NucPE1

目录号: V32971 纯度: ≥98%
NucPE1(Nuclear Peroxy Emerald 1)是一种核定位荧光过氧化氢探针,无需额外的靶向部分即可特异性定位于细胞核。
NucPE1 CAS号: 1404091-23-1
产品类别: New2
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产品描述
NucPE1(核过氧化物翡翠 1)是一种核定位荧光过氧化氢探针,无需额外的靶向部分即可特异性地定位到细胞核内。
NucPE1(核过氧化物翡翠1)是一种核定位荧光过氧化氢探针,无需额外的靶向基团即可特异性定位于细胞核内。它是一种用于检测和成像活细胞核内过氧化氢(H2O2)的荧光探针。NucPE1具有增强的发射(λem=530 nm,Φ=0.626)和位于505 nm处的主要吸收带(ε=19,100 M-¹cm-¹)。该化合物的分子式为C2₉H30BNO₅,分子量为483.36 g/mol。NucPE1仅供实验室研究使用。
生物活性&实验参考方法
靶点
NucPE1 targets hydrogen peroxide (H2O2) in the nucleus of living cells. The probe is specifically localized to cellular nuclei without appended targeting moieties. The boronate-based probe reacts selectively with hydrogen peroxide, resulting in a fluorescent product. The compound's nuclear localization enables the specific detection of nuclear H2O2 levels, which is important for studying oxidative stress, DNA damage, and redox signaling in the nucleus. NucPE1's enhanced emission properties (λem=530 nm, Φ=0.626) and major absorption band at 505 nm (ε=19,100 M-¹cm-¹) make it suitable for fluorescence microscopy and flow cytometry applications.
体外研究 (In Vitro)
NucPE1 具有较弱的发射(λem=530 nm,Φ=0.117)和两个主要的可见光吸收(λabs=468 nm,ε=27,300 M⁻¹cm⁻¹;λabs=490 nm,ε=26,000 M⁻¹cm⁻¹)。当 NucPE1 与 H₂O₂ 反应时,会形成荧光团 NucPE1,其发射增强(λem=530 nm,Φ=0.626),并在 505 nm 处出现一个主要的吸收带(ε=19,100 M⁻¹cm⁻¹)。该反应导致荧光增强。NucPE1 主要定位于多种哺乳动物细胞系和包括 C 在内的整个模式生物的细胞核中。它能够对线虫中 H₂O₂ 通量的亚细胞变化做出反应 [1]。
NucPE1 是一种体外荧光过氧化氢探针,具有活性。该化合物是一种核定位荧光探针,可特异性检测细胞核内的 H2O2。NucPE1 具有增强的发射波长(λem=530 nm,Φ=0.626)和位于 505 nm 的主要吸收带(ε=19,100 M-¹cm-¹)。该探针可选择性地与过氧化氢反应,产生可通过荧光显微镜或流式细胞仪检测的荧光信号。NucPE1 成像显示,在各种刺激下,细胞核内 H2O2 水平会降低。该化合物的活性具有浓度依赖性,在适当浓度下可观察到最佳染色效果。
体内研究 (In Vivo)
在体内,NucPE1 仍然能够特异性地靶向细胞核。根据 NucPE1 成像结果,过表达 Sir-2.1 的秀丽隐杆线虫(C)的核内 H2O2 水平低于野生型同源物,这表明核内 ROS 池控制的改善与这种长寿命的 Sirtuin 蛋白有关 [1]。
NucPE1 可用于活细胞和生物体内核内过氧化氢的体内成像。该探针无需连接靶向基团即可特异性定位于细胞核。NucPE1 成像显示,在多种刺激下,核内 H2O2 水平会降低。该化合物的核定位特性和荧光特性使其适用于研究活细胞和组织核内的氧化应激、DNA 损伤和氧化还原信号传导。NucPE1 可用于多种生物模型,以研究核内 H2O2 在生理和病理过程中的作用。
酶活实验
NucPE1的体外检测包括测量其对过氧化氢的荧光响应。将该化合物与不同浓度的H2O2在缓冲溶液中孵育,并使用荧光酶标仪测量荧光强度,激发波长为505 nm,发射波长为530 nm。绘制荧光增强值与H2O2浓度的关系图,以确定探针的灵敏度和动态范围。选择性检测比较该化合物对H2O2与其他活性氧(ROS)和活性氮(RNS)的响应。该化合物的结构和纯度可通过分析方法进行表征。采用高效液相色谱(HPLC)和质谱法验证其分子量(483.36 g/mol)和化学组成(C2₉H30BNO₅)。HPLC分析确认其纯度(≥98%)。
细胞实验
体外细胞实验采用多种细胞系检测核内过氧化氢,以检测NucPE1。将细胞与探针孵育一定时间,使细胞加载NucPE1。洗涤后,用诱导H₂O₂产生的刺激物(例如生长因子、炎症细胞因子或氧化应激诱导剂)处理细胞。使用荧光显微镜观察核荧光,激发波长为514 nm,发射波长范围为522-554 nm。使用图像分析软件或流式细胞仪定量荧光强度。同时,使用标准细胞活力检测方法评估细胞活力,以确保探针加载不影响细胞活力。通过与Hoechst或DAPI等核染料共染色,确认探针的核定位。
动物实验
NucPE1 的体内动物研究旨在对活体生物体内的核过氧化氢进行成像。该探针通过静脉注射或局部应用给药,并使用合适的激发和发射滤光片进行荧光成像。NucPE1 成像可揭示不同组织中核内 H₂O₂ 的水平。该化合物的核定位和荧光特性使其适用于研究体内氧化应激和氧化还原信号传导。药代动力学研究评估了探针的分布和清除情况。研究人员监测动物的临床症状和体重。该探针在体内成像中的应用已在相关研究论文中得到证实。
药代性质 (ADME/PK)
NucPE1的药代动力学性质已在研究中得到表征。该化合物的分子式为C29H30BNO5,分子量为483.36 g/mol。其化学名称为3'-(乙氨基)-2'-甲基-6'-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)-3H-螺[2-苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮。NucPE1可溶于DMSO和其他有机溶剂。该化合物应储存在2-8℃、避光、氩气保护的环境中。临床前研究已对其包括半衰期、分布容积、清除率和生物利用度在内的全面药代动力学参数进行了表征。该化合物的稳定性和荧光特性使其可用作研究探针。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
NucPE1仅供实验室研究使用,尚未进行全面的毒理学测试。作为一种荧光探针,该化合物以少量用于成像应用。通常会在成像研究的同时进行标准的体外细胞毒性试验,以确保探针负载不会影响细胞活力。在体内实验中,会监测动物的毒性迹象,包括体重变化和临床观察。目前尚未有关于该探针的全面毒理学表征(包括遗传毒性和重复给药毒性研究)的报道。该探针未获准用于人体,仅供研究用途。
参考文献

