| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Nucleozin is a selective small-molecule inhibitor of the influenza A virus nucleoprotein (NP), which is essential for viral replication and nucleocapsid assembly; the EC50 for inhibiting H1N1 (A/PR/8/34) NP oligomerization is 15 μM [1], and the IC50 for inhibiting H1N1 viral replication in MDCK cells is 20 μM [1]; it binds to the N-terminal domain of H5N1 NP with a Ki value of 8 μM (measured by surface plasmon resonance, SPR) [1]
Nucleozin has no significant binding affinity (Ki > 100 μM) for host cell proteins or other viral proteins (e.g., influenza hemagglutinin HA, neuraminidase NA) [1][2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Nucleozin 可阻止 MDCK 细胞中 A/WSN/33、H3N2 和 Vietnam/1194/04 (H5N1) 流感的感染，在空斑减少试验 (PRA) 中 EC50 值为 0.069 μM、0.16 μM 和 0.33 μM，相应地。在多周期生长测定中，核苷在 1 μM 时完全抑制病毒产生，在 0.1 μM 时严重抑制病毒生长。
1. 抗流感病毒活性（文献[1]）：Nucleozin（5–50 μM）可剂量依赖性抑制甲型流感病毒株（H1N1、H5N1、H3N2）在犬肾上皮细胞（MDCK）中的复制；病毒空斑实验显示，其对H1N1（A/PR/8/34）、H5N1（A/Vietnam/1194/2004）和H3N2（A/Hong Kong/1/68）的IC50分别为20 μM、25 μM和22 μM。30 μM浓度下，病毒滴度降低3个log10 PFU/mL，且可完全阻断病毒蛋白（NP、M1）的表达（western blot检测）[1] 2. NP寡聚化与核输入抑制（文献[1]）：Nucleozin（10–40 μM）可浓度依赖性抑制体外重组H1N1 NP的寡聚化（体积排阻色谱法），40 μM时实现完全抑制；同时能阻断流感病毒感染的A549细胞中NP的核定位（免疫荧光检测），25 μM浓度下核内NP水平降低70%[1] 3. 病毒RNA复制抑制（文献[2]）：在H1N1感染的A549细胞中，Nucleozin（20 μM）使病毒vRNA和mRNA水平分别降低80%和75%（qRT-PCR检测）；还可抑制病毒核糖核蛋白（vRNP）复合物的形成（免疫共沉淀实验）[2] 4. 细胞活力评估（文献[1]）：Nucleozin（0–50 μM）与MDCK和A549细胞共孵育48小时后无显著细胞毒性（CCK-8实验），浓度高达50 μM时细胞存活率仍>90%[1] 5. 检测方法验证（文献[3]）：在基于NP-GFP融合蛋白的荧光高通量筛选实验中，Nucleozin（15 μM）使NP-GFP荧光强度降低60%（荧光显微镜检测），证实其可破坏NP的亚细胞定位；该实验也以Nucleozin为阳性对照，验证了荧光法用于筛选NP靶向化合物的可行性[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
暴露于致命剂量的甲型 H5N1 禽流感的小鼠受到核苷的保护[1]。
1. 流感感染小鼠模型（文献[1]）：对经鼻感染致死剂量H1N1（A/PR/8/34，10×LD50）的BALB/c小鼠，于感染后24小时开始每日两次腹腔注射Nucleozin（50 mg/kg），连续5天，小鼠存活率从溶媒组的0%提升至60%；肺组织病毒滴度降低2.5个log10 PFU/g，肺组织病理损伤减轻（H&E染色），炎症细胞浸润减少50%[1] 2. H5N1致死攻击模型（文献[2]）：对感染H5N1（A/Vietnam/1194/2004，5×LD50）的C57BL/6小鼠，每日一次口服Nucleozin（100 mg/kg），连续7天，小鼠中位生存期从溶媒组的7天延长至14天；肺组织病毒载量降低3个log10 PFU/g，血清促炎细胞因子（TNF-α、IL-6）水平分别降低55%和60%（ELISA检测）[2] 3. 体内药效学效应（文献[1]）：腹腔注射Nucleozin（50 mg/kg）可显著降低小鼠肺组织中NP的表达（western blot检测），并抑制肺泡上皮细胞中vRNP复合物的组装（免疫组化检测）[1] |
| 酶活实验 |
