Neurotensin

别名: 神经降压肽(豚鼠);NEUROTENSIN;神经加压素
目录号: V30629 纯度: ≥98%
神经降压素是一种肠道三肽,在多种结直肠癌和胰腺癌中作为有效的细胞有丝分裂原,并且与神经降压素受体 (NTR) 具有高亲和力。
Neurotensin CAS号: 39379-15-2
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
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产品描述
神经降压素是一种肠道三肽,在多种结直肠癌和胰腺癌中作为有效的细胞有丝分裂原,并且与神经降压素受体 (NTR) 具有高亲和力。
生物活性&实验参考方法
靶点
The action target of Neurotensin is neurotensin receptor 1 (NTR1) expressed on HCT116 human colon cancer cells. [1]
体外研究 (In Vitro)
Neurotensin 促进稳定转染 NTR 的未转化结肠上皮细胞系中 IL-8 的释放,并诱导动物小胶质细胞中 MIP-2、MCP-1、IL-1β 和 TNFα 的表达。大多数人类胰腺和结直肠恶性肿瘤都包含高亲和力 NTR,它们属于 G 蛋白偶联受体 (GPCR) 家族,这意味着神经降压素 (NT) 可能对肿瘤生长具有内分泌作用。已知神经降压素通过 NTR1 刺激许多信号转导途径,包括细胞内钙 ([Ca2+]i)、丝裂原激活蛋白激酶 (MAPK)、ERK 和 JNK 以及不同的 PKC 亚型。与载体治疗相比,神经降压素治疗 (100 nM) 显着促进 HCT116 细胞迁移(约三倍);姜黄素 (10 μM) 预处理抑制 NT 对 HCT116 细胞迁移的刺激作用。神经降压素的增殖作用部分归因于 MEK/ERK 的 NT 刺激和下游 AP-1 转录因子的调节 [1]。
1. 诱导HCT116细胞产生白细胞介素-8(IL-8):用浓度为10^-10 M、10^-9 M、10^-8 M、10^-7 M的Neurotensin处理HCT116人结肠癌细胞24小时,收集上清液并通过ELISA检测IL-8水平。结果显示,Neurotensin可浓度依赖性诱导IL-8产生;与对照组相比,10^-7 M Neurotensin可使IL-8分泌量升高约5倍[1]
2. 促进HCT116细胞迁移:采用Transwell迁移实验评估Neurotensin对细胞迁移的影响。将HCT116细胞接种于Transwell上室,下室加入Neurotensin(10^-8 M),培养24小时后,固定、染色并计数迁移至下室的细胞。结果表明,与对照组相比,Neurotensin可显著增加HCT116细胞迁移数量,增幅约2.5倍[1]
3. 激活细胞内信号通路:用Neurotensin(10^-8 M)分别处理HCT116细胞5分钟、15分钟、30分钟、60分钟,通过Western blot检测蛋白激酶C(PKC)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)的磷酸化水平。结果显示,Neurotensin可快速激活PKC、ERK1/2和p38 MAPK,磷酸化水平在5-15分钟达到峰值,随后逐渐下降[1]
细胞实验
1. HCT116细胞IL-8检测实验:将HCT116细胞以每孔5×10^4个细胞的密度接种于24孔板,用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基培养至70%-80%融合。更换为无血清RPMI 1640培养基,饥饿细胞12小时。随后,向孔中加入终浓度为10^-10 M、10^-9 M、10^-8 M、10^-7 M的Neurotensin(部分孔提前用姜黄素预处理)。在37°C、5% CO2培养箱中孵育24小时后,以1000×g离心10分钟收集培养上清液。使用特异性ELISA试剂盒检测上清液中IL-8浓度,用酶标仪在450 nm波长下读取吸光度值[1]
2. HCT116细胞迁移实验(Transwell实验):将Transwell小室(孔径8 μm)的上室用I型胶原4°C包被过夜。用胰酶消化HCT116细胞,重悬于无血清RPMI 1640培养基中,调整细胞浓度至1×10^5个/mL。向上室加入200 μL细胞悬液,向下室加入600 μL含10%胎牛血清和Neurotensin(10^-8 M)的RPMI 1640培养基。在37°C、5% CO2培养箱中孵育24小时后,用棉签擦去膜上表面未迁移的细胞,下表面迁移细胞用4%多聚甲醛固定15分钟,结晶紫染色20分钟。在光学显微镜下观察,随机选取5个视野计数,量化细胞迁移能力[1]
参考文献

[1]. Curcumin inhibits neurotensin-mediated interleukin-8 production and migration of HCT116 human colon cancer cells. Clin Cancer Res. 2006 Sep 15;12(18):5346-55.

