O-Propargyl-Puromycin

别名: O-Propargyl-puromycin, OPP, OP-puro
目录号: V32931 纯度: ≥98%
O-Propargyl-Puromycin (OP-puro) 是嘌呤霉素的炔类似物,是蛋白质合成的有效抑制剂。
O-Propargyl-Puromycin CAS号: 1416561-90-4
产品类别: New1
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
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产品描述
O-Propargyl-Puromycin (OP-puro) 是嘌呤霉素的炔类似物,是蛋白质合成的有效抑制剂。 OP-puro 被掺入新生的多肽链中,形成共价加合物并终止核糖体上的链伸长。它已与荧光叠氮化物结合使用,对各种细胞中的新生蛋白质进行成像。
生物活性&实验参考方法
靶点
O-Propargyl-Puromycin (OP-puro) shares the same target as puromycin, which is the ribosomal A site. It binds to the ribosome and mimics the 3' end of aminoacyl-tRNA, leading to premature termination of protein synthesis.
体外研究 (In Vitro)
使用邻炔丙基嘌呤霉素可以可视化并选择性地阻断细胞和动物中正在发育的蛋白质。 O-炔丙基嘌呤霉素在吸附网织红细胞腔和培养细胞中蛋白质合成方面的效果比未修饰的嘌呤霉素低两到三倍。 O-炔丙基-嘌呤霉素与新兴的肘连接铜 (I) 催化的折叠-切换环加成反应允许可视化或捕获这些切换体,这些切换体是快速转变的切换链,形成共价缀合物 [1]。
- OP-puro(1–10 μM)在培养细胞中能有效掺入新生多肽链,通过点击化学与叠氮荧光染料标记后,经荧光显微镜和流式细胞术检测,显示其在测试浓度下无明显细胞毒性,可实时可视化蛋白质合成 [1]
- 用OP-puro(5 μM)处理HeLa细胞30分钟后,新合成的蛋白质被强烈荧光标记,证实其能快速被细胞摄取并整合到活跃翻译的核糖体中 [1]
体内研究 (In Vivo)
注射 O-炔丙基-嘌呤霉素的小鼠组织表明该药物可以渗透正在发育的蛋白质的特定模式,而未注射 O-炔丙基-嘌呤霉素的小鼠组织则显示出适度的非电泳染色。由于其高活性,小肠隐窝和肠绒毛基部的细胞具有最大的翻译能力。位于腔底部的潘氏细胞充满了死亡的性囊泡,表现出非常强的染色。众所周知,过早终止的 O-炔丙基-嘌呤霉素缀合肽很容易定位到内质网 (ER) 腔,潘氏细胞中囊泡的强 O-炔丙基-嘌呤霉素标记就证明了这一点 [1]。
在 C57BL/6 小鼠中,腹腔注射OP-puro(50 mg/kg)后,药物掺入多种组织的新合成蛋白质中。点击化学标记后的荧光成像显示,在蛋白质合成率高的组织(如肠上皮、骨髓和肾皮质)中信号强烈,肝脏和肌肉也显示中等强度标记,反映生理状态下的蛋白质合成水平 [1]
组织中的荧光信号在注射后 1 小时达到峰值,并可持续长达 6 小时,可用于体内蛋白质合成动态的时间追踪 [1]
酶活实验
核糖体结合实验:将放射性标记的OP-puro(3H-OP-puro)与纯化的核糖体在含Mg²⁺和ATP的缓冲液中孵育,通过硝酸纤维素滤膜保留法检测结合情况,显示其与核糖体的特异性结合。未标记嘌呤霉素的竞争性实验证实了结合的特异性 [1]
细胞实验
- 细胞内蛋白质合成成像:细胞用OP-puro(2–5 μM)处理15–60分钟后固定,进行点击化学标记Alexa Fluor叠氮染料。共聚焦显微镜显示细胞质中强烈荧光,与核糖体标志物共定位,指示活跃的蛋白质合成位点 [1]
- 细胞毒性评估:MTT实验表明,OP-puro(最高20 μM)处理24小时对细胞活力无显著影响,证明其在适合成像的浓度下毒性较低 [1]
动物实验
- 小鼠体内蛋白质合成成像:将OP-puro(50 mg/kg)腹腔注射至C57BL/6小鼠体内。1小时后,收集组织并进行点击化学标记。荧光成像显示,在肠道和骨髓等高增殖组织中标记强烈,证实了其体内活性[1]
- 药物制剂:将OP-puro溶解于无菌DMSO中,注射前用PBS稀释至最终浓度为10 mg/mL[1]
参考文献

[1]. Imaging protein synthesis in cells and tissues with an alkyne analog of puromycin. Proc Natl Acad Sci U S A. 2012 Jan 10;109(2):413-8.

其他信息
OP-puro 是一种带有炔烃基团的修饰嘌呤霉素类似物,可用于生物正交点击化学反应,对新合成的蛋白质进行荧光标记。这使得在不干扰细胞过程的情况下,可以观察活细胞和组织中的蛋白质合成动态[1]。该化合物已在多种细胞类型和动物模型(包括小鼠)中得到验证,证明了其在生理和病理条件下研究蛋白质合成的广泛适用性[1]。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C24H29N7O5
分子量
495.530964612961
精确质量
495.223
元素分析
C, 58.17; H, 5.90; N, 19.79; O, 16.14
CAS号
1416561-90-4
PubChem CID
71576433
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.4±0.1 g/cm3
折射率
1.679
LogP
0.97
tPSA
161
氢键供体(HBD)数目
4
氢键受体(HBA)数目
10
可旋转键数目(RBC)
9
重原子数目
36
分子复杂度/Complexity
786
定义原子立体中心数目
5
SMILES
CN(C)C1=NC=NC2=C1N=CN2[C@H]3[C@@H]([C@@H]([C@H](O3)CO)NC(=O)[C@H](CC4=CC=C(C=C4)OCC#C)N)O
InChi Key
JXBIGWQNNSJLQK-IYRMOJGWSA-N
InChi Code
InChI=1S/C24H29N7O5/c1-4-9-35-15-7-5-14(6-8-15)10-16(25)23(34)29-18-17(11-32)36-24(20(18)33)31-13-28-19-21(30(2)3)26-12-27-22(19)31/h1,5-8,12-13,16-18,20,24,32-33H,9-11,25H2,2-3H3,(H,29,34)/t16-,17+,18+,20+,24+/m0/s1
化学名
(2S)-2-amino-N-[(2S,3S,4R,5R)-5-[6-(dimethylamino)purin-9-yl]-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl]-3-(4-prop-2-ynoxyphenyl)propanamide
别名
O-Propargyl-puromycin, OPP, OP-puro
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ≥ 31 mg/mL (~62.56 mM)
H2O : < 0.1 mg/mL
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.05 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.05 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.05 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。


请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.0180 mL 10.0902 mL 20.1804 mL
5 mM 0.4036 mL 2.0180 mL 4.0361 mL
10 mM 0.2018 mL 1.0090 mL 2.0180 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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