| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
- HEVA71 internal ribosome entry site (IRES) [1].
- Protein tyrosine phosphatase 1B (PTP1B) with an IC50 of 5.5 ± 0.29 μM (competitive inhibition) [2]. - α-glucosidase with an IC50 of 317 ± 2.12 μM (noncompetitive inhibition) [2]. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
柚皮苷降低了胰岛素抵抗的HepG2细胞中PTP1B的表达水平，从而增加了葡萄糖的摄取，并对ONOO⁻介导的酪氨酸硝化作用表现出剂量依赖性的抑制作用。柚皮苷对α-葡萄糖苷酶具有很强的抑制活性，IC₅₀值为317 ± 2.12 µM[2]。在HEVA71感染的RD细胞中，柚皮苷-7-O-β-D-葡萄糖苷（柚皮苷）以剂量依赖的方式显著降低了病毒滴度。在1000 nM浓度下，与溶剂对照组相比，其使病毒滴度降低了约3.5 log₁₀ PFU/ml。降低病毒滴度的EC50为115.3 nM [1]。
- Prunin抑制HEVA71病毒蛋白合成，在感染后6小时和12小时，当Prunin浓度为62.5至1000 nM时，病毒蛋白VP2、P1、VP0和(VP4+VP2+VP3)的含量呈剂量依赖性降低。在1000 nM浓度下，未检测到病毒蛋白[1]。 - Prunin在感染后6小时和12小时，当Prunin浓度为62.5至1000 nM时，呈剂量依赖性地降低HEVA71病毒RNA的产生。在 1 μM 浓度下，感染后 6 小时病毒 RNA 丰度从 8.4 log10 拷贝降至 6.45 log10 拷贝，感染后 12 小时病毒 RNA 丰度从 9.45 log10 拷贝降至 8.0 log10 拷贝 [1]。 - 普鲁宁 (115.3 nM) 显著降低了肠道病毒 A 型（HEVA71 临床分离株，毒株 H、B5、C4、CA6、CA16）和肠道病毒 B 型（ECHO7、CB5）的病毒滴度，降低约 3.0 至 3.5 log10 PFU/ml，但对肠道病毒 C 型 (CA24)、鼻病毒 A 型 (HRV10)、单纯疱疹病毒 1 型或基孔肯雅病毒无影响 [1]。 - 在 HCV 感染的 Huh-7.5 细胞中，500 nM 的普鲁宁在 3 天时显著降低了 HCV 病毒滴度，降低约 0.5 log10 PFU/ml。感染后（dpi）和 6 dpi 时为 0.7 log10 PFU/ml。它还显著降低了HCV RNA水平，在感染后6天（6 dpi）降低了0.7倍[1]。 - 在胰岛素抵抗的HepG2细胞中，浓度为6.25、12.5和25 μM的柚皮苷-7-O-β-D-葡萄糖苷（prunin）显著增强了胰岛素刺激的2-NBDG葡萄糖摄取[2]。 - 在胰岛素抵抗的HepG2细胞中，浓度为6.25、12.5和25 μM的Prunin降低了PTP1B的表达水平[2]。 - 在胰岛素抵抗的HepG2细胞中，Prunin呈剂量依赖性地增加了IRS-1丝氨酸307的磷酸化水平，并增加了p-PI3K和p-Akt的相对丰度，而没有改变总PI3K或Akt的水平[2]。 - Prunin（12.5-100 μM）强烈抑制了ONOO⁻介导的……在基于 BSA 的检测中，酪氨酸硝化以浓度依赖的方式进行 [2]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在感染 HEVA71 (2×10^7 PFU/只) 的一日龄哺乳 BALB/c 小鼠中，腹腔注射柚皮苷-7-O-β-D-葡萄糖苷（普鲁宁），剂量为 3 或 10 mg/kg，每日一次，连续 7 天（分别于感染后 1 或 6 小时开始），可使小鼠在感染后 14 天存活率达到 100%，而仅注射载体或 1 mg/kg 剂量的小鼠在感染后 7 天全部死亡 [1]。
- 普鲁宁治疗（3 和 10 mg/kg）可降低 HEVA71 感染小鼠的临床评分（活动减少、弓背、毛发蓬乱、四肢无力）。接受 3 mg/kg 剂量治疗的小鼠在感染后 13 天恢复，而接受 10 mg/kg 剂量治疗的小鼠在感染后 9 天恢复 [1]。 - 接受 Prunin 治疗（1 至 10 mg/kg）的小鼠体重增加与 PBS 治疗的小鼠相似（感染后 0 至 14 天体重增加约 5.61 至 5.83 g），表明其细胞毒性可忽略不计 [1]。 - 在感染 HEVA71 病毒 7 天后处死的小鼠中，与载体对照组相比，Prunin（3 mg/kg）显著降低了后肢肌肉中的病毒载量约 10^4 PFU/g，而更高剂量（10 mg/kg）则导致病毒载量降低了 10^5 PFU/g。H&E 和 IHC 染色显示，Prunin 抑制了后肢肌肉中的肌肉组织损伤、免疫细胞浸润和病毒抗原分布 [1]。 |
| 酶活实验 |
PTP1B抑制活性测定：以对硝基苯磷酸酯（pNPP）为底物评价PTP1B抑制活性。将不同浓度的prunin与PTP1B酶和pNPP孵育，并测定吸光度。熊果酸用作阳性对照。IC50值由对数剂量抑制曲线计算得出。采用Lineweaver-Burk作图和Dixon作图进行动力学分析，以确定抑制类型和Ki值。对于PTP1B，在有或无不同浓度prunin（0.5、2.3、11.5和23 μM）的情况下，使用不同浓度的pNPP底物（0.5、1.0和2.0 mM）。抑制常数 (Ki) 由 Dixon 图 [2] 确定。
