡细胞。 在软琼脂集落形成实验中，它在25-100 nM浓度范围内几乎完全抑制多种AML细胞系的集落形成。 在原代AML患者样本（MERTK阳性，伴或不伴FLT3-ITD）中，MRX-2843 能强效抑制甲基纤维素中的集落形成，5 nM即有效，50 nM几乎完全抑制，而对正常人脐带血单个核细胞在高达500 nM浓度下影响甚微。 它对quizartinib耐药的FLT3-ITD突变细胞系（MOLM-14:D835Y和MOLM-14:F691L）保留强效活性，能抑制其增殖、信号传导和集落形成，而quizartinib则失去活性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
MRX-2843 在 3 mg/kg 剂量下的口服生物利用度为 78%，Cmax 为 1.3 μM，t1/2 为 4.4 小时。在 MOLM-14 亲代异种移植物中，与媒介物治疗的小鼠相比，quizartinib 和 MRX-2843 均增加了中位生存期（分别为 172.5 天与 40 天和 121 天与 36 天，P<0.001）。在此模型中，quizartinib 比 MRX-2843 更有效（P<0.005），尽管没有评估更高剂量的 MRX-2843。在 MOLM-14:D835Y 异种移植物中，与媒介物治疗的小鼠相比，quizartinib 延长了生存期，但效果很小（中位生存期 45 天与 36 天，P<0.001）。在 MOLM-14:F691L 异种移植物中，MRX-2843 治疗使 NSG 和 NSGS 小鼠的生存期延长了近 2 倍（中位生存期分别为 87 天与 44.5 天和 87 天与 48 天，P<0.005）。与 quizartinib 相比，MRX-2843 治疗的存活率有所增加，但差异仅在 NSG 小鼠中显着[1]。
在NOD-SCID-γ (NSG) 或NSGS小鼠的异位移植瘤模型中，每日一次口服MRX-2843 能显著延长生存期。 在NOMO-1（MERTK依赖）移植瘤中，65 mg/kg/天的MRX-2843 将中位生存期从对照组的37天延长至51天。 在MOLM-14（FLT3-ITD）移植瘤中，50 mg/kg/天将中位生存期从38天延长至126天。 在AML患者来源的异种移植（PDX）模型中，MRX-2843（30-75 mg/kg/天）能显著延长生存期并降低外周疾病负荷。 在quizartinib耐药的FLT3-ITD突变移植瘤模型（MOLM-14:D835Y和MOLM-14:F691L）中，MRX-2843（50 mg/kg/天）能显著延长生存期，而quizartinib疗效甚微或降低。 |
| 酶活实验 |
如前所述合成MRX-2843和对照TKI（20）。如前所述，使用Michaelis-Menton动力学方程估算体内90%抑制所需的激酶抑制剂的量。奎扎替尼（AC220）与羟基丁烯基-β-环糊精（CD）的比例为1:4。对于体外研究，在DMSO中制备储备溶液，DMSO载体对照浓度相当于实验中最高剂量的测试试剂。对于体内研究，试验药物要么溶解（MRX-2843），要么在生理盐水中制备成均匀的悬浮液（喹扎替尼和CD）[1]。
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| 细胞实验 |
细胞系在 0.35% Noble 琼脂基础层上的 0.35% Noble 琼脂中培养（10,000 个细胞/样品），并用含有激酶抑制剂（包括 MRX-2843）或载体的 cRPMI 覆盖。每周更换上层培养基 2 至 3 次，并重复评估载体处理。 14 天或 21 天后（仅限 Kasumi-1 细胞），将菌落用 1 mg/mL 硝基四唑蓝染色 4 小时，并使用菌落计数器进行计数。单核细胞是从人类脐带血和急性髓系白血病 (AML) 患者的样本中分离出来的。将患者样本以 1×106 个细胞/mL 的密度一式三份地在含有 MRX-2843 或载体的 MethoCult H4434 经典甲基纤维素培养基以及人类细胞重组细胞因子中培养。 10 天后使用菌落计数器对菌落进行计数。脐带血细胞在补充有 BIT 9500 血清替代品、低密度脂蛋白和 2-ME 的无血清 Iscove's 改良 Dulbecco 培养基 (IMDM) 中孵育 1 小时，然后以 2×106 个细胞/的密度一式三份培养。 mL 的 Methocult H4434 甲基纤维素溶液，含有 MRX-2843 或载体。 14 天后以盲法对菌落进行手动计数[1]。
下游信号免疫印迹分析：指数生长期的细胞与溶剂、对照TKI或MRX-2843 培养1.5小时。制备细胞裂解液，定量蛋白，经SDS-PAGE分离后转膜，用针对信号蛋白（STAT5、STAT6、AKT、ERK1/2）磷酸化和总形式的特异性抗体进行检测。以Actin作为上样对照。使用化学发光法检测。 MERTK或FLT3磷酸化分析：处理类似，但在裂解前加入过钒酸盐磷酸酶抑制剂以稳定磷酸化蛋白。裂解液用抗MERTK或抗FLT3抗体进行免疫沉淀，然后用磷酸化特异性抗体和总蛋白抗体进行免疫印迹。 克隆扩增测定：细胞与测试药物培养48小时，然后使用基于化学发光法的ATP测定（指示活细胞数）来评估细胞活力。 凋亡测定：细胞与药物培养72小时，然后用YO-PRO-1碘化物和碘化丙啶染色，通过流式细胞术分析。 细胞系集落形成实验：细胞在软琼脂中培养，上覆含测试药物的培养基，培养14-21天后，对集落进行染色和计数。 原代患者样本或脐带血集落形成实验：分离单个核细胞，在含测试药物的甲基纤维素培养基中培养10-14天，然后计数集落。 |