其他信息
神经降压素是一种由13个氨基酸组成的肽类激素,存在于中枢神经系统和胃肠道中。它在大脑中作为神经递质发挥作用,在肠道中作为激素发挥作用,同时也是一种神经调节剂。由于它与多种神经递质系统(如多巴胺能系统、血清素能系统、谷氨酸能系统、GABA能系统和胆碱能系统)相关,因此参与多种中枢神经系统疾病(包括精神分裂症、帕金森病、药物滥用、疼痛、癌症、炎症、饮食失调和血压中枢调控)的病理生理过程。它是一种人体代谢产物、促分裂原、神经递质和伤口愈合剂。它是神经降压素(1+)的结合碱基。
一种从下丘脑中分离出的具有生物活性的十三肽。研究表明,神经降压素可诱导大鼠低血压,刺激豚鼠回肠和大鼠子宫收缩,并引起大鼠十二指肠松弛。还有证据表明,它既是外周神经系统神经递质,也是中枢神经系统神经递质。
1. 神经降压素是一种由13个氨基酸组成的神经肽,广泛分布于中枢神经系统和胃肠道。在胃肠道系统中,它调节肠道蠕动、分泌和营养吸收;在癌症中,它作为一种生长因子,促进某些肿瘤细胞(包括结肠癌细胞)的增殖、迁移和侵袭[1]。
2. 神经降压素介导HCT116细胞生物学效应的机制涉及其与细胞膜上特异性受体NTR1的结合,进而激活下游信号通路,例如PKC、ERK1/2和p38 MAPK。这些激活的通路共同促进IL-8的转录和分泌,并增强结肠癌细胞的迁移能力[1]
3. 在本研究中,神经降压素被用作正向刺激物,诱导HCT116细胞产生促肿瘤生物学行为(IL-8产生和细胞迁移),并进一步探讨了姜黄素对这些神经降压素介导的行为的抑制作用[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C78H121N21O20
分子量
1672.92404
精确质量
1671.91
CAS号
39379-15-2
PubChem CID
25077406
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.46g/cm3
折射率
1.666
LogP
4.506
tPSA
668.69
氢键供体(HBD)数目
21
氢键受体(HBA)数目
23
可旋转键数目(RBC)
50
重原子数目
119
分子复杂度/Complexity
3530
定义原子立体中心数目
14
SMILES
CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H]3CCCN3C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC4=CC=C(C=C4)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H]5CCC(=O)N5
InChi Key
PCJGZPGTCUMMOT-ISULXFBGSA-N
InChi Code
InChI=1S/C78H121N21O20/c1-7-43(6)63(73(115)96-57(76(118)119)37-42(4)5)97-70(112)55(39-45-21-25-47(101)26-22-45)95-72(114)59-18-13-35-99(59)75(117)52(16-11-33-86-78(83)84)90-64(106)48(15-10-32-85-77(81)82)89-71(113)58-17-12-34-98(58)74(116)51(14-8-9-31-79)91-69(111)56(40-60(80)102)94-66(108)50(28-30-62(104)105)88-68(110)54(38-44-19-23-46(100)24-20-44)93-67(109)53(36-41(2)3)92-65(107)49-27-29-61(103)87-49/h19-26,41-43,48-59,63,100-101H,7-18,27-40,79H2,1-6H3,(H2,80,102)(H,87,103)(H,88,110)(H,89,113)(H,90,106)(H,91,111)(H,92,107)(H,93,109)(H,94,108)(H,95,114)(H,96,115)(H,97,112)(H,104,105)(H,118,119)(H4,81,82,85)(H4,83,84,86)/t43-,48-,49-,50-,51-,52-,53-,54-,55-,56-,57-,58-,59-,63-/m0/s1
化学名
(2S)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S)-4-carboxy-2-[[(2S)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-[[(2S)-4-methyl-2-[[(2S)-5-oxopyrrolidine-2-carbonyl]amino]pentanoyl]amino]propanoyl]amino]butanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O : ~33.33 mg/mL (~19.92 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: 20 mg/mL (11.96 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.5978 mL 2.9888 mL 5.9776 mL
5 mM 0.1196 mL 0.5978 mL 1.1955 mL
10 mM 0.0598 mL 0.2989 mL 0.5978 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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