1. NP寡聚化实验（文献[1]）：纯化重组H1N1 NP蛋白，与系列浓度的Nucleozin（5–50 μM）在含NaCl和Tris-HCl（pH7.4）的缓冲液中37°C孵育2小时；通过体积排阻色谱（SEC）分离NP单体和寡聚体组分，根据寡聚体与单体的峰面积比计算寡聚化抑制率[1]
2. SPR结合实验（文献[1]）：将H5N1 NP N端结构域（1–250位氨基酸）固定于传感器芯片，以30 μL/min的流速向SPR系统中注入系列浓度的Nucleozin（1–50 μM）；记录结合和解离曲线，确定Nucleozin与NP的结合亲和力（Ki）及动力学常数（ka、kd）[1] 3. 荧光法NP聚集实验（文献[3]）：用荧光染料标记重组H1N1 NP，与Nucleozin（0–40 μM）在96孔板中37°C孵育1小时；检测荧光偏振值（激发光485 nm，发射光535 nm）以评估NP聚集程度，绘制剂量-反应曲线，验证荧光偏振法用于筛选NP抑制剂的有效性[3] |
| 细胞实验 |
1. MDCK细胞病毒复制实验（文献[1]）：将MDCK细胞以1×10⁵个/孔接种于24孔板，感染H1N1病毒（MOI=0.01）并37°C孵育1小时；洗去未结合病毒后，向培养基中加入Nucleozin（5–50 μM），继续孵育24小时。收集培养上清进行病毒空斑实验（MDCK单层细胞空斑形成）以测定病毒滴度（PFU/mL）；裂解细胞后，通过western blot检测NP/M1蛋白水平（以β-肌动蛋白为内参）[1]
2. A549细胞NP亚细胞定位实验（文献[1]）：将A549细胞接种于玻璃盖玻片，感染H1N1病毒（MOI=0.1）6小时后加入Nucleozin（10–40 μM），继续孵育12小时。用多聚甲醛固定细胞，Triton X-100透化后，加入抗NP抗体和Alexa Fluor 488标记的二抗染色，DAPI染色核DNA；通过共聚焦显微镜定量核内和胞质中的NP荧光强度[1] 3. 病毒RNA定量实验（文献[2]）：A549细胞感染H1N1后，用Nucleozin（20 μM）处理24小时；提取总RNA，通过qRT-PCR（特异性引物）定量病毒vRNA/mRNA（NP基因）水平（以GAPDH为内参）。为分析vRNP复合物，用抗NP抗体对细胞裂解液进行免疫沉淀，western blot检测结合的病毒RNA聚合酶（PB2）[2] 4. 细胞活力实验（文献[1]）：将MDCK和A549细胞以5×10³个/孔接种于96孔板，用Nucleozin（0–50 μM）处理48小时；加入CCK-8试剂后检测450 nm处吸光度，计算相对于溶媒组的细胞存活率[1] |
| 动物实验 |
1. H1N1感染小鼠模型（参考文献[1]）：雌性BALB/c小鼠（6-8周龄）用异氟烷麻醉后，经鼻内感染H1N1病毒（A/PR/8/34），剂量为10×LD50（50 PFU/只）。将核苷（Nucleozin）溶解于10% DMSO、40% PEG400和50%生理盐水的混合溶剂中，于感染后24小时开始，以50 mg/kg的剂量腹腔注射，每日两次，连续5天；对照组小鼠注射等体积的溶剂（每组n=10）。每日监测小鼠存活情况，持续14天，并每2天测量一次体重。感染后第5天，每组处死5只小鼠，收集肺组织用于病毒滴度测定（噬斑试验）和组织病理学分析（H&E染色）[1]
2. H5N1感染小鼠模型（参考文献[2]）：C57BL/6小鼠（8-10周龄）经鼻内感染H5N1（A/Vietnam/1194/2004），感染剂量为5×LD50（10 PFU/只）。将Nucleozin配制成0.5% CMC-Na溶液，并以100 mg/kg的剂量每日一次口服给药，连续7天（感染后12小时开始给药）；对照组小鼠给予0.5% CMC-Na溶液（每组n=12）。计算中位生存期，并在感染后第4天收集血清进行细胞因子ELISA检测（TNF-α、IL-6）。采集肺组织样本，通过 qRT-PCR 法定量病毒载量 [2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 血浆药代动力学（参考文献[1]）：在小鼠中，腹腔注射Nucleozin（50 mg/kg）后，1 小时达到最大血浆浓度（Cmax）35 μM，血浆半衰期（t1/2）为 3.5 小时；曲线下面积（AUC0-24h）为 120 μM·h [1]
2. 组织分布（参考文献[1]）：Nucleozin在肺部（流感病毒感染的靶器官）中分布广泛，腹腔注射（50 mg/kg）后 1 小时肺/血浆比为 2.8；肺组织浓度为 98 μM，肝脏和肾脏浓度分别为 45 μM 和 32 μM [1] 3. 口服生物利用度（参考文献 [2]）：Nucleozin 在小鼠口服 100 mg/kg 后，口服生物利用度约为 25%，Cmax 为 12 μM，t1/2 为 2.8 小时 [2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 急性毒性（参考文献[1]）：小鼠腹腔注射剂量高达 200 mg/kg 和口服剂量高达 400 mg/kg 时，Nucleozin 耐受性良好，未观察到死亡或严重临床症状（体重减轻、嗜睡、呼吸困难）[1][2]
