| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
- Enterovirus 71 (EV71) (IC50 = 31.83 μg/ml) [1]
- Janus kinase 2 (JAK2) and signal transducer and activator of transcription 3 (STAT3) [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
去甲汉黄素(0.4、2、10 和 50 μg/mL;48 小时)抑制 EV71 在 Vero 细胞中的复制,并防止 EV71 感染引起的细胞毒性[1]。
去甲汉黄素(50 μg/mL;48 小时)显着降低病毒VP2蛋白表达[1]。 48小时,去甲汉黄素(50 μg/mL)显着降低EV71 NCR基因的表达[1]。 抑制EV71复制:Norwogonin在0.4、2、10和50 μg/ml浓度下处理48小时,可抑制Vero细胞中EV71的复制,阻止EV71感染诱导的细胞毒性。在50 μg/ml浓度下处理48小时,能显著降低病毒VP2蛋白的表达,并强烈减少EV71非编码区(NCR)基因的表达[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
结果:黄芩和白勺药对(HBHP)显著降低DSS诱导的UC小鼠的DAI评分,缩短结肠长度。给予HBHP能够有效地减轻粘膜溃疡和上皮破坏。此外,HBHP治疗显著降低了结肠组织中TNF-α、IL-6和IL-1β的表达(p<0.05或p<0.01)。获得35个与UC相关的生物活性化合物和290个HBHP靶点。其中,在药物-化合物靶向网络中鉴定出3个度值较高的关键活性化合物(黄芩苷、穿心莲素和norwogonin)和21个枢纽基因(STAT3、JAK2、SRC、AKT1、PIK3CA和VEGFA等)。KEGG富集分析表明,HBHP的机制主要涉及JAK-STAT途径。JAK/STAT信号的异常激活被认为与UC的发病机制有关。值得注意的是,WB和IHC显示HBHP显著下调p-JAK2(p<0.05)和p-STAT3(p<0.05或p<0.01)的蛋白表达水平。JAK2和STAT3可能是HBHP作用的核心靶点;分子对接也支持了这种可能性。[2]
结论:HBHP可减轻DSS诱导的UC,减轻组织炎症,其机制可能主要通过抑制JAK2/STAT3信号通路来实现。同时,我们的工作表明,网络药理学与实验验证相结合是研究中药作用机制的有力手段。[2] 缓解溃疡性结肠炎:含有Norwogonin的黄芩-白芍药对可缓解葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎。它能降低疾病活动指数(DAI)评分,减轻结肠缩短程度,缓解黏膜溃疡和上皮损伤,还能降低结肠组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)的表达。其作用机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关,可显著下调p-JAK2和p-STAT3的蛋白表达水平[2] |
| 细胞实验 |
在本研究中,使用细胞病变效应(CPE)还原法评估了黄芩中的去骨原素、oroxylinA和mosloflavone的抗EV71活性,结果表明这三种化合物都具有较强的抗EV七十一活性,并减少了可见CPE的形成。在病毒感染的初始阶段,Norwogonin、oroxylinA和mosloflavone也抑制了病毒的复制,它们抑制了病毒VP2蛋白的表达,从而抑制了病毒衣壳蛋白的合成。然而,与其他药物相比,利巴韦林的疗效相对较弱。因此,这些发现提供了重要的信息,将有助于利用norwogonin、oroxylinA和mosloflavone治疗EV71[1]。
抗病毒活性测定[1] 抗病毒活性的测定是用SRB方法进行的,该方法评估细胞病变效应(CPE)的减少,这是Choi等人先前报道的。(2009a)。观察了norwogonin、oroxylina和mosloflavone对EV71诱导的CPE的影响。简言之,将Vero细胞以每孔2×104个细胞的浓度接种到96孔培养板上。第二天,取出培养基并用PBS洗涤,加入0.09mL含有TCID50(50%组织培养感染剂量)病毒原液的EV71稀释病毒悬浮液,以在感染后2天内产生适当的细胞病变作用,并加入0.01mL去甲精素、oroxylinA、mosloflavone和利巴韦林(分别为0.4、2、10和50μg/mL)。在37°C的5%CO2中孵育2天后,在32×10放大倍数的显微镜下观察细胞的形态,并记录图像。 添加测定时间[1] 根据先前描述的程序(Chiang et al.,2003),对norwogonin、oroxylinA和mosloflavone的添加时间效应进行了轻微修改。将Vero细胞以每孔2×104个细胞的密度接种到96孔培养板上,并孵育1天。用磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤后,在EV71感染前(−1小时)、感染期间(0小时)或感染后(1、2、4、6和8小时),向细胞中加入50μg/mL的去甲精、oroxylinA和mosloflavone。2天后,使用SRB测定法检测抗病毒活性,并使用利巴韦林作为阳性对照。 - Vero细胞实验:将Vero细胞以每孔1×10^4个细胞的密度接种于96孔板,孵育过夜。随后以0.1的感染复数(MOI)用EV71感染细胞,同时用不同浓度的Norwogonin(0.4、2、10和50 μg/ml)处理。孵育48小时后,通过MTT法检测细胞活力以评估对EV71复制的抑制作用;采用Western blot检测病毒VP2蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测EV71 NCR基因的表达水平[1] - 动物实验方案 - 溃疡性结肠炎小鼠实验:通过让小鼠饮用3% DSS溶液7天诱导溃疡性结肠炎。对小鼠给予含有Norwogonin的黄芩-白芍药对,文献中未提及具体给药途径和频率。之后,根据体重减轻、腹泻和便血情况每日计算DAI评分。实验结束后,测量结肠长度,收集结肠组织进行组织学检查和细胞因子表达水平检测,以及通过Western blot和免疫组织化学检测p-JAK2和p-STAT3蛋白的表达[2] |
