| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 500mg |
|
||
| 1g |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
- TEAD1, TEAD2, TEAD3, TEAD4 (pan-TEAD inhibitor)[2]
- IC50 values in TR-FRET biochemical assays for TEAD1-4 are: 15 ± 5 nM, 17 ± 1 nM, 26 ± 12 nM, 21 ± 15 nM, respectively[2]
- Cellular TEAD transcriptional activity (NCI-H226 reporter assay): EC50 of 17 ± 5 nM[2]
TEAD1, TEAD3, TEAD4. MYF-03-176 acts by covalently binding to the palmitate-binding pocket of TEAD proteins, thereby blocking the interaction between YAP and TEAD and inhibiting downstream Hippo signaling pathway-mediated gene expression. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
抗增殖活性：MYF-03-176在多种TEAD依赖性癌细胞系中表现出强效的抗增殖作用。在NCI-H226（NF2缺陷型间皮瘤）细胞中，5天增殖实验后IC50值为24 nM[2]。另一项研究表明，在NCI-H226细胞中，IC50值为16 nM[1]。此外，它还能有效抑制脂肪肉瘤细胞（例如94T778）和胆管癌细胞（例如HuCCT1）的增殖[1]。- 抑制TEAD转录活性：在利用NCI-H226细胞进行的TEAD荧光素酶报告基因检测中，MYF-03-176处理72小时后，以11 nM的IC50值抑制YAP-TEAD转录活性。该化合物的效力是母体化合物MYF-03-69的3倍（IC50=45 nM）[1]。 - 下游基因表达的调控：MYF-03-176显著下调YAP/TEAD靶基因（例如CTGF、CYR61、ANKRD1）的表达，并上调促凋亡基因BMF[1]。 - 克服KRAS抑制剂耐药性：在多种耐药的KRAS G12C突变型（例如H2030、SW1573、KYSE410）和KRAS G12D突变型（例如HPAFII、PANC1、SW1990）癌细胞中，MYF-03-176与KRAS抑制剂（例如AMG510、MRTX1133）联合使用显示出协同效应，显著增强了KRAS抑制剂的抗增殖活性。从机制上讲，它通过抑制YAP/TAZ/TEAD轴逆转耐药性，导致促凋亡蛋白（BCL2L11、PUMA）表达上调和SLC7A5表达下调[3]。
MYF-03-176 能以 11 nM 的 IC50 值抑制 NCI-H226 细胞中的 TEAD 转录活性，并在 5 天内以 9 nM 的 IC50 值抑制细胞生长。它能显著下调 YAP 靶基因（包括 CTGF、CYR61 和 ANKRD1）的表达，同时上调 BMF 的表达。与 KRAS G12C 和 G12D 抑制剂联用时，MYF-03-176 在多种细胞系中均表现出协同效应。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
抗肿瘤疗效：在NCI-H226（人间皮瘤）细胞系来源的异种移植（CDX）小鼠模型中，MYF-03-176 显示出显著的抗肿瘤活性。荷瘤小鼠每日两次口服该化合物，持续28天。在30 mg/kg剂量下，观察到平均肿瘤消退54%；在75 mg/kg剂量下，观察到平均肿瘤消退68%。两种剂量下的抗肿瘤活性相当[1]。- 联合治疗：在SW1573（KRAS G12C突变型）和H358R（获得性耐药KRAS G12C突变型）异种移植模型中，MYF-03-176 与 AMG510 联合用药比单药治疗组更能有效地抑制肿瘤生长[3]。
在人间皮瘤NCI-H226细胞来源的异种移植（CDX）模型中，每日两次口服MYF-03-176（30-75 mg/kg），持续28天，显示出显著的抗肿瘤活性。在SW1753异种移植BALB/c裸鼠模型中，每日两次口服MYF-03-176（100 mg/kg），持续21天，并联合AMG510，可有效缩小肿瘤体积，且不影响体重。 |
| 酶活实验 |
TR-FRET 检测：本研究建立了一种基于 FAM 标记示踪剂 WZJ-10（基于可逆性 TEAD 抑制剂 VT-107）的 TR-FRET 生化检测方法。将 100 nM 的 His 标签 TEAD 重组 YBD 蛋白与系列稀释的 MYF-03-176 在检测缓冲液（50 mM HEPES pH 7.5、200 mM NaCl、0.1% Pluronic F-68）中预孵育 5 小时。随后，加入 800 nM 的 WZJ-10 示踪剂和 50 ng/mL 的抗 6HIS Tb 隐蔽金单克隆抗体。使用 PHERAstar FSX 酶标仪测量 TR-FRET 信号（490/520 nm），以确定 IC50 值[2]。 - 完整质谱分析：将TEAD1蛋白与10倍摩尔过量的MYF-03-176在室温下孵育1小时。然后通过LC-MS分析反应产物，以确认共价加合物的形成。质谱图显示质量偏移，与MYF-03-176与TEAD1蛋白的共价结合一致[2]。