| 动物实验 |
小鼠异种移植模型。[1]
NOD.Cg-PrkdcscidIl2rgtm1WjlTg(CMV-IL3,CSF2,KITLG)1Eav/MloySzJ (NSGS) 小鼠和 NOD.Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wj1/SzJ (NSG) 小鼠购自杰克逊实验室 (The Jackson Laboratory) 或由本实验室自行繁殖并在无菌条件下饲养。将已建立的白血病细胞系或从急性髓系白血病 (AML) 患者样本中分离的单核细胞（每只小鼠 1 × 10⁶ 至 2.5 × 10⁶ 个细胞）悬浮于 PBS 缓冲液中，并注射到 NSG 或 NSGS 小鼠的尾静脉，以建立异种移植模型。除NOMO-1、MOLM-14:D835Y和MOLM-14:F691L NSG异种移植瘤在雌性小鼠中建立外，所有小鼠在注射时均为4-6月龄雄性。使用FITC标记的抗人CD45抗体染色后，在外周血（患者来源的异种移植瘤）或骨髓（MOLM-14异种移植瘤）样本中检测到髓母细胞。使用Gallios流式细胞仪和Kaluza软件进行流式细胞术分析。移植后，称量小鼠体重，并每日一次通过灌胃给予MRX-2843、quizartinib或载体，剂量为10 ml/kg。当小鼠出现疾病症状或体重下降超过20%时，对其进行安乐死。 Mertk基因敲除（B6;129-Mertktm1Grl/J）小鼠与C57BL/6J小鼠回交超过12代（Mertk–/–），并在使用前验证了Mertk基因型。野生型C57BL/6J和NSG小鼠购自杰克逊实验室，并在本实验室进行繁殖。由于Mertk–/–小鼠在6月龄后可能出现自身免疫性疾病，因此本研究使用2-4月龄的幼鼠。表达GFP的Arf基因敲除（Arf–/–）BCR-ABL p185+小鼠急性淋巴细胞白血病（ALL）细胞经尾静脉注射，并在移植后1天或5天开始通过灌胃给予MRX-2843或载体。患有晚期白血病（体重减轻超过20%，呼吸急促，后肢瘫痪，活动极度减少）的小鼠被实施安乐死，并监测其存活情况。或者，当小鼠出现白血病症状时（移植后17-39天），将其及其同笼小鼠（每个治疗组1只）实施安乐死，并采集骨髓和脾脏进行流式细胞术分析。使用 LSR II 流式细胞仪定量白血病负荷和免疫细胞浸润，并使用 FlowJo X 版软件进行分析。[2] 对于原位异种移植模型，将已建立的白血病细胞系（例如 NOMO-1、MOLM-14 或其突变体）或来自原发性 AML 患者样本的单核细胞悬浮于 PBS 中，并注射到表达转基因人细胞因子的 NSG 或 NOD-SCID-γ 小鼠（NSGS 小鼠）的尾静脉中。 MRX-2843 溶解于生理盐水中。Quizartinib 用羟基丁烯基-β-环糊精配制成生理盐水均质悬浮液。 药物或载体每日一次通过灌胃给药，剂量为 10 ml/kg。移植成功后（例如移植后 21-53 天），当骨髓或外周血中检测到一定比例的原始细胞时，即可开始治疗。 使用的剂量：MRX-2843 为 30、50、65 或 75 mg/kg/天；quizartinib 为 10 mg/kg/天。 监测小鼠的存活率、体重和外周/血液疾病负荷（通过流式细胞术检测人 CD45+ 细胞）。治疗持续至指定时间（最长 140-145 天）或直至小鼠符合安乐死标准（出现疾病症状或体重下降超过 20%）。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在小鼠中，MRX-2843 的口服生物利用度为 78%（剂量为 3 mg/kg）。最大血浆浓度 (Cmax) 为 1.3 μM，半衰期 (t1/2) 为 4.4 小时。在血浆抑制试验中，MRX-2843 在人血浆中仍保持活性，效力变化极小。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在小鼠中，每日口服MRX-2843长达120天，耐受性良好，研究中未报告明显的体重减轻。MRX-2843对原发性急性髓系白血病（AML）原始细胞和正常人脐带血单核细胞的集落形成能力具有10倍的差异，表明其具有较大的治疗窗口和对白血病细胞的选择性毒性。与某些FLT3抑制剂相比，MRX-2843对c-KIT的活性降低，可能减轻相关的骨髓抑制。
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| 参考文献 |
[2]. MERTK inhibition alters the PD-1 axis and promotes anti-leukemia immunity. JCI Insight . 2018 Nov 2;3(21):e97941.
