| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 靶点 |
NK-252 targets the Keap1-DC domain (Kelch/double-glycine repeat motif and C-terminal region) which contains the Nrf2-binding site. [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
用奥替普拉唑 (OPZ) 或 NK-252 处理的 Huh-7.5 细胞表现出剂量依赖性的 NAD(P)H 醌氧化还原酶 1 (NQO1)-ARE 激活，这由荧光素酶活性证实。基于 NK-252 对该效应的效力高于 OPZ 的事实，NK-252 的 EC2 值（诱导浓度为背景浓度两倍时的浓度）为 1.36 μM，而 OPZ 的 EC2 值为 20.8 μM，该值是通过对诱导阈值上下两侧的值进行线性外推确定的。NK-252 可能在肝细胞中作为 Nrf2 激活剂发挥作用。已有文献记载，典型的 Nrf2 激活剂（例如 OPZ）可以保护小胶质细胞免受 H2O2 引起的细胞毒性损伤。本研究使用Huh-7细胞评估OPZ和NK-252的抗氧化特性及其对H₂O₂诱导的细胞毒性的保护能力。结果表明，与对照组细胞相比，OPZ或NK-252处理细胞后，细胞对H₂O₂诱导的细胞毒性的抵抗力显著增强[1]。NK-252以剂量依赖的方式激活Huh-7.5细胞中的NQO1-ARE（抗氧化反应元件）。NK-252的EC₂值（诱导浓度达到背景值的两倍）为1.36 μM，而OPZ的EC₂值为20.8 μM。NK-252诱导的荧光素酶活性几乎完全被Nrf2 siRNA抑制。[1] NK-252能够保护Huh-7细胞免受H₂O₂诱导的细胞毒性损伤。与对照细胞相比，用 NK-252（0.3–30 μM，处理 24 小时）处理的细胞对 1 mM H2O2 诱导的细胞毒性表现出更高的抵抗力，并且 NK-252 的保护作用明显强于 OPZ。[1]
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| 体内研究 (In Vivo) |
与CDAA对照组大鼠相比，喂食胆碱缺乏L-氨基酸定义（CDAA）饮食并接受OPZ或NK-252治疗的大鼠，其肝纤维化评分较低，中位数为3，表明存在桥接纤维化。与喂食正常对照饮食（未处理组）的大鼠相比，CDAA对照组大鼠的肝纤维化面积几乎大了20倍（分别为14.7%和0.72%）。给予NK-252或OPZ后，肝纤维化面积分别达到NK-252_high组5.80%、NK-252_low组6.20%和OPZ组4.97%。NK-252对肝纤维化面积和评分具有剂量依赖性效应[1]。P388/S和P388/VCR小鼠单独使用NK-252未显示出抗癌作用。当口服NK-252联合依托泊苷治疗时，腹腔注射P388/S的小鼠的存活时间显著长于单独使用依托泊苷的小鼠。与单独使用依托泊苷的存活时间相比，NK-252联合依托泊苷治疗显著延长了腹腔注射P388/VCR疫苗小鼠的寿命[2]。在喂食胆碱缺乏的L-氨基酸限定（CDAA）饮食（一种NASH模型）的大鼠中，每日一次口服20 mg/kg或60 mg/kg的NK-252，持续9周，可显著减轻组织学异常的进展，尤其是肝纤维化。 CDAA对照组大鼠的中位纤维化评分（改良Brunt法）为4分（假小叶形成），而NK-252治疗组大鼠的中位评分为3分（桥接纤维化）。CDAA对照组的肝纤维化面积（天狼星红阳性面积）为14.7%，NK-252治疗后分别降至6.20%（低剂量组）和4.97%（高剂量组）。NK-252还能减少α-SMA阳性细胞的数量（提示肝星状细胞活化），并降低炎症细胞浸润。 [1]
NK-252（每日一次，每次 60 mg/kg，持续 9 周）显著降低了 CDAA 饮食喂养大鼠的血浆 ALT 和 AST 水平，与 CDAA 对照组相比（ALT：120.8 ± 3.2 vs. 170.7 ± 9.6；AST：238.5 ± 9.6 vs. 344.4 ± 17.3）。[1] NK-252 可上调 CDAA 饮食喂养大鼠肝脏中 NQO1 基因的表达，这通过实时定量 PCR 检测得到证实。此外，NK-252 还可降低肝脏中蛋白质羰基含量（蛋白质氧化的标志物）（从 CDAA 对照组的约 4.5 nmol/mg 蛋白质降至 NK-252 组的约 2.5–3.0 nmol/mg 蛋白质）。 [1] NK-252 以剂量依赖的方式下调 CDAA 饮食喂养大鼠肝脏中的纤维化基因表达（TGF-β1、胶原蛋白 α1(I)、TIMP-1）。[1] 在延迟给药方案（CDAA 饮食喂养 6 周后开始，每日一次，每次 NK-252 60 mg/kg，持续 4 周）中，NK-252 可阻止已形成纤维化的进一步进展：纤维化评分中位数为 3（CDAA 对照组为 4），纤维化面积为 5.20%（CDAA 对照组为 14.7%）。炎症细胞浸润几乎完全被抑制。[1] |
| 酶活实验 |
采用表面等离子共振 (SPR) 相互作用分析评估 NK-252 与 Keap1-DC 结构域的结合。将重组 GST 融合的 Keap1-DC 蛋白（人 Keap1 的 321-609 位氨基酸残基）通过胺偶联固定在传感器芯片上。使用仅含 GST 的参考流动池。以 10 μl/min 的流速注入浓度分别为 12.5、25、50 和 100 μM 的 NK-252 溶液，持续 60 秒。NK-252 与 Keap1-DC 的结合表现为共振单位的剂量依赖性增加。相反，在相同条件下未检测到奥替拉唑 (OPZ) 与 Keap1-DC 的结合。[1]
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| 细胞实验 |