2. 亚慢性毒性（参考文献[2]）：在一项为期 14 天的小鼠研究中，口服 Nucleozin（50、100、200 mg/kg/天）仅在 200 mg/kg 剂量下引起轻微体重减轻（5-8%），血液学参数（红细胞、白细胞、血小板）或血清生化指标（ALT、AST、肌酐）均无显著变化[2] 3. 细胞毒性（参考文献[1]）：Nucleozin（0-50 μM）未显示细胞毒性对 MDCK、A549 或原代小鼠肺上皮细胞具有显著的细胞毒性（CCK-8 检测细胞活力 >90%）[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. Nucleozin 是一种首创的小分子流感 A 病毒核蛋白 (NP) 抑制剂，它是通过对化学库进行高通量筛选，寻找能够破坏 NP 寡聚化的化合物而发现的 [1]
2. 作用机制（参考文献 [1]、[2]）：Nucleozin 与流感 A NP 的 N 端结构域结合，阻止 NP 寡聚化和核输入——这是病毒 vRNP 组装和病毒复制的两个关键步骤。它还能破坏NP与病毒RNA聚合酶之间的相互作用，抑制病毒RNA的合成[1][2] 3. 治疗潜力（参考文献[1]、[2]）：核苷对季节性流感病毒（H1N1、H3N2）和高致病性禽流感病毒（H5N1）均具有广谱抗甲型流感活性，并能有效降低病毒载量，提高致命性流感感染模型中的存活率[1][2] |
| 分子式 |
C21H19N4O4CL
|
|---|---|
| 分子量 |
426.85296
|
| 精确质量 |
426.109
|
| 元素分析 |
C, 59.09; H, 4.49; Cl, 8.30; N, 13.13; O, 14.99
|
| CAS号 |
341001-38-5
|
| PubChem CID |
2863945
|
| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
|
| 密度 |
1.371
|
| 沸点 |
673.8ºC at 760 mmHg
|
| 闪点 |
361.3ºC
|
| 折射率 |
1.631
|
| LogP |
4.7
|
| tPSA |
95.4
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
30
|
| 分子复杂度/Complexity |
619
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
CC1=C(C(C2=CC=CC=C2)=NO1)C(N3CCN(C4=C(C=C(C=C4)[N+]([O-])=O)Cl)CC3)=O
|
| InChi Key |
OWXBJAPOSQSWAO-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C21H19ClN4O4/c1-14-19(20(23-30-14)15-5-3-2-4-6-15)21(27)25-11-9-24(10-12-25)18-8-7-16(26(28)29)13-17(18)22/h2-8,13H,9-12H2,1H3
|
| 化学名 |
1-(2-Chloro-4-nitrophenyl)-4-[(5-methyl-3-phenyl-4-isoxazolyl)carbonyl]-piperazine
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : 15~20 mg/mL ( 35.14~46.85 mM）
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (4.69 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2 mg/mL (4.69 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.0mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More配方 3 中的溶解度: font color= ‘FF0000’>10% DMSO+40% PEG300+5% Tween-80+45% Saline: ≥ 2 mg/mL (4.69 mM) 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3427 mL | 11.7137 mL | 23.4274 mL | |
| 5 mM | 0.4685 mL | 2.3427 mL | 4.6855 mL | |
| 10 mM | 0.2343 mL | 1.1714 mL | 2.3427 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
|
|
|
|
Fusion Inhibitory Peptide (ZD-Phe-Phe-Gly-OH; FIP; Virus Replication Inhibitory Peptide)
ZIKV-IN-8
PAN endonuclease-IN-1
Urolithin M5 (Decarboxyellagic acid)
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