[3]. MERTK activation drives osimertinib resistance in EGFR-mutant non-small cell lung cancer. J Clin Invest . 2022 Aug 1;132(15):e150517. |
| 其他信息 |
Flt3/MerTK抑制剂MRX-2843是一种口服生物利用度高的受体酪氨酸激酶（RTK）抑制剂，可抑制两种RTK：FMS样酪氨酸激酶3（Flt3；CD135；胎肝激酶2；Flk2）和酪氨酸蛋白激酶Mer（MerTK；原癌基因c-Mer；Mer），具有潜在的抗肿瘤活性。给药后，MRX-2843靶向并结合Flt3和MerTK。这可阻止Flt3和MerTK的配体依赖性磷酸化和激活，从而抑制其下游信号通路的激活。这可诱导Flt3和/或MerTK过表达的肿瘤细胞凋亡并抑制其增殖。 FLT3 和 MerTK 在某些肿瘤细胞类型中过度表达，并在肿瘤细胞增殖和存活中发挥关键作用。
MRX-2843 是一种口服的 ATP 竞争性 I 型酪氨酸激酶抑制剂。 它的研发旨在克服以往抑制剂的局限性，特别是高效靶向 MERTK 和 FLT3，并保持对在 quizartinib 等抑制剂治疗下出现的耐药性 FLT3 突变（D835 和 F691）的活性。 作为 I 型抑制剂，其结合模式使其对 FLT3 的活性构象（“DFG-in”）和非活性构象（“DFG-out”）均具有同等效力，从而有助于其对抗激活环突变体（如 D835Y）的活性。 双重抑制 MERTK（在 80-90% 的 AML 中过度表达）和 FLT3（在 20-30% 的 AML 中发生突变）该化合物被认为是一种有前景的治疗策略，适用于多种急性髓系白血病（AML）患者，有望延缓耐药性的产生并提高疗效。 该化合物已在多种临床前模型中得到验证，支持其在AML治疗中的临床开发。 |
| 分子式 |
C29H40N6O
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|---|---|
| 分子量 |
488.6675
|
| 精确质量 |
488.326
|
| 元素分析 |
C, 71.28; H, 8.25; N, 17.20; O, 3.27
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| CAS号 |
1429882-07-4
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| 相关CAS号 |
1429882-07-4;
|
| PubChem CID |
89495685
|
| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
697.3±65.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
375.5±34.3 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±2.3 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.696
|
| LogP |
2.92
|
| tPSA |
69.4Ų
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
8
|
| 重原子数目 |
36
|
| 分子复杂度/Complexity |
681
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
OC1CCC(CC1)N1C=C(C2C=CC(=CC=2)CN2CCN(C)CC2)C2=CN=C(N=C12)NCCC1CC1
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| InChi Key |
LBEJYFVJIPQSNX-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C29H40N6O/c1-33-14-16-34(17-15-33)19-22-4-6-23(7-5-22)27-20-35(24-8-10-25(36)11-9-24)28-26(27)18-31-29(32-28)30-13-12-21-2-3-21/h4-7,18,20-21,24-25,36H,2-3,8-17,19H2,1H3,(H,30,31,32)
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| 化学名 |
4-[2-(2-cyclopropylethylamino)-5-[4-[(4-methylpiperazin-1-yl)methyl]phenyl]pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyclohexan-1-ol
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| 别名 |