在荧光素酶报告基因检测中，使用稳定转染了ARE（抗氧化反应元件）-荧光素酶报告基因（来自NQO1基因的ARE三串联重复序列）的Huh-7.5细胞。细胞用对照siRNA或Nrf2 siRNA转染30小时后，用NK-252（0.3–30 μM）或DMSO（对照）处理16小时。使用Steady-Glo荧光素酶检测系统测定荧光素酶活性。NK-252以剂量依赖的方式激活NQO1-ARE，而这种激活几乎完全被Nrf2 siRNA抑制。[1] 在H2O2诱导的细胞毒性检测中，Huh-7细胞用NK-252（0.3–30 μM）或DMSO（对照）处理24小时。随后洗涤细胞，并在 1 mM H2O2 中继续培养 24 小时。使用 Cell Titer 96 AQueous One Solution 试剂测定细胞活力。与对照组细胞相比，NK-252 处理的细胞对 H2O2 诱导的细胞毒性表现出更高的抵抗力，且具有剂量依赖性的保护作用。[1]
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| 动物实验 |
雄性Fischer 344大鼠（6周龄）饲喂胆碱缺乏的L-氨基酸限定（CDAA）饮食以诱导非酒精性脂肪性肝炎（NASH）。NK-252悬浮于0.5%（w/v）甲基纤维素溶液中，每日口服一次。在预防方案中，从CDAA饮食开始1周后，分别给予20 mg/kg（低剂量）或60 mg/kg（高剂量）的NK-252，持续9周。在延迟给药（治疗）方案中，从CDAA饮食预饲6周后开始，每日一次给予60 mg/kg的NK-252，持续4周。研究结束时，在异氟烷麻醉下对大鼠实施安乐死，并收集肝脏进行组织病理学检查（苏木精-伊红染色、天狼星红染色、α-SMA免疫染色）、基因表达分析（实时定量PCR）和蛋白质羰基测定。从腹主动脉采集血样，用于测定血浆ALT和AST水平。[1]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
与其他二氢吡啶类药物相比，NK-252 的钙拮抗活性和毒性相对较低，但未提供具体的毒性数据（例如，LD50、肝毒性、蛋白结合率）。[2]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
另见：NK 252（注释已移至）。
NK-252 是一种新型联芳基脲化合物，不含硫醇反应基团，与奥替普拉等典型的硫醇反应剂相比，它是一种更具特异性的 Nrf2 激活剂。据称，它是首个能够竞争性抑制 Nrf2 与 Keap1 结合的化合物，但仍需进一步的结构分析（例如 X 射线晶体衍射）。NK-252 在 CDAA 大鼠 NASH 模型中的抗纤维化作用归因于 Nrf2 的激活，从而发挥抗氧化、保肝、抗炎和直接调节肝星状细胞的作用。NK-252 可能延缓 NASH 患者肝纤维化的发展。[1] |
| 分子式 |
C13H11N5O3
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|---|---|
| 分子量 |
285.2581
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| 精确质量 |
285.086
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| CAS号 |
1414963-82-8
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| PubChem CID |
71618700
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
2.51
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| tPSA |
106.08
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
21
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| 分子复杂度/Complexity |
357
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
FNSCFQXZZNCDAI-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C13H11N5O3/c19-12(15-8-9-4-1-2-6-14-9)16-13-18-17-11(21-13)10-5-3-7-20-10/h1-7H,8H2,(H2,15,16,18,19)
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| 化学名 |
1-[5-(furan-2-yl)-1,3,4-oxadiazol-2-yl]-3-(pyridin-2-ylmethyl)urea
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 29 mg/mL (~101.66 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.29 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.29 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.29 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.5056 mL | 17.5279 mL | 35.0557 mL | |
| 5 mM | 0.7011 mL | 3.5056 mL | 7.0111 mL | |
| 10 mM | 0.3506 mL | 1.7528 mL | 3.5056 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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