Biotin NHS

别名: (+)-生物素-N-羟基琥珀酰亚胺酯;(+)-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯;(+)生物素-N-琥珀酰亚胺基酯;D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯;N-羟基琥珀酰亚胺生物素;(+)-生物素-N-琥珀酰亚胺基酯;[(+)生物素]-N-羟基琥珀酰亚胺酯;BIOTIN-NHS 生物素-N-羟基丁二酰亚胺活化脂;N-Succinimidyl D-Biotinate D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯;N-羟基琥珀酰亚胺基生物素;生物素-N-羟基丁二酰亚胺活化脂;生物素琥珀酰亚胺酯;N-羟基丁二酰亚胺基生物素;N-(D-生物素基氧基)琥珀酰亚胺;生物素-N-羟基琥珀酰亚胺酯
目录号: V26454 纯度: ≥98%
Biotin NHS 是一种氨基反应性生物素试剂,用于制备生物素化表面或肽。
Biotin NHS CAS号: 35013-72-0
产品类别: New1
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
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产品描述
生物素NHS是一种氨基反应性生物素试剂,用于制备生物素化表面或肽。
生物素NHS(CAS号:35013-72-0)是一种胺反应性生物素化试剂,可将生物素共价连接到蛋白质、肽、抗体和其他生物分子上的伯胺(例如赖氨酸ε-氨基或N端)。它是典型的胺反应性生物素化试剂。生物素NHS与伯胺形成不可逆的酰胺键。该化合物也称为NHS-生物素或生物素N-羟基琥珀酰亚胺酯。其分子量为341.38(C₁₄H₁₉N₃O₅S)。
生物活性&实验参考方法
靶点
Biotin NHS targets primary amines (e.g., lysine ε-amino groups and protein N-termini) on proteins, peptides, antibodies, and oligonucleotides. It does not have a biological target in the traditional sense but serves as a chemical labeling reagent. The N-hydroxysuccinimide (NHS) ester reacts with nucleophilic amines to form stable amide bonds. This enables the attachment of biotin to biomolecules for subsequent detection or purification using streptavidin or avidin.
体外研究 (In Vitro)
建议(以下是我们建议的方案,仅供参考,请根据您的具体情况进行调整)。计算:为获得最佳结果,对于浓度为 10 mg/mL 的蛋白质溶液,生物素的摩尔过量应≥12 倍;对于浓度为 2 mg/mL 的蛋白质溶液,生物素的摩尔过量应≥20 倍。1. 确定添加到反应中的生物素试剂的毫摩尔数。mL 蛋白质 × (mg 蛋白质/mL 蛋白质) × (mmol 蛋白质/mg 蛋白质) × (20 mmol 蛋白质/mmol 蛋白质) = mmol 生物素,其中 mmol 为生物素的摩尔过量,即 20 倍。蛋白质样品中推荐的生物素摩尔过量为 2 mg/mL × 20 = 2 mg/mL。使用以下公式确定应添加到反应中的 10 mM 生物素试剂溶液(步骤 B.3 中制备)的微升量:生物素毫摩尔浓度 × (1000000 µL/L) × (L/10 毫摩尔浓度) = 生物素微升浓度。生物素标记反应:1. 根据“计算”部分中的计算,将 1–10 mg 蛋白质溶解于 0.5–2.0 mL PBS 中。2. 使用前,用有机溶剂(DMSO)制备 10 mM 生物素试剂溶液。3. 向蛋白质溶液中加入适量(μL)的 10 mM 生物素试剂溶液。4. 反应可在冰上孵育 2 小时或在室温下孵育 30 分钟。5. 使用 Western 印迹或 ELISA 检测标记的蛋白质。
生物素 NHS 不具有药理活性。其用途在于生物分子的生物素化,用于研究应用。它用于标记蛋白质、抗体、肽和核酸,以进行检测、纯化和固定。生物素-链霉亲和素相互作用(最强的非共价相互作用之一)使得ELISA、Western印迹和免疫组织化学检测具有高灵敏度。生物素NHS也可用于制备生物素化表面或肽。
体内研究 (In Vivo)
生物素NHS本身不具有药理活性,也不直接在体内发挥作用。其体内行为取决于与其偶联的生物素化生物分子。生物素化的抗体或蛋白质可用于体内成像或靶向研究。该化合物本身用作标记试剂,而非治疗剂。体内研究是在生物素化偶联物上进行的。
酶活实验
体外生物素化反应中,生物素NHS的制备方法通常包括将该化合物溶解于无水DMSO或DMF中,然后加入到PBS或HEPES缓冲液(pH 7.2-8.5)中的目标蛋白或肽溶液中。反应在室温下孵育30-120分钟,或在4℃下过夜。生物素NHS与目标分子的摩尔比通常为5-20:1。未反应的生物素可通过透析、尺寸排阻色谱或脱盐柱去除。生物素化程度可通过MALDI-TOF质谱、HABA法或链霉亲和素法进行检测。该化合物对水分敏感,应在制备后立即使用。
细胞实验
在基于细胞的研究中,生物素NHS用于标记细胞表面蛋白或制备用于受体研究的生物素化配体。细胞用PBS洗涤后,在4°C下与PBS中的生物素NHS(通常为0.1-1 mM)孵育30分钟以标记表面蛋白。洗涤后,裂解细胞,并将生物素化蛋白捕获在链霉亲和素磁珠上进行蛋白质组学分析。或者,也可以使用生物素化抗体或配体处理细胞,以进行受体结合或摄取研究。该化合物本身不进行细胞活性测试。
动物实验
使用生物素标记的NHS进行的体内动物实验通常涉及注射生物素标记的抗体或蛋白质,用于成像或靶向研究。生物素标记的缀合物可通过静脉注射(IV)、腹腔注射(IP)或皮下注射(SC)给药。通过收集组织并使用链霉亲和素-HRP或荧光链霉亲和素检测生物素标记的缀合物来评估生物分布。此外,生物素标记的NHS也可用于标记体内细胞表面蛋白,以进行追踪研究。该化合物本身不作为治疗药物使用。所有操作均遵循机构动物护理指南。
药代性质 (ADME/PK)
生物素NHS(分子量341.38)对水分敏感,应储存于-20°C的密封容器中,并避光防潮。该化合物在溶液中不稳定,应在使用前新鲜配制。它可溶于DMSO和DMF,但在水溶液中会发生水解。NHS酯与伯胺反应迅速。药代动力学性质取决于生物素化缀合物而非化合物本身。该化合物仅供研究使用。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
由于生物素NHS是一种研究用标记试剂而非治疗剂,因此其毒理学数据有限。生物素和NHS酯通常被认为毒性较低。该化合物接触后可能引起刺激。应遵循标准的实验室安全预防措施。该化合物仅供研究使用,不可用于人体治疗。生物素化缀合物的安全性取决于被标记的生物分子。
参考文献