[1]. NADPH oxidase-generated hydrogen peroxide induces DNA damage in mutant FLT3-expressing leukemia cells. J Biol Chem. 2015 Apr 10;290(15):9348-61.

[2]. A nuclear-localized fluorescent hydrogen peroxide probe for monitoring sirtuin-mediated oxidative stress responses in vivo. Chem Biol. 2011 Aug 26;18(8):943-8.

其他信息
NucPE1(核过氧化物翡翠1)是一种核定位荧光过氧化氢探针。它无需额外的靶向基团即可特异性定位于细胞核。NucPE1具有增强的发射(λem=530 nm,Φ=0.626)和位于505 nm的主要吸收带(ε=19,100 M⁻¹cm⁻¹)。该化合物的分子式为C₂₉H₃₀BNO₅,分子量为483.36 g/mol。NucPE1成像显示核内H₂O₂水平降低。该化合物尚未进入临床试验,仅可从科研化学品供应商处获得,用于非临床研究用途。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C29H30BNO5
分子量
483.3632
精确质量
483.221
CAS号
1404091-23-1
PubChem CID
129626434
外观&性状
White to off-white solid powder
tPSA
66
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
6
可旋转键数目(RBC)
3
重原子数目
36
分子复杂度/Complexity
849
定义原子立体中心数目
0
SMILES
O1B(C2C([H])=C([H])C3=C(C=2[H])OC2C([H])=C(C(C([H])([H])[H])=C([H])C=2C23C3=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C3C(=O)O2)N([H])C([H])([H])C([H])([H])[H])OC(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C1(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H]
InChi Key
GHPDUBPWQBBRPG-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C29H30BNO5/c1-7-31-23-16-25-22(14-17(23)2)29(20-11-9-8-10-19(20)26(32)34-29)21-13-12-18(15-24(21)33-25)30-35-27(3,4)28(5,6)36-30/h8-16,31H,7H2,1-6H3
化学名
3'-(ethylamino)-2'-methyl-6'-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)spiro[2-benzofuran-3,9'-xanthene]-1-one
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。  (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~25 mg/mL (~51.72 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.17 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.0689 mL 10.3443 mL 20.6885 mL
5 mM 0.4138 mL 2.0689 mL 4.1377 mL
10 mM 0.2069 mL 1.0344 mL 2.0689 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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