规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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100mg |
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500mg |
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1g |
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10g |
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Other Sizes |
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靶点 |
Vasodilator; nitric oxide (NO) donor
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体外研究 (In Vitro) |
Nitroprusside disodium使人胃癌细胞更容易受到 TRAIL(肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体)诱导的细胞凋亡的影响 [4]。
Nitroprusside disodium使人胃癌细胞更易发生TRAIL (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体)诱导的凋亡[4]。 本研究中,研究人员发现TRAIL可诱导人胃癌细胞系细胞凋亡和细胞周期阻滞,而这种作用是通过NO的产生以及细胞凋亡的外源性和内源性信号通路的激活介导的。此外,我们发现no供体sodium nitroprusside (Nitroprusside disodium/SNP)使胃癌细胞对trail介导的凋亡敏感。用TRAIL和SNP处理细胞导致caspase-8和caspase-9的激活和NO释放增加。抑制caspase-8可阻断TRAIL诱导的细胞凋亡,而选择性caspase-9抑制剂无法阻止TRAIL或TRAIL + SNP诱导的细胞凋亡。抑制NOS可阻断caspase-9的活化,但对细胞凋亡无明显影响。 结论:snp通过刺激NO的释放使胃癌细胞对trail诱导的细胞毒性敏感,进而促进线粒体介导的信号转导途径。线粒体信号通路和TRAIL死亡受体信号通路的参与协同增加了这些细胞的凋亡水平[4] 。 先前的研究报道了高水平的一氧化氮(NO)诱导成骨细胞凋亡。在这项研究中,研究人员检测了Nitroprusside disodium(SNP) (NO供体)在谷胱甘肽(GSH)耗竭和对照U2-OS成骨细胞中诱导的细胞毒性损伤的分子机制。与正常细胞相比,gsh缺失细胞中的SNP有效浓度低得多,从而降低了细胞活力。这些数据表明,细胞内谷胱甘肽水平在snp诱导的成骨细胞死亡过程中起关键作用。当用荧光染料H2DCFDA测量时,由于SNP处理导致的氧化应激水平在gsh耗尽的细胞中翻了一番。用NO清除剂PTIO预处理可以保持SNP处理细胞的活力。用自噬抑制剂Wortmannin预处理SNP处理的细胞可以恢复活力,而用泛特异性caspase抑制剂zVAD-fmk预处理则不能。免疫印迹分析显示,snp处理的细胞LC3-II大量增加,PTIO或Wortmannin预处理可抑制LC3-II的增加;这表明,在gsh枯竭的条件下,SNP诱导不同的分子信号,导致自噬细胞死亡。在透射电镜下,snp处理细胞的超微结构形态显示大量的自噬液泡。这些数据表明NO产生氧化应激和细胞损伤,最终导致gsh枯竭的成骨细胞自噬细胞死亡。[3] |
体内研究 (In Vivo) |
Nitroprusside disodium可用于减轻肠缺血再灌注。近年来对缺血再灌注损伤的研究重点是中性粒细胞与内皮细胞之间的相互作用。中性粒细胞的跨内皮迁移,伴随着活性氧和细胞因子的释放,对损伤组织造成进一步的损伤。然而,再灌注综合征发病机制的关键因素包括血管内皮表面粘附分子的上调及其随后与活化的中性粒细胞的相互作用。在中性粒细胞上发现的最重要的粘附蛋白是整合素淋巴细胞功能相关抗原-1 (LFA-1;CD11a / CD18)。这是细胞间粘附分子-1 (ICAM-1)的配体,在内皮细胞上表达。LFA-1/ICAM-1相互作用对于中性粒细胞进入炎症部位至关重要。硝普钠下调ICAM-1和LFA-1表达,并通过与LFA-1结合干扰ICAM-1 - LFA-1相互作用。这一重要机制应被铭记为硝普钠诱导的中性粒细胞活性抑制的主要机制。[2]
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酶活实验 |
根据制造商的说明,使用一氧化氮合酶测定试剂盒进行NOS酶活性测定。简单地说,将细胞接种于96孔板中,当板上细胞达到80% ~ 90%合流时进行实验。用TRAIL和/或sodium nitroprusside (SNP)处理细胞24 h,丢弃上清,加入100 μl/孔的NOS检测缓冲液。孵育40分钟后,用酶标仪测定反应产物。在激发波长495 nm和发射波长515 nm处,通过检测各孔的吸光度来测定NOS的相对活性。所有实验一式三次,并与空白对照(没有细胞的空孔)和处理对照(用His肽处理的细胞)进行比较。NOS相对活性=(处理细胞RFU -空白孔RFU) / (His处理细胞RFU -空白孔RFU)。(RFU表示相对荧光单位)。
通过测定培养基中亚硝酸盐和硝酸盐的积累量来测定NO的产量。简单地说,在TRAIL和/或SNP处理细胞后,在培养基中加入硝酸盐还原酶及其辅助因子,将所有硝酸盐转化为亚硝酸盐,然后再加入100 μl的Griess试剂。在546 nm处测量吸光度。[4]
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细胞实验 |
MTT法和流式细胞术分别检测细胞增殖和细胞凋亡标志物。Western blot检测caspase -8、caspase - 9的表达水平。还评估了一氧化氮合酶(NOS)活性、NO生成和半胱天冬酶活性的变化。[4]
在加入细胞培养基之前,立即制备0.5 M sodium nitroprusside (SNP)溶于水的原液。用SNP处理胃癌细胞系,最终浓度为0.5至2.0 mM,在补充血清的培养基中进行。制备TRAIL原液500 ng/ml,在添加血清的培养基中处理胃癌细胞株的终浓度为50 ~ 300 ng/ml。将等量PBS和对照His肽加入未处理的细胞中作为对照。细胞分别用TRAIL单独或与不同剂量的SNP联合处理(50 ng/ml TRAIL加或不加0.5 mM SNP;TRAIL 100 ng/ml伴或不伴1.0 mM SNP;200 ng/ml TRAIL(含或不含1.5 mM SNP)和300 ng/ml TRAIL(含或不含2.0 mM SNP),持续24小时。在使用药物抑制剂处理的细胞中,在添加TRAIL (300 ng/ml)之前,将细胞与抑制剂一起预孵育45分钟。[4] Western blot检测:用TRAIL和/或sodium nitroprusside (SNP)孵育后,在冰冷的PBS中收集细胞,并立即用含有蛋白酶抑制剂的裂解缓冲液裂解。每个样品的蛋白质浓度使用BCA蛋白测定试剂盒进行测定。每个样品中等量的蛋白质被装入十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳,然后通过电印迹转移到硝化纤维素膜上。用5%脱脂牛奶阻断膜,用caspase-8、-9和β-actin的一抗孵育,然后用酶标二抗孵育。使用增强型化学发光检测系统可视化靶蛋白。β-肌动蛋白作为负荷对照。[4] |