[1]. Hybridoma production by simplified avidin-mediated electrofusion. J Immunol Methods. 1986 Jun 24;90(2):173-7.

[2]. Biotinyl-glucose-6-phosphate dehydrogenase preparation, kinetics, and modulation by avidin. Appl Biochem Biotechnol. 1982 Nov;7(6):443-54.

其他信息
生物素NHS(NHS-生物素)是一种研究级生物素化试剂,用于蛋白质、肽、抗体和寡核苷酸的标记。其主要应用包括利用链霉亲和素-生物素技术进行蛋白质的检测、纯化和固定。该化合物并非药物,不具有临床应用价值。它广泛应用于分子生物学、生物化学和免疫学研究。该化合物可从多家化学品供应商处购买,仅供研究用途。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C14H19N3O5S
分子量
341.3828
精确质量
341.104
CAS号
35013-72-0
PubChem CID
6710714
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.5±0.1 g/cm3
熔点
212-214 °C
折射率
1.616
LogP
-1.41
tPSA
130.11
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
6
可旋转键数目(RBC)
7
重原子数目
23
分子复杂度/Complexity
525
定义原子立体中心数目
3
SMILES
S1C([H])([H])[C@@]2([H])[C@@]([H])([C@]1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(=O)ON1C(C([H])([H])C([H])([H])C1=O)=O)N([H])C(N2[H])=O
InChi Key
YMXHPSHLTSZXKH-RVBZMBCESA-N
InChi Code
InChI=1S/C14H19N3O5S/c18-10-5-6-11(19)17(10)22-12(20)4-2-1-3-9-13-8(7-23-9)15-14(21)16-13/h8-9,13H,1-7H2,(H2,15,16,21)/t8-,9-,13-/m0/s1
化学名
(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 5-[(3aS,4S,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoate
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: (1). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。  (2). 该产品在溶液状态不稳定,请现配现用。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~62.5 mg/mL (~183.08 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.09 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.09 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.09 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。


请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.9293 mL 14.6464 mL 29.2929 mL
5 mM 0.5859 mL 2.9293 mL 5.8586 mL
10 mM 0.2929 mL 1.4646 mL 2.9293 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们