参考文献中未明确详细说明。TEAD抑制剂的典型检测方法是将待测化合物与重组TEAD蛋白在缓冲体系中孵育，加入荧光标记的YAP衍生肽，并在室温下孵育一定时间后，使用荧光偏振或时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）技术测量结合相互作用。 |
| 细胞实验 |
细胞增殖实验：将NCI-H226细胞以每孔100个细胞的密度接种于384孔白色板中，总体积为50 µL。使用HP D300数字分液器，用MYF-03-176处理细胞5天。第5天，每孔加入12.5 µL CellTiter-Glo试剂，孵育20分钟。使用PHERAstar FSX酶标仪读取发光值，并将数据标准化至DMSO处理的样本[2]。- TEAD报告基因实验：将NCI-H226细胞用TEAD荧光素酶报告慢病毒转染，并用嘌呤霉素筛选。将筛选出的细胞以每孔1000个细胞的密度接种于384孔白色板中，总体积为40 µL。使用HP D300数字分液器，用MYF-03-176处理细胞3天。使用One-Glo荧光素酶试剂测定荧光素酶活性，使用CellTiter-Glo试剂测定细胞活力。TEAD转录活性通过将荧光素酶信号与细胞活力进行标准化计算得出[2]。- 免疫印迹：用MYF-03-176处理后，将细胞裂解液进行SDS-PAGE电泳，并将蛋白转移至硝酸纤维素膜。将膜与特异性一抗（例如，抗BCL2L11、抗PUMA、抗SLC7A5）于4℃孵育过夜，然后与HRP标记的二抗于室温孵育1小时。使用化学发光底物显色[3]。 - RT-qPCR：使用RNA提取试剂盒从经MYF-03-176处理的细胞中提取总RNA，并反转录为cDNA。在实时PCR系统上使用SYBR Green Master Mix和特异性引物（例如，CTGF、CYR61、BMF、SLC7A5）进行RT-qPCR。以ACTB作为内参，并使用ΔΔCT法计算相对表达水平[3]。- 克隆形成实验：将细胞接种于6孔板中，并用MYF-03-176和/或KRAS抑制剂（例如，AMG510、MRTX1133）处理。处理后，固定、染色并计数克隆[3]。
参考文献中未明确详细说明。一种标准的基于细胞的TEAD转录活性检测方法是使用转染了TEAD反应性荧光素酶报告基因构建体的NCI-H226细胞。将细胞用不同浓度的MYF-03-176处理72小时，然后测量荧光素酶活性以确定转录抑制的IC50值。 |
| 动物实验 |
体内疗效研究（CDX模型）：将5×10^6个NCI-H226细胞与50% Matrigel混合，皮下植入雌性NSG小鼠右侧腹部。当肿瘤平均体积达到约141.3 mm³时，将小鼠随机分组（每组n=8-9）。MYF-03-176配制成10% DMSO、10% Tween 80水溶液悬浮液。该化合物每日两次口服给药，持续28天。对照组小鼠仅给予溶剂。每周两次测量肿瘤体积（计算公式为长×宽²/2）和体重[1]。- 体内联合用药研究：对于SW1573和H358R异种移植瘤模型，当肿瘤体积达到约100-150 mm³时，将小鼠随机分组。 AMG510 和 MYF-03-176 单独或联合口服给药。监测肿瘤体积和体重以评估疗效和耐受性[3]。
将携带NCI-H226皮下异种移植瘤的雌性BALB/c裸鼠分别以30、45或75 mg/kg的剂量，每日两次口服MYF-03-176，连续28天。每周测量两次肿瘤体积和体重。在联合用药研究中，小鼠以100 mg/kg的剂量，每日两次口服给药，持续21天。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
口服生物利用度和清除率：与早期化合物MYF-01-37和MYF-03-69相比，MYF-03-176表现出良好的药代动力学特性，包括低清除率和高口服生物利用度[1]。- 代谢稳定性：评估了肝微粒体稳定性[1]。
MYF-03-176 的分子量为 410.37，可溶于二甲基亚砜 (DMSO)（浓度≥100 mg/mL）。在动物研究中，MYF-03-176 的口服制剂为 10% DMSO + 90% 玉米油，浓度≥2.5 mg/mL。它是一种口服生物利用度高的化合物。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
- 体重影响：在NCI-H226 CDX体内疗效研究中，每日两次口服30 mg/kg的MYF-03-176耐受性良好，平均体重增加与赋形剂对照组相当。在每日两次口服75 mg/kg的剂量下，观察到平均体重下降5%，8只动物中有3只体重下降12-14%。停药后，体重恢复正常[1]。
参考文献中并未明确列出MYF-03-176的毒性数据。在NCI-H226异种移植小鼠模型中，口服MYF-03-176（30-75 mg/kg，每日两次）耐受性良好，未出现明显的体重下降，表明该剂量下具有良好的安全性。 |
| 参考文献 |
[1]. Covalent Disruptor of YAP-TEAD Association Suppresses Defective Hippo Signaling. BioRxiv. doi: https://doi.org/10.1101/2022.05.10.491316. Now published in eLife doi: 10.7554/eLife.78810
