| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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描述： NSC697923（NSC 697923；NSC-697923）是一种强效、细胞渗透性强且选择性的泛素结合酶E2 (UBE2) 复合物Ubc13-Uev1A抑制剂，具有潜在的抗癌活性。NSC697923能够抑制弥漫性大B细胞淋巴瘤 (DLBCL) 细胞的增殖和存活。重要的是，NSC697923能够诱导细胞凋亡。它还能诱导p53在细胞核内积累，从而增强其转录活性和抑癌功能。NSC697923通过抑制Ubc13-Uev1A复合物的形成来阻断其生成，而Ubc13-Uev1A复合物是DLBCL细胞生长的关键组成部分。从长远来看，细胞若缺乏 Ubc13 表达则无法存活。综上所述，化合物 NSC697923 是 DLBCL 细胞存活的有效抑制剂。
| 靶点 |
Ubc13-Uev1A complex (also known as UBE2N-UBE2V1) [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
NSC697923 选择性抑制 PMA 诱导的 NF-κB 活化，并抑制 RANKL 和 LPS 诱导的 IκBα 磷酸化。NSC697923 阻碍 Ubc13 与泛素硫酯缀合物的形成，并抑制 ABC-DLBCL 细胞中组成型 NF-κB 活性。此外，NSC697923 抑制 ABC-DLBCL 细胞和 GCB-DLBCL 细胞的增殖和存活，并诱导原代 DLBCL 细胞凋亡。在神经母细胞瘤 (NB) 细胞系中，NSC697923 显示出细胞毒性作用，并抑制锚定依赖性和非锚定依赖性克隆形成。NSC697923 在 2 µM 浓度下抑制 293T-NF-luc 细胞中 PMA 诱导的 NF-κB 活化，但不抑制 TNFα 诱导的活化（图 1）。 [1]
在 RAW264.7 和 MEF 细胞中，该化合物可抑制 RANKL (15 ng/mL) 和 LPS (1.5 µg/mL) 诱导的 IκBα 磷酸化（图 3）。[1] 在 OCI-Ly10 细胞中，该化合物在 0.5-2 µM 浓度下作用 3 小时可抑制 Ubc13~Ub 硫酯缀合物的形成（图 5A）。[1] 在 ABC-DLBCL 细胞中，该化合物可抑制组成型 NF-κB 信号通路：在 0.5-2 µM 浓度下作用 3.5 小时，可降低 OCI-Ly10 细胞中 IKK 和 IκBα 的磷酸化水平，并降低 NF-κB 靶标 p100 和 Mcl-1 的表达（图 5B）。 [1] 它抑制ABC-DLBCL细胞（OCI-Ly3、OCI-Ly10、HBL-1）的增殖和存活：用0.5-2 µM处理24小时可导致活细胞数量显著减少，死亡细胞数量显著增加（图5C）。[1] 它诱导OCI-Ly10细胞凋亡：用1-2 µM处理5小时可激活caspase-3并切割PARP（图5D）；用0.5-2 µM处理24小时可增加Annexin V阳性细胞数量（图5E）。[1] 它抑制细胞周期进程：用1-2 µM处理OCI-Ly10细胞5小时可导致S期细胞数量显著减少（图5F）。 [1] 它还能抑制GCB-DLBCL细胞（OCI-Ly7、SUDHL-6）的增殖和存活：在0.5-2 µM浓度下处理24小时，可减少活细胞数量并诱导细胞凋亡（图6A-B）。[1] 它还能诱导两名患者的原代DLBCL细胞凋亡：在0.5-2 µM浓度下处理24小时，可增加Annexin V阳性细胞的数量（图7）。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
NSC697923（5 mg/kg/天，腹腔注射）在 NB SH-SY5Y 和 NGP 异种移植瘤中均显示出强大的抗肿瘤疗效。
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| 酶活实验 |
反应在含有 50 mM Tris-HCl（pH 7.5）、5 mM MgCl₂、200 μM ATP、120 μM Ub (U-100H) 和 0.1 μM E1 (E-304) 的缓冲液中于 37°C 下进行 40 分钟。对于 Ubc13 介导的泛素链合成，反应混合物包含 0.2 μM Ubc13 (E2-600) 和 0.2 mM Uev1A (E2-662)，并可添加或不添加 GST-TRAF6。对于 UbcH5c 催化的泛素化，反应中使用 UbcH5c (E2-627) 代替 Ubc13 和 Uev1A。化合物 NSC697923 以指定浓度添加到反应混合物中。反应用等体积的SDS-PAGE上样缓冲液终止，产物用Ub特异性抗体进行Western blotting分析。检测E2-Ub（Ubc13∼Ub或UbcH5c∼Ub）硫酯缀合物时，反应按照“体外泛素化实验”所述进行，但不添加GST-TRAF6。除非另有说明，反应通过加入SDS-PAGE上样缓冲液终止，不添加还原剂。产物用抗Ubc13或抗UbcH5c抗体进行Western blotting分析。
体外泛素化实验：反应在37°C下进行40分钟，反应缓冲液包含50 mM Tris-HCl（pH 7.5）、5 mM MgCl2、200 µM ATP、120 µM泛素和0.1 µM E1。对于 Ubc13 介导的泛素链合成，反应混合物包含 0.2 µM Ubc13 和 0.2 mM Uev1A，并添加或不添加 GST-TRAF6。NSC697923 以指定浓度（0.5、1、2 µM）加入。使用泛素特异性抗体通过蛋白质印迹法分析产物。该化合物以剂量依赖的方式抑制多聚泛素链的形成（图 4A-B）。[1] 为了检测 E2-泛素硫酯缀合物，反应如上所述进行，但不添加 GST-TRAF6，用不含还原剂的 SDS-PAGE 上样缓冲液终止反应，并使用抗 Ubc13 或抗 UbcH5c 抗体通过蛋白质印迹法分析。 NSC697923抑制了Ubc13~Ub缀合物的形成，但对UbcH5c~Ub缀合物的形成没有抑制作用（图4E-F）。[1] Ubc13与Uev1A的体外相互作用实验：将结合在谷胱甘肽琼脂糖珠上的GST-Ubc13与OCI-Ly10细胞裂解液在4°C下孵育1小时，孵育过程中加入或不加入NSC697923（1、2 µM）。洗涤珠子后，通过Western blotting分析结合的Uev1A。该化合物对复合物的形成没有抑制作用（图4D）。[1] |
| 细胞实验 |
细胞活力采用台盼蓝排除法测定。