参考文献 | |
其他信息 |
Sodium nitroprusside dihydrate is a hydrate that is the dihydrate form of sodium nitroprusside. It has a role as a nitric oxide donor and a vasodilator agent. It contains a sodium nitroprusside.
A powerful vasodilator used in emergencies to lower blood pressure or to improve cardiac function. It is also an indicator for free sulfhydryl groups in proteins. See also: Nitroprusside (annotation moved to); Sodium Nitroprusside (annotation moved to). |
分子式 |
C5H4FEN6NA2O3
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分子量 |
297.9482
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精确质量 |
297.948
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CAS号 |
13755-38-9
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相关CAS号 |
Sodium nitroprusside;14402-89-2
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PubChem CID |
11953895
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外观&性状 |
Reddish brown to dark brown solid powder
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密度 |
1.72
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LogP |
0.169
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tPSA |
166.84
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氢键供体(HBD)数目 |
2
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氢键受体(HBA)数目 |
14
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可旋转键数目(RBC) |
0
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重原子数目 |
17
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分子复杂度/Complexity |
119
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定义原子立体中心数目 |
0
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InChi Key |
XRKMNJXYOFSTBE-UHFFFAOYSA-N
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InChi Code |
InChI=1S/5CN.Fe.NO.2Na.2H2O/c5*1-2;;1-2;;;;/h;;;;;;;;;2*1H2/q5*-1;+4;-1;2*+1;;
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化学名 |
disodium;iron(4+);nitroxyl anion;pentacyanide;dihydrate
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别名 |
Sodium nitroferricyanide(III) dihydrate; DTXSID7041126; MFCD00149192; disodium;iron(4+);nitroxyl anion;pentacyanide;dihydrate; Sodium pentacyanonitrosylferrate(III) dihydrate; DTXCID5021126
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HS Tariff Code |
2934.99.9001
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存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。 |
运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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溶解度 (体外实验) |
H2O : ~100 mg/mL (~335.63 mM)
DMSO : ~50 mg/mL (~167.81 mM) |
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溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.39 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.39 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: 100 mg/mL (335.63 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
1 mM | 3.3563 mL | 16.7813 mL | 33.5627 mL | |
5 mM | 0.6713 mL | 3.3563 mL | 6.7125 mL | |
10 mM | 0.3356 mL | 1.6781 mL | 3.3563 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。