| 动物实验 |
首先,建立了葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(UC)模型。将小鼠随机分为对照组、DSS组、SASP组(390 mg/kg)和HPHP组(1.95 g/kg),每组8只。药物通过灌胃给药,连续7天。然后,分析疾病活动指数(DAI)、结肠长度、组织病理学以及结肠组织中炎症细胞因子的变化,以评估HBHP对UC的疗效。此外,应用网络药理学方法鉴定HBHP治疗UC的活性成分、核心靶点及其相应的信号通路,以探索其潜在机制。最后,采用蛋白质印迹法(WB)、免疫组织化学(IHC)和分子对接来验证结果。[2]
如前所述,通过在饮用水中添加3.5% (w/v) DSS(分子量36–50 kDa)诱导小鼠溃疡性结肠炎(UC),连续7天自由饮水。小鼠随机分为四组(每组n = 8):对照组(普通饮用水+每日一次口服普通水)、DSS组(DSS饮用水+每日一次口服普通水)、SASP组(DSS饮用水+每日一次口服390 mg/kg SASP)和HPHP组(DSS饮用水+每日一次口服1.95 g/kg HBHP)。此处使用的HBHP剂量是根据人体临床剂量(成人每日15 g)按体表面积换算计算的。[2] DSS溶液每日更换。灌胃给药与DSS饮用水同时开始。每日监测小鼠体重、粪便性状和粪便隐血情况。实验结束时,处死所有小鼠并收集结肠标本。测量结肠长度后,立即置于−80 °C保存或用10%多聚甲醛固定,以备后续实验。[2] - 小鼠溃疡性结肠炎实验:小鼠饮用3% DSS溶液7天诱导溃疡性结肠炎。给予小鼠黄芩-白芩中药对(含诺龙胆素),具体给药途径和频率文献中未提及。然后,根据体重减轻、腹泻和便血等指标每日计算DAI评分。实验结束后,测量结肠长度,收集结肠组织进行组织学检查和细胞因子表达水平检测,并通过蛋白质印迹法和免疫组织化学法检测p-JAK2和p-STAT3蛋白的表达[2] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
诺沃黄酮是一种三羟基黄酮,其羟基位于C-5、-7和-8位。它具有抗氧化和代谢活性。
据报道,诺沃黄酮存在于黄芩(Scutellaria discolor)、攀缘黄芩(Scutellaria scandens)和其他有相关数据的生物体中。 诺沃黄酮是从黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)中分离得到的一种黄酮类化合物。由于其在体外对EV71具有抑制作用,因此具有治疗EV71相关疾病的潜力。它也是黄芩-白芩中药对的主要活性成分之一,该药对通过抑制JAK2/STAT3信号通路在缓解溃疡性结肠炎方面发挥重要作用。 |
| 分子式 |
C15H10O5
|
|---|---|
| 分子量 |
270.2369
|
| 精确质量 |
270.053
|
| CAS号 |
4443-09-8
|
| PubChem CID |
5281674
|
| 外观&性状 |
Typically exists as yellow to orange solids at room temperature
|
| 密度 |
1.548g/cm3
|
| 沸点 |
528.4ºC at 760 mmHg
|
| 熔点 |
258 ºC (ethanol )
|
| 闪点 |
206ºC
|
| 折射率 |
1.732
|
| 来源 |
Scutellaria baicalensis Georgi
|
| LogP |
2.576
|
| tPSA |
90.9
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
1
|
| 重原子数目 |
20
|
| 分子复杂度/Complexity |
413
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O1C(C2C([H])=C([H])C([H])=C([H])C=2[H])=C([H])C(C2C(=C([H])C(=C(C1=2)O[H])O[H])O[H])=O
|
| InChi Key |
ZFKKRRMUPBBYRS-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C15H10O5/c16-9-6-11(18)14(19)15-13(9)10(17)7-12(20-15)8-4-2-1-3-5-8/h1-7,16,18-19H
|
| 化学名 |
5,7,8-trihydroxy-2-phenylchromen-4-one
|
| 别名 |
5,7,8-Trihydroxyflavone;5,7,8-Trihydroxy-2-phenyl-4H-chromen-4-one;FLAVONE, 5,7,8-TRIHYDROXY-; NSC-128304;
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~250 mg/mL (~925.10 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.70 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.7004 mL | 18.5021 mL | 37.0041 mL | |
| 5 mM | 0.7401 mL | 3.7004 mL | 7.4008 mL | |
| 10 mM | 0.3700 mL | 1.8502 mL | 3.7004 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
|
|
|
|