Norisoboldine

别名: 去甲异波尔定;NOR异BOLDINE(P);去甲基异波尔定;去甲异波尔定(标准品);去甲异波尔定(去甲基异波尔定);去甲异波尔定,Norisoboldine,植物提取物,标准品,对照品;去甲基异波尔定Norisoboldine;去甲基异波尔定对照品;去甲异波尔定(去甲基异波尔定,新木姜子碱);去甲异波尔定
目录号: V31295 纯度: ≥98%
Norisoboldine 是一种口服生物活性天然芳烃受体 (AhR) 激动剂。
Norisoboldine CAS号: 23599-69-1
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
50mg
100mg
250mg
500mg
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  • 去甲异波尔定盐酸盐
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产品描述
Norisoboldine 是一种口服生物活性天然芳烃受体 (AhR) 激动剂。 Norisoboldine 作为森林人参中的主要异喹啉生物碱,可用于类风湿性关节炎和溃疡性结肠炎的研究/研究。
生物活性&实验参考方法
靶点
Norisoboldine targets aryl hydrocarbon receptor (AhR) - selective agonist [2]
Norisoboldine modulates glycolysis pathway and NAD+/SIRT1/SUV39H1/H3K9me3 signaling pathway [2]
体外研究 (In Vitro)
在缺氧微环境中,norisoboldine(1~30 μM;0~24 小时;CD4+T 细胞)激活 AhR 并显着减少 miR-31 mRNA 的产生 [2]。在缺氧环境中,norisoboldine(30 μM;0~24 小时;CD4+T 细胞)可减缓糖酵解 [2]。在缺氧环境中,norisoboldine(1~30 μM;0~72 小时;Treg 细胞)刺激 Treg 分化[2]。 norisoboldine (10, 30 μM) 促进 AhR/ARNT 复合物的形成、AhR 的核转位以及 HSP90/AhR 复合物的解离。在缺乏 miR-31 的情况下,norisoboldine 会刺激缺氧环境中 Treg 细胞的产生 [2]。
1. 促进调节性T细胞(Treg)分化:
- 去甲异波尔定Norisoboldine)(10、20、40 μM)以浓度依赖方式促进小鼠脾脏CD4+ T细胞向Treg分化,40 μM时Foxp3+ Treg比例从对照组的5.2%升至12.8% [2]
- 该效应可被AhR拮抗剂CH223191阻断,证实其依赖AhR的作用机制 [2]
2. 抑制T细胞糖酵解:
- 去甲异波尔定Norisoboldine)(20、40 μM)抑制活化CD4+ T细胞的糖酵解,40 μM时葡萄糖消耗减少35%,乳酸生成减少42% [2]
- 下调糖酵解关键酶(HK2、PFK1、LDHA)的蛋白表达,mRNA水平降低45-60%(RT-qPCR检测) [2]
3. 调控NAD+/SIRT1/SUV39H1/H3K9me3通路:
- 去甲异波尔定Norisoboldine)(10-40 μM)提高CD4+ T细胞内NAD+水平和SIRT1活性,40 μM组NAD+水平为对照组的2.3倍,SIRT1活性为1.8倍 [2]
- 降低SUV39H1蛋白表达和H3K9me3水平(Western blot检测),该效应可被SIRT1抑制剂EX527逆转 [2]
体内研究 (In Vivo)
Norisoboldine(10~40 mg/kg;口服;20天)在实验过程中显着减轻了关节肿胀和红斑的严重程度[1]。 Norisoboldine(40 mg/kg;ig;10 天)促进结肠中 CYP1A1 表达升高并抑制 Glut1 和 HK2 表达 [2]。
酶活实验
1. AhR报告基因实验:
- HEK293T细胞共转染AhR表达质粒和XRE-荧光素酶报告质粒 [2]
- 转染后的细胞用去甲异波尔定Norisoboldine)(1-40 μM)或AhR激动剂TCDD(阳性对照)处理24小时 [2]
- 用 luminometer 检测荧光素酶活性,计算相对荧光素酶单位(RLU)以评估AhR激活程度 [2]
2. 糖酵解酶活性测定:
- 制备去甲异波尔定Norisoboldine)(20、40 μM)处理的CD4+ T细胞胞质提取物 [2]
- 将提取物与HK2、PFK1、LDHA的特异性底物分别在对应实验缓冲液中孵育 [2]
- 检测340 nm处NADPH生成量评估HK2活性;监测NADH氧化程度评估PFK1活性;检测丙酮酸还原水平评估LDHA活性 [2]
3. SIRT1活性测定:
- 制备去甲异波尔定Norisoboldine)(10-40 μM)处理的CD4+ T细胞核提取物 [2]
- 将提取物与SIRT1底物(乙酰化p53肽段)和NAD+在实验缓冲液中混合,37°C孵育1小时 [2]
- 用特异性抗体检测去乙酰化肽段,通过450 nm处吸光度量化SIRT1活性 [2]
细胞实验
Western Blot 分析[2]
细胞类型: CD4+T 细胞
测试浓度: 1~30 μM
孵育时间:24小时
实验结果:细胞内AhR在缺氧微环境下被激活。

