Nitrosobiotin

目录号: V37681 纯度: ≥98%
亚硝基生物素可用于标记二抗。
Nitrosobiotin CAS号: 56859-26-8
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
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产品描述
亚硝基生物素可用于标记二抗。
亚硝基生物素 (V37681):一种经亚硝基 (-NO) 功能化的生物素衍生物,使其成为一种用途广泛的生物化学和化学生物学探针。亚硝基部分提供了一个反应位点,可进行选择性偶联,从而与硫醇、胺和其他亲核残基发生共价相互作用。该化合物保留了生物素骨架,对亲和素和链霉亲和素具有很强的结合亲和力,可用于亲和捕获、标记和检测分析。
生物活性&实验参考方法
靶点
Biotin-binding proteins (avidin, streptavidin, neutravidin) via the biotin moiety; the nitroso group provides reactivity toward thiols, amines, and other nucleophilic residues for covalent protein modification.
体外研究 (In Vitro)
体外活性基于其与蛋白质上的亲核残基形成共价加合物的能力。生物素部分与链霉亲和素保持高亲和力结合(Kd ~10-¹⁵ M),从而能够检测和捕获亚硝基修饰的蛋白质。亚硝基能够在生理条件下选择性标记半胱氨酸和赖氨酸残基。
体内研究 (In Vivo)
它不具有直接的体内活性;可用作生化探针,用于标记和检测复杂生物混合物中的蛋白质。它被用于蛋白质组学、氧化还原生物学和蛋白质修饰研究中,以探索亚硝基化和氧化应激通路。
酶活实验
链霉亲和素结合试验:将亚硝基生物素(0.01-100 nM)与辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(1:5000)在PBS-T缓冲液中于室温孵育1小时。复合物被捕获于生物素包被的微孔板或通过ELISA检测。亚硝基反应性试验:将亚硝基生物素(10-100 uM)与模型蛋白(例如,BSA,10 uM)在pH 7.4的PBS缓冲液中于37℃孵育2小时;通过SDS-PAGE和Western blot(使用抗生物素抗体)分析加合物的形成。
细胞实验
蛋白质标记实验:将细胞在RIPA裂解缓冲液中裂解,并与亚硝基生物素(10-100 μM)于37℃孵育1-2小时。标记的蛋白质用链霉亲和素-琼脂糖珠捕获,用SDS上样缓冲液煮沸洗脱,然后进行SDS-PAGE电泳,最后用目标抗体进行Western blot分析。或者,也可以通过二维电泳分离蛋白质,并用链霉亲和素-HRP进行检测。
动物实验
由于亚硝基生物素是一种研究探针,因此不适用于体内动物模型。它可用于离体组织标记:将组织匀浆后与亚硝基生物素孵育,然后通过质谱法鉴定标记的蛋白质。虽然尚未有相关报道,但可以使用放射性标记的亚硝基生物素在小鼠体内进行生物分布研究。
药代性质 (ADME/PK)
不适用于治疗;亚硝基生物素仅用作研究试剂。目前尚无药代动力学数据。作为一种小分子(分子量 273.31),预计其具有中等的膜渗透性,并能被快速代谢或清除。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
目前尚无亚硝基生物素的毒性数据。作为一种生物素衍生物,预计其毒性较低。处理该化合物时应遵循标准的实验室安全预防措施。尚未有关于其遗传毒性或致癌性的研究报告。
参考文献

[1]. Colorimetric and gas chromatographic methods of determination of the biotin in pharmaceutical preparations. Ann Ist Super Sanita. 1977;13(4):783-91.

其他信息
亚硝基生物素是一种研究化合物,而非药物。它用作化学探针,用于研究蛋白质亚硝基化、氧化还原生物学和蛋白质的共价修饰。亚硝基能够标记和鉴定S-亚硝基化蛋白质,从而拓展了生物素-链霉亲和素系统在动态和共价生物化学应用中的用途。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C10H15N3O4S
分子量
273.3088
精确质量
273.078
CAS号
56859-26-8
PubChem CID
191424
外观&性状
Light yellow to yellow solid powder
LogP
0.768
tPSA
127.86
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
6
可旋转键数目(RBC)
5
重原子数目
18
分子复杂度/Complexity
365
定义原子立体中心数目
3
SMILES
C1C2C(C(S1)CCCCC(=O)O)NC(=O)N2N=O
InChi Key
IFUXQNNMTPBRPW-ZKWXMUAHSA-N
InChi Code
InChI=1S/C10H15N3O4S/c14-8(15)4-2-1-3-7-9-6(5-18-7)13(12-17)10(16)11-9/h6-7,9H,1-5H2,(H,11,16)(H,14,15)/t6-,7-,9-/m0/s1
化学名
5-[(3aR,6S,6aS)-3-nitroso-2-oxo-3a,4,6,6a-tetrahydro-1H-thieno[3,4-d]imidazol-6-yl]pentanoic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~180 mg/mL (~658.59 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 4.5 mg/mL (16.46 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 45.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 4.5 mg/mL (16.46 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 45.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.6588 mL 18.2942 mL 36.5885 mL
5 mM 0.7318 mL 3.6588 mL 7.3177 mL
10 mM 0.3659 mL 1.8294 mL 3.6588 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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