MRX-2843; UNC 2371; UNC2371A; UNC-2371; UNC-2371A; MRX2843; UNC2371; UNC 2371A; UNC-2371A; 2MT30EHI63; UNII-2MT30EHI63; CHEMBL3326007; Cyclohexanol, 4-(2-((2-cyclopropylethyl)amino)-5-(4-((4-methyl-1-piperazinyl)methyl)phenyl)-7H-pyrrolo(2,3-d)pyrimidin-7-yl)-, trans-; trans-4-(2-((2-Cyclopropylethyl)amino)-5-(4-((4-methyl-1-piperazinyl)methyl)phenyl)-7H-pyrrolo(2,3-d)pyrimidin-7-yl)cyclohexanol; MRX 2843
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 20~98 mg/mL (200.5 mM)
Ethanol: ~25 mg/mL (51.2 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.26 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 配方 2 中的溶解度: 2 mg/mL (4.09 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.0 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL 生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: 2 mg/mL (4.09 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0464 mL | 10.2319 mL | 20.4637 mL | |
| 5 mM | 0.4093 mL | 2.0464 mL | 4.0927 mL | |
| 10 mM | 0.2046 mL | 1.0232 mL | 2.0464 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT03510104 | Active Recruiting |
Drug: MRX-2843 | Neoplasms Metastatic Cancer |
Meryx, Inc. | May 22, 2018 | Phase 1 |
| NCT04762199 | Recruiting | Drug: Flt3/MerTK Inhibitor MRX-2843 Drug: Osimertinib |
Advanced Lung Non-Small Cell Carcinoma Metastatic Lung Non-Small Cell Carcinoma |
Emory University | February 24, 2021 | Phase 1 |
| NCT04872478 | Recruiting | Drug: MRX-2843 | Acute Lymphoblastic Leukemia Acute Myeloid Leukemia |
Meryx, Inc. | April 1, 2022 | Phase 1 |
| NCT04946890 | Not yet recruiting | Drug: MRX-2843 | Acute Myeloid Leukemia Leukemia | Betta Pharmaceuticals Co., Ltd. | July 1, 2021 | Phase 1 Phase 2 |
 MRX-2843 inhibits MERTK activation and downstream signaling and has functional antitumor effects in MERTK+FLT3-WT cell culture and animal models.JCI Insight.2016 Mar;1(3):e85630. |
|---|
 MRX-2843 inhibits FLT3 activation and downstream signaling and has functional antitumor effects in MERTKnegFLT3-ITD cell lines.JCI Insight.2016 Mar;1(3):e85630. |
 MRX-2843 inhibits colony formation in MERTK-expressing and FLT3-ITD primary AML patient samples.JCI Insight.2016 Mar;1(3):e85630. |
HSK205
FLT3-IN-22
FLT3-IN-23
PLM-101
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