细胞培养：HEK293T 细胞培养于含 10% FBS 的 DMEM 培养基中。DLBCL 细胞（SUDHL-6、OCI-Ly3、OCI-Ly7、OCI-Ly10、HBL-1）的培养方法如前所述。原代 DLBCL 细胞取自新鲜患者肿瘤，通过机械破碎和过滤制备。[1] NF-κB 荧光素酶报告基因检测：将 293T-NF-luc 细胞（携带稳定整合的 NF-κB 荧光素酶报告基因并组成型表达 GFP）以 30,000 个细胞/孔的密度接种于 96 孔板中。在用 PMA (100 ng/mL) 或 TNFα (10 ng/mL) 刺激前 1.5 小时，加入终浓度为 2 µM 的化合物。6 小时后，裂解细胞并测定荧光素酶活性，并以 GFP 荧光强度进行标准化。 NSC697923抑制了PMA诱导的NF-κB活化，但对TNFα诱导的NF-κB活化无影响（图1B-C）。[1] 细胞活力检测：将细胞以3×10⁵个/mL的密度接种于6孔板中，用DMSO或NSC697923（0.5、1、2 µM）处理24小时，然后用台盼蓝染色排除法计数活细胞和死细胞。[1] 细胞凋亡检测：按上述方法处理细胞，用7AAD/Annexin V染色，并通过流式细胞术进行分析。[1] 细胞周期分析：用NSC697923处理细胞4.5小时，在收集细胞前30分钟加入BrdU，用碘化丙啶和BrdU染色，并通过流式细胞术进行分析。 [1] 蛋白质印迹：用NSC697923处理细胞指定时间后，裂解细胞，并用针对磷酸化IκBα、磷酸化IKK、IκBα、IKK、Mcl-1、p100、裂解caspase-3、PARP等的特异性抗体检测蛋白质。[1] |
| 动物实验 |
溶于DMSO；5 mg/kg；腹腔注射SH-SY5Y和NGP异种移植瘤
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
与对弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）细胞的影响相比，NSC697923 对其他细胞类型（如乳腺癌细胞和骨肉瘤细胞）的增殖和存活的毒性作用要小得多（补充图 S6）。[1]
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| 参考文献 |
Blood.2012 Aug 23;120(8):1668-77;Cell Death Dis.2014 Feb 20;5:e1079.
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| 其他信息 |
NSC697923是从NCI机制化合物库（879个化合物）中通过基于细胞的PKCβ信号通路和NF-κB激活抑制剂筛选而发现的。构效关系分析表明，硝基呋喃部分对其抑制活性至关重要，但并非充分条件（图2）。[1]
该化合物通过特异性抑制Ubc13~Ub硫酯缀合物的形成发挥作用，从而阻断Ubc13-Uev1A介导的K63连接多聚泛素化。[1] 在ABC-DLBCL细胞中，NSC697923对Ubc13的抑制导致NF-κB抑制、p53激活（核内p53和p21表达增加，补充图S3A）以及细胞凋亡。在 GCB-DLBCL 细胞（NF-κB 非依赖性且缺乏功能性 p53）中，该化合物仍能诱导毒性，可能通过 MAP 激酶通路发挥作用。[1] NSC697923 也可能通过抑制 DNA 双链断裂修复来增强癌细胞对放射疗法或化疗的敏感性（补充图 S4）。它与 CHOP 方案联用时，对 DLBCL 细胞表现出叠加的细胞毒性作用（补充图 S5）。[1] 是 DLBCL 的潜在治疗靶点，尤其是 ABC-DLBCL，后者携带 CBM 复合物中的致癌突变，可能对 PKCβ 抑制剂产生耐药性。[1] |
| 分子式 |
C11H9NO5S
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|---|---|---|
| 分子量 |
267.255
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| 精确质量 |
267.02
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| 元素分析 |
C, 49.44; H, 3.39; N, 5.24; O, 29.93; S, 12.00
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| CAS号 |
343351-67-7
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
394449
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| LogP |
3.933
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| tPSA |
101.48
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
18
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| 分子复杂度/Complexity |
402
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=S(C1=CC=C([N+]([O-])=O)O1)(C2=CC=C(C)C=C2)=O
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| InChi Key |
GAUHIPWCDXOLCZ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C11H9NO5S/c1-8-2-4-9(5-3-8)18(15,16)11-7-6-10(17-11)12(13)14/h2-7H,1H3
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| 化学名 |
2-[(4-Methylphenyl)sulfonyl]-5-nitrofuran
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| 别名 |
NSC697923; NSC 697923; NSC-697923
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : 200~53 mg/mL (748.33 ~198.3 mM）
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 5 mg/mL (18.71 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 50.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 5 mg/mL (18.71 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 50.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.7417 mL | 18.7084 mL | 37.4167 mL | |
| 5 mM | 0.7483 mL | 3.7417 mL | 7.4833 mL | |
| 10 mM | 0.3742 mL | 1.8708 mL | 3.7417 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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