[2]. Structure-Based Design of Y-Shaped Covalent TEAD Inhibitors. J Med Chem. 2023 Apr 13;66(7):4617-4632. [3]. YAP/TAZ mediates resistance to KRAS inhibitors through inhibiting proapoptosis and activating the SLC7A5/mTOR axis. JCI Insight. 2024 Dec 20;9(24):e178535. |
| 其他信息 |
作用机制：MYF-03-176是一种Y形、靶向半胱氨酸的共价TEAD抑制剂。其共晶结构（PDB ID：7LI5）显示，丙烯酰胺基团与TEAD1的Cys359形成共价键，分子呈Y形，嵌入棕榈酸酯结合口袋并与周围的亲水和疏水残基相互作用。通过与TEAD上保守的棕榈酰化位点半胱氨酸共价结合，它阻断了YAP/TAZ-TEAD相互作用，从而抑制Hippo通路下游的转录活性[1][2]。- 适应症和耐药性：MYF-03-176对多种YAP/TEAD依赖性癌症具有治疗潜力，包括间皮瘤、脂肪肉瘤、肝癌和肺癌。重要的是，研究已证实，靶向 YAP/TAZ-TEAD 轴是克服 KRAS 抑制剂（例如 sotorasib、adagrasib、MRTX1133）的获得性和固有耐药性的有效策略，而 MYF-03-176 是该策略的强效工具化合物[3]。
MYF-03-176 是一种尚未获准用于临床的研究性化合物。它专门针对 TEAD 依赖性癌症，特别是 Hippo 信号通路缺陷的恶性胸膜间皮瘤 (MPM) 而开发。该化合物与 KRAS G12C/G12D 抑制剂联合使用时已显示出协同抗肿瘤活性，这支持了其在联合治疗策略中的应用潜力。 |
| 分子式 |
C19H18F4N4O2
|
|---|---|
| 分子量 |
410.365437984467
|
| 精确质量 |
410.1366
|
| 元素分析 |
C, 55.61; H, 4.42; F, 18.52; N, 13.65; O, 7.80
|
| CAS号 |
2857937-59-6
|
| PubChem CID |
164517031
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
3.1
|
| tPSA |
67.4 Ų
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
9
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
29
|
| 分子复杂度/Complexity |
575
|
| 定义原子立体中心数目 |
2
|
| SMILES |
FC(=C)C(N1C[C@H]([C@@H](C1)NC1N=CC=CN=1)OCC1C=CC(C(F)(F)F)=CC=1)=O
|
| InChi Key |
KVAWNRUJSYWYJX-HZPDHXFCSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C19H18F4N4O2/c1-12(20)17(28)27-9-15(26-18-24-7-2-8-25-18)16(10-27)29-11-13-3-5-14(6-4-13)19(21,22)23/h2-8,15-16H,1,9-11H2,(H,24,25,26)/t15-,16-/m1/s1
|
| 化学名 |
2-fluoro-1-[(3R,4R)-3-(pyrimidin-2-ylamino)-4-[[4-(trifluoromethyl)phenyl]methoxy]pyrrolidin-1-yl]prop-2-en-1-one
|
| 别名 |
MYF-03-176; MYF03-176; 2857937-59-6; MYF-03 176; CHEMBL5433922; 2-Fluoro-1-((3R,4R)-3-(pyrimidin-2-ylamino)-4-((4-(trifluoromethyl)benzyl)oxy)pyrrolidin-1-yl)prop-2-en-1-one; 2-Fluoro-1-[(3R,4R)-3-(pyrimidin-2-ylamino)-4-[[4-(trifluoromethyl)benzyl]oxy]pyrrolidin-1-yl]prop-2-en-1-one;
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.09 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4368 mL | 12.1841 mL | 24.3683 mL | |
| 5 mM | 0.4874 mL | 2.4368 mL | 4.8737 mL | |
| 10 mM | 0.2437 mL | 1.2184 mL | 2.4368 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