- α-葡萄糖苷酶抑制试验：采用分光光度法，以对硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷 (pNPG) 为底物进行 α-葡萄糖苷酶抑制试验。将 Prunin 与酶和底物一起孵育，并在 405 nm 处记录吸光度。以阿卡波糖作为阳性对照。在不同浓度的 pNPG (2.5、1.25 和 0.625 mM) 和不同浓度的 Prunin (0、62.5、125、250 和 500 μM) 存在下，进行 α-葡萄糖苷酶动力学分析。抑制常数 (Ki) 由 Dixon 图 [2] 确定。 - PTP1B 抑制的分子对接模拟：使用 Autodock Vina 程序进行对接模拟。使用 MarvinSketch 绘制 prunin 的二维结构，并将其转换为三维 PDB 格式。获取 PTP1B 的 X 射线晶体结构（PDB ID：1NNY）。使用 PyMOL 和 Ligplot [2] 分析 prunin 与 PTP1B 残基的结合亲和力评分和相互作用（氢键、疏水相互作用）。 |
| 细胞实验 |
RD细胞毒性试验：将RD细胞用不同浓度的普鲁宁（最高达5 μM）处理24小时，并检测细胞活力。浓度低于1 μM时，细胞活力>80%，CC50计算值为2715 nM [1]。
- HEVA71病毒滴度定量（噬斑试验）：将RD细胞感染HEVA71病毒，并用普鲁宁（31.25至1000 nM）或DMSO溶剂对照处理。感染12小时后，裂解细胞，并通过噬斑试验定量病毒滴度。 EC50 测定值为 115.3 nM [1]。 - 病毒蛋白合成的蛋白质印迹分析：用 HEVA71 病毒（MOI=1）感染 RD 细胞，并用 prunin（31.25 至 1000 nM）或 DMSO 处理。感染后 6 小时和 12 小时，裂解细胞，使用特异性抗体和 β-肌动蛋白作为上样对照，分析病毒蛋白 VP2、P1、VP0 和 (VP4+VP2+VP3)。对条带强度进行定量分析 [1]。 - 病毒 RNA 的定量 RT-PCR：用 prunin 处理感染的 RD 细胞，并在感染后 6 小时和 12 小时收集。提取总RNA，并通过qRT-PCR定量HEVA71病毒RNA拷贝数[1]。 - 胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖摄取实验（2-NBDG）：培养HepG2细胞，并用10^-6 mol/L胰岛素处理24小时以诱导胰岛素抵抗。然后，用不同浓度的prunin或二甲双胍处理细胞24小时，随后用胰岛素刺激（100 nM，30分钟）。之后，加入40 μM 2-NBDG，孵育30分钟。在485 nm激发波长和528 nm发射波长下测量荧光强度[2]。 - 胰岛素信号蛋白的Western blot分析：用prunin处理胰岛素抵抗的HepG2细胞，然后用胰岛素刺激。制备细胞裂解液，并通过SDS-PAGE分离蛋白质（PTP1B、p-IRS-1、IRS-1、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt、β-actin），然后转移至膜上，封闭后，与一抗于4℃孵育过夜，再与二抗孵育。采用化学发光法检测条带并进行定量[2]。 - HCV病毒滴度和RNA检测：用HCV感染Huh-7.5细胞，并用prunin（62.5至500 nM）处理。在感染后3天和6天，通过免疫荧光法定量病毒滴度，并通过qRT-PCR检测HCV RNA[1]。 |
| 动物实验 |
BALB/c小鼠HEVA71感染模型：将1日龄哺乳期BALB/c小鼠腹腔注射HEVA71 41株，感染剂量为2×10^7 PFU/只。感染后1小时或6小时开始，每天腹腔注射1、3或10 mg/kg剂量的柚皮苷-7-O-β-D-葡萄糖苷（柚皮苷），连续7天。对照组注射磷酸盐缓冲液（PBS）。感染后14天内，每天观察小鼠的存活率和临床表现（毛发蓬乱、蜷缩、精神萎靡、肢体无力、后肢瘫痪）。测量体重[1]。
- 后肢肌肉病毒载量定量：用普鲁宁（3 或 10 mg/kg）或载体处理感染 HEVA71 的 BALB/c 小鼠，于感染后 7 天处死。收集后肢肌肉，并通过噬斑减少试验定量病毒载量。结果以 PFU/g 表示[1]。 - 组织病理学和免疫组织化学：收集感染后 7 天用普鲁宁（3 mg/kg）或 PBS 处理的小鼠的后肢肌肉组织。用苏木精-伊红 (H&E) 染色评估组织损伤和炎症，并用免疫组织化学 (IHC) 检测病毒抗原分布[1]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在RD细胞中，浓度低于1 μM的柚皮苷-7-O-β-D-葡萄糖苷（普鲁宁）在24小时后耐受性良好（细胞存活率>80%）。CC50（导致50%细胞死亡的细胞毒性浓度）计算为2715 nM [1]。
- 在HepG2细胞中，普鲁宁在浓度高达25 μM时未显示出细胞毒性[2]。 - 在出生一天的BALB/c哺乳小鼠中，所有测试剂量（1、3、10 mg/kg）的普鲁宁均未显示出可忽略的细胞毒性，因为普鲁宁处理组小鼠的体重增加与PBS处理组小鼠相似[1]。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
柚皮苷7-O-β-D-葡萄糖苷是一种黄烷酮7-O-β-D-葡萄糖苷，由(S)-柚皮苷的7位通过糖苷键被β-D-吡喃葡萄糖苷取代而形成。它具有多种功能，包括作为代谢产物、降血糖剂、降脂剂和抗菌剂。它是一种黄烷酮7-O-β-D-葡萄糖苷、二羟基黄烷酮、单糖衍生物、4'-羟基黄烷酮化合物和(2S)-黄烷-4-酮。其功能与(S)-柚皮苷相关。柚皮苷已在猪屎豆(Crotalaria assamica)、菟丝子(Cuscuta reflexa)和其他具有相关数据的生物体中被报道。另见：柚皮苷-7-O-葡萄糖苷（注：已移至此处）。