RT-PCR[2]
细胞类型: CD4+T 细胞
测试浓度: 1~30 μM
孵育持续时间:24小时
实验结果:miR-31 mRNA表达显着下调。

免疫荧光[2]
细胞类型: CD4+T 细胞
测试浓度: 30 μM
孵育时间:24小时
实验结果:缺氧时糖酵解受到抑制。细胞分化实验 [2]
细胞类型: Treg 细胞
测试浓度: 1~30 μM
孵育时间: 72小时
实验结果:低氧条件下促进Treg细胞分化。
1. CD4+ T细胞分离与Treg分化实验:
- 磁珠分选法从小鼠脾脏中分离CD4+ T细胞 [2]
- 细胞在添加抗CD3、抗CD28抗体、IL-2和TGF-β1的RPMI 1640培养基中培养,诱导Treg分化 [2]
- 细胞用去甲异波尔定Norisoboldine)(10、20、40 μM)单独处理或联合AhR拮抗剂CH223191处理72小时 [2]
- 流式细胞术(Foxp3-PE染色)分析Foxp3+ Treg比例,RT-qPCR检测Foxp3 mRNA水平 [2]
2. 糖酵解代谢实验:
- 活化的CD4+ T细胞用去甲异波尔定Norisoboldine)(20、40 μM)处理48小时 [2]
- 比色法试剂盒检测培养上清液中葡萄糖消耗和乳酸生成量 [2]
- Western blot检测HK2、PFK1、LDHA蛋白表达,RT-qPCR检测其mRNA水平 [2]
3. 信号通路蛋白Western blot检测:
- 去甲异波尔定Norisoboldine)(10-40 μM)处理的CD4+ T细胞用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解 [2]
- BCA法测定蛋白浓度,等量蛋白经SDS-PAGE电泳分离 [2]
- 膜与SIRT1、SUV39H1、H3K9me3和内参GAPDH一抗孵育,随后加入二抗 [2]
- 检测化学发光信号并通过成像软件量化 [2]
动物实验
Animal/Disease Models: Male ICR mice (18-22 grams)
Doses: 10~40 mg/kg
Route of Administration: Oral
Experimental Results:The severity of joint swelling and erythema was Dramatically diminished during the experiment.

Animal/Disease Models: Female C57BL/6 mice (18–22 g)
Doses: 40 mg/kg
Route of Administration: Ig
Experimental Results: Induced enhanced CYP1A1 expression and inhibited Glut1 and HK2 expression in the colon.
参考文献

[1]. Therapeutic effect of norisoboldine, an alkaloid isolated from Radix Linderae, on collagen-induced arthritis in mice. Phytomedicine. 2010;17(10):726-731.

[2]. Norisoboldine, a natural AhR agonist, promotes Treg differentiation and attenuates colitis via targeting glycolysis and subsequent NAD+/SIRT1/SUV39H1/H3K9me3 signaling pathway. Cell Death Dis. 2018;9(3):258. Published 2018 Feb 15.

其他信息
据报道,诺里索波尔定存在于番荔枝(Stephania cephalantha)、老氏裂叶草(Fissistigma oldhamii)以及其他有相关数据的生物体中。
- 诺里索波尔定是一种从山茱萸(Lindera aggregata)根中分离得到的天然生物碱[1][2]
- 它通过双重机制发挥抗炎作用:激活芳烃受体(AhR)促进调节性T细胞(Treg)分化,并通过NAD+/SIRT1/SUV39H1/H3K9me3信号通路抑制糖酵解[2]
- 它显示出治疗自身免疫性疾病(包括类风湿性关节炎和炎症性肠病)的潜力[1][2]
- 其抗关节炎作用与促炎细胞因子和抗炎细胞因子平衡的调节有关[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C18H19NO4
分子量
313.3478
精确质量
313.131
CAS号
23599-69-1
相关CAS号
Norisoboldine hydrochloride;5083-84-1
PubChem CID
14539911
外观&性状
Brown to khaki solid powder
密度
1.3±0.1 g/cm3
沸点
553.0±50.0 °C at 760 mmHg
闪点
288.3±30.1 °C
蒸汽压
0.0±1.5 mmHg at 25°C
折射率
1.643
LogP
1.43
tPSA
70.95
氢键供体(HBD)数目
3
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
2
重原子数目
23
分子复杂度/Complexity
433
定义原子立体中心数目
1
SMILES
COC1=C(C2=C3[C@H](CC4=CC(=C(C=C42)OC)O)NCCC3=C1)O
InChi Key
HORZNQYQXBFWNZ-LBPRGKRZSA-N
InChi Code
InChI=1S/C18H19NO4/c1-22-14-8-11-10(6-13(14)20)5-12-16-9(3-4-19-12)7-15(23-2)18(21)17(11)16/h6-8,12,19-21H,3-5H2,1-2H3/t12-/m0/s1
化学名
(6aS)-2,10-dimethoxy-5,6,6a,7-tetrahydro-4H-dibenzo[de,g]quinoline-1,9-diol
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ≥ 62.5 mg/mL (~199.46 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.1913 mL 15.9566 mL 31.9132 mL
5 mM 0.6383 mL 3.1913 mL 6.3826 mL
10 mM 0.3191 mL 1.5957 mL 3.1913 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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