| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Biotin NHS targets primary amines (e.g., lysine ε-amino groups and protein N-termini) on proteins, peptides, antibodies, and oligonucleotides. It does not have a biological target in the traditional sense but serves as a chemical labeling reagent. The N-hydroxysuccinimide (NHS) ester reacts with nucleophilic amines to form stable amide bonds. This enables the attachment of biotin to biomolecules for subsequent detection or purification using streptavidin or avidin.
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| 体外研究 (In Vitro) |
建议(以下是我们建议的方案,仅供参考,请根据您的具体情况进行调整)。计算:为获得最佳结果,对于浓度为 10 mg/mL 的蛋白质溶液,生物素的摩尔过量应≥12 倍;对于浓度为 2 mg/mL 的蛋白质溶液,生物素的摩尔过量应≥20 倍。1. 确定添加到反应中的生物素试剂的毫摩尔数。mL 蛋白质 × (mg 蛋白质/mL 蛋白质) × (mmol 蛋白质/mg 蛋白质) × (20 mmol 蛋白质/mmol 蛋白质) = mmol 生物素,其中 mmol 为生物素的摩尔过量,即 20 倍。蛋白质样品中推荐的生物素摩尔过量为 2 mg/mL × 20 = 2 mg/mL。使用以下公式确定应添加到反应中的 10 mM 生物素试剂溶液(步骤 B.3 中制备)的微升量:生物素毫摩尔浓度 × (1000000 µL/L) × (L/10 毫摩尔浓度) = 生物素微升浓度。生物素标记反应:1. 根据“计算”部分中的计算,将 1–10 mg 蛋白质溶解于 0.5–2.0 mL PBS 中。2. 使用前,用有机溶剂(DMSO)制备 10 mM 生物素试剂溶液。3. 向蛋白质溶液中加入适量(μL)的 10 mM 生物素试剂溶液。4. 反应可在冰上孵育 2 小时或在室温下孵育 30 分钟。5. 使用 Western 印迹或 ELISA 检测标记的蛋白质。
生物素 NHS 不具有药理活性。其用途在于生物分子的生物素化,用于研究应用。它用于标记蛋白质、抗体、肽和核酸,以进行检测、纯化和固定。生物素-链霉亲和素相互作用(最强的非共价相互作用之一)使得ELISA、Western印迹和免疫组织化学检测具有高灵敏度。生物素NHS也可用于制备生物素化表面或肽。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
生物素NHS本身不具有药理活性,也不直接在体内发挥作用。其体内行为取决于与其偶联的生物素化生物分子。生物素化的抗体或蛋白质可用于体内成像或靶向研究。该化合物本身用作标记试剂,而非治疗剂。体内研究是在生物素化偶联物上进行的。
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| 酶活实验 |
体外生物素化反应中,生物素NHS的制备方法通常包括将该化合物溶解于无水DMSO或DMF中,然后加入到PBS或HEPES缓冲液(pH 7.2-8.5)中的目标蛋白或肽溶液中。反应在室温下孵育30-120分钟,或在4℃下过夜。生物素NHS与目标分子的摩尔比通常为5-20:1。未反应的生物素可通过透析、尺寸排阻色谱或脱盐柱去除。生物素化程度可通过MALDI-TOF质谱、HABA法或链霉亲和素法进行检测。该化合物对水分敏感,应在制备后立即使用。
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| 细胞实验 |
在基于细胞的研究中,生物素NHS用于标记细胞表面蛋白或制备用于受体研究的生物素化配体。细胞用PBS洗涤后,在4°C下与PBS中的生物素NHS(通常为0.1-1 mM)孵育30分钟以标记表面蛋白。洗涤后,裂解细胞,并将生物素化蛋白捕获在链霉亲和素磁珠上进行蛋白质组学分析。或者,也可以使用生物素化抗体或配体处理细胞,以进行受体结合或摄取研究。该化合物本身不进行细胞活性测试。
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| 动物实验 |
使用生物素标记的NHS进行的体内动物实验通常涉及注射生物素标记的抗体或蛋白质,用于成像或靶向研究。生物素标记的缀合物可通过静脉注射(IV)、腹腔注射(IP)或皮下注射(SC)给药。通过收集组织并使用链霉亲和素-HRP或荧光链霉亲和素检测生物素标记的缀合物来评估生物分布。此外,生物素标记的NHS也可用于标记体内细胞表面蛋白,以进行追踪研究。该化合物本身不作为治疗药物使用。所有操作均遵循机构动物护理指南。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
生物素NHS(分子量341.38)对水分敏感,应储存于-20°C的密封容器中,并避光防潮。该化合物在溶液中不稳定,应在使用前新鲜配制。它可溶于DMSO和DMF,但在水溶液中会发生水解。NHS酯与伯胺反应迅速。药代动力学性质取决于生物素化缀合物而非化合物本身。该化合物仅供研究使用。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于生物素NHS是一种研究用标记试剂而非治疗剂,因此其毒理学数据有限。生物素和NHS酯通常被认为毒性较低。该化合物接触后可能引起刺激。应遵循标准的实验室安全预防措施。该化合物仅供研究使用,不可用于人体治疗。生物素化缀合物的安全性取决于被标记的生物分子。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
生物素NHS(NHS-生物素)是一种研究级生物素化试剂,用于蛋白质、肽、抗体和寡核苷酸的标记。其主要应用包括利用链霉亲和素-生物素技术进行蛋白质的检测、纯化和固定。该化合物并非药物,不具有临床应用价值。它广泛应用于分子生物学、生物化学和免疫学研究。该化合物可从多家化学品供应商处购买,仅供研究用途。
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| 分子式 |
C14H19N3O5S
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|---|---|
| 分子量 |
341.3828
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| 精确质量 |
341.104
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| CAS号 |
35013-72-0
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| PubChem CID |
6710714
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 熔点 |
212-214 °C
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| 折射率 |
1.616
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| LogP |
-1.41
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| tPSA |
130.11
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
23
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| 分子复杂度/Complexity |
525
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| 定义原子立体中心数目 |
3
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| SMILES |
S1C([H])([H])[C@@]2([H])[C@@]([H])([C@]1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(=O)ON1C(C([H])([H])C([H])([H])C1=O)=O)N([H])C(N2[H])=O
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| InChi Key |
YMXHPSHLTSZXKH-RVBZMBCESA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C14H19N3O5S/c18-10-5-6-11(19)17(10)22-12(20)4-2-1-3-9-13-8(7-23-9)15-14(21)16-13/h8-9,13H,1-7H2,(H2,15,16,21)/t8-,9-,13-/m0/s1
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| 化学名 |
(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 5-[(3aS,4S,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: (1). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。 (2). 该产品在溶液状态不稳定,请现配现用。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~62.5 mg/mL (~183.08 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.09 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.09 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.09 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9293 mL | 14.6464 mL | 29.2929 mL | |
| 5 mM | 0.5859 mL | 2.9293 mL | 5.8586 mL | |
| 10 mM | 0.2929 mL | 1.4646 mL | 2.9293 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。