- 柚皮苷-7-O-β-D-葡萄糖苷（prunin）是从黄酮类化合物库筛选中鉴定出来的，是一种有效的 HEVA71 抑制剂。它能抑制病毒IRES活性，用普鲁宁连续传代HEVA71可产生耐药突变株，这些突变株的病毒IRES中存在五个突变（T164C、G165C、C177T、G368C、T370G）[1]。 - 普鲁宁是一种窄谱抗病毒药物，仅对肠道病毒A和B有效，但对肠道病毒C、鼻病毒A、单纯疱疹病毒1型或基孔肯雅病毒无效[1]。 - 普鲁宁的作用机制是破坏hnRNPK与野生型HEVA71 IRES的结合，从而导致选择压力，促使突变发生，使Sam68与突变型IRES的结合增强，以补偿hnRNPK活性的丧失[1]。 - 据报道，普鲁宁对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠具有降血糖和降血脂作用，对喂食……的大鼠具有降胆固醇作用。高脂肪饮食[2]。 - 已知 Prunin 还具有抗氧化、抗炎、DNA 结合亲和力、抗病毒和心脏保护作用[2]。 |
| 分子式 |
C21H22O10
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|---|---|
| 分子量 |
434.3934
|
| 精确质量 |
434.121
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| 元素分析 |
C, 58.06; H, 5.11; O, 36.83
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| CAS号 |
529-55-5
|
| PubChem CID |
92794
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.6±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
802.4±65.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
222-224ºC
|
| 闪点 |
284.6±27.8 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±3.0 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.691
|
| LogP |
0.82
|
| tPSA |
166.14
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
6
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
10
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
31
|
| 分子复杂度/Complexity |
623
|
| 定义原子立体中心数目 |
6
|
| SMILES |
O1[C@]([H])([C@@]([H])([C@]([H])([C@@]([H])([C@@]1([H])C([H])([H])O[H])O[H])O[H])O[H])OC1=C([H])C(=C2C(C([H])([H])[C@@]([H])(C3C([H])=C([H])C(=C([H])C=3[H])O[H])OC2=C1[H])=O)O[H]
|
| InChi Key |
DLIKSSGEMUFQOK-SFTVRKLSSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C21H22O10/c22-8-16-18(26)19(27)20(28)21(31-16)29-11-5-12(24)17-13(25)7-14(30-15(17)6-11)9-1-3-10(23)4-2-9/h1-6,14,16,18-24,26-28H,7-8H2/t14-,16+,18+,19-,20+,21+/m0/s1
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| 化学名 |
(2S)-5-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-7-[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-2,3-dihydrochromen-4-one
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| 别名 |
NSC 135064; NSC-135064; NSC135064; Naringenin 7-O-β-D-glucopyranoside; Naringenin 7-O-glucoside; Prunin
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~230.21 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.76 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.76 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.76 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3021 mL | 11.5104 mL | 23.0208 mL | |
| 5 mM | 0.4604 mL | 2.3021 mL | 4.6042 mL | |
| 10 mM | 0.2302 mL | 1.1510 mL | 2.3021 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
鲑鱼精DNA
绞股蓝皂苷LI
伪金丝桃素
Trans-4-Cotininecarboxylic acid
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