Onjisaponin B

别名: 远志皂苷B;远志皂甙B;远志精Ⅲ;远志皂苷B;远志精Ⅲ
目录号: V30764 纯度: ≥98%
Onjisaponin B 是远志中发现的一种天然化合物。
Onjisaponin B CAS号: 35906-36-6
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
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产品描述
Onjisaponin B 是远志中发现的一种天然化合物。在 PC-12 细胞中,Onjisaponin B 可以促进自噬并加速突变 α-synuclein 和亨廷顿蛋白的降解,可用于帕金森病 (PD) 和亨廷顿病的研究/研究。
生物活性&实验参考方法
靶点
- Autophagy-related proteins, including mTOR (mammalian target of rapamycin), Beclin-1, and LC3 (microtubule-associated protein 1 light chain 3) [1]
体外研究 (In Vitro)
1. 用浓度为1、5、10 μM的远志皂苷B(Onjisaponin B)处理PC-12细胞(大鼠嗜铬细胞瘤细胞)24小时:Western blot检测显示,LC3-II/LC3-I比值(自噬体形成标志物)呈浓度依赖性升高,p62蛋白水平(自噬降解标志物)降低,表明自噬活性增强 [1]
2. 在过表达突变型α-突触核蛋白(A53T)或突变型亨廷顿蛋白(Htt-Q74)的PC-12细胞中:用5 μM 远志皂苷B处理24小时后,Western blot和免疫荧光检测显示,突变型α-突触核蛋白和Htt-Q74的蛋白水平显著降低;且该降解效应可被氯喹(CQ,抑制溶酶体功能的自噬抑制剂)阻断,证实其依赖自噬介导的降解途径 [1]
3. 在PC-12细胞中:远志皂苷B(5 μM,24小时)可抑制mTOR的磷酸化(p-mTOR)及其下游底物p-p70S6K、p-4EBP1的磷酸化(Western blot检测),表明其增强自噬的作用通过mTOR信号通路介导 [1]
4. 用远志皂苷B(5 μM)与氯喹(CQ,10 μM)联合处理PC-12细胞:与单独使用远志皂苷B相比,LC3-II/LC3-I比值进一步升高,证实远志皂苷B促进完整的自噬流(自噬体形成及后续溶酶体降解),而非阻断自噬体清除 [1]
细胞实验
1. PC-12细胞培养与药物处理:PC-12细胞用含胎牛血清和抗生素的RPMI 1640培养基培养,接种于培养板后贴壁过夜。检测自噬时,用1、5、10 μM 远志皂苷B处理细胞24小时;检测自噬流时,用5 μM 远志皂苷B与10 μM氯喹(CQ)联合处理24小时。检测突变蛋白降解时,用5 μM 远志皂苷B处理稳定过表达A53T α-突触核蛋白或Htt-Q74的PC-12细胞24小时 [1]
2. Western blot实验:药物处理后,用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解PC-12细胞,测定蛋白浓度后,将等量蛋白通过SDS-PAGE电泳分离,转移至PVDF膜。膜用脱脂牛奶封闭后,加入一抗(针对LC3、p62、mTOR、p-mTOR、p-p70S6K、p-4EBP1、α-突触核蛋白、亨廷顿蛋白或β-肌动蛋白)和二抗孵育,化学发光法显影。用图像分析软件定量条带强度,以β-肌动蛋白作为内参 [1]
3. 免疫荧光实验:将过表达A53T α-突触核蛋白或Htt-Q74的PC-12细胞接种于盖玻片,用5 μM 远志皂苷B处理24小时后,用多聚甲醛固定、Triton X-100透化、BSA封闭。加入抗α-突触核蛋白或抗亨廷顿蛋白一抗,再加入荧光标记二抗孵育,DAPI染核。激光共聚焦显微镜观察荧光信号,定量每个细胞中突变蛋白聚集体的数量 [1]
参考文献

[1]. Onjisaponin B derived from Radix Polygalae enhances autophagy and accelerates the degradation of mutant α-synuclein and huntingtin in PC-12 cells. Int J Mol Sci. 2013 Nov 15;14(11):22618-41.

其他信息
塞内金III是从阔叶远志(Polygala senega var. latifolia)中分离得到的一种三萜皂苷,已被证实具有降血糖活性。它既是一种降血糖剂,也是一种植物代谢产物。塞内金III是一种肉桂酸酯、羟基单羧酸、五环三萜类化合物和三萜皂苷。它在功能上与4-甲氧基肉桂酸相关。它来源于齐墩果烷的氢化物。
据报道,在远志(Polygala tenuifolia)、假远志(Polygala fallax)和其他有相关数据的生物体中均发现了Senegin III。
- Onjisaponin B 是从远志(Radix Polygalae)的根中分离得到的一种皂苷化合物,远志是一种常用中药材,用于治疗神经系统疾病[1]。
- Onjisaponin B 加速突变型α-突触核蛋白和亨廷顿蛋白降解的机制涉及通过抑制mTOR信号通路激活自噬。由于突变型α-突触核蛋白和亨廷顿蛋白的异常聚集分别与帕金森病和亨廷顿病相关,Onjisaponin B 可能对以蛋白质聚集为特征的神经退行性疾病具有潜在的治疗价值[1]。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C75H112O35
分子量
1573.6708
精确质量
1572.698
CAS号
35906-36-6
PubChem CID
21669942
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.5±0.1 g/cm3
折射率
1.656
LogP
1.78
tPSA
544.57
氢键供体(HBD)数目
18
氢键受体(HBA)数目
35
可旋转键数目(RBC)
22
重原子数目
110
分子复杂度/Complexity
3230
定义原子立体中心数目
39
SMILES
C[C@H]1[C@@H]([C@H]([C@H]([C@@H](O1)O[C@H]2[C@H]([C@H](O[C@H]([C@@H]2O[C@H]3[C@@H]([C@@H]([C@H]([C@@H](O3)C)O[C@H]4[C@@H]([C@H]([C@@H](CO4)O[C@H]5[C@@H]([C@H]([C@H]([C@H](O5)CO)O)O)O)O)O)O)O)OC(=O)[C@@]67CC[C@@]8(C(=CC[C@H]9[C@]8(CC[C@@H]1[C@@]9(C[C@@H]([C@@H]([C@@]1(C)C(=O)O)O[C@H]1[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O1)CO)O)O)O)O)C)C)[C@@H]6CC(CC7)(C)C)CO)C)OC(=O)/C=C/C1=CC=C(C=C1)OC)O)O)O
InChi Key
QSTBHNPMHXYCII-KJCIHCEPSA-N
InChi Code
InChI=1S/C75H112O35/c1-30-44(81)48(85)53(90)63(99-30)107-59-58(105-43(80)17-12-33-10-13-34(97-9)14-11-33)32(3)101-67(60(59)108-64-56(93)51(88)57(31(2)100-64)106-62-52(89)47(84)40(28-98-62)104-65-54(91)49(86)45(82)38(26-76)102-65)110-69(96)74-21-20-70(4,5)24-36(74)35-15-16-41-71(6)25-37(79)61(109-66-55(92)50(87)46(83)39(27-77)103-66)73(8,68(94)95)42(71)18-19-72(41,7)75(35,29-78)23-22-74/h10-15,17,30-32,36-42,44-67,76-79,81-93H,16,18-29H2,1-9H3,(H,94,95)/b17-12+/t30-,31-,32+,36-,37-,38+,39+,40+,41+,42+,44-,45-,46+,47-,48+,49-,50-,51-,52+,53+,54+,55+,56+,57-,58-,59-,60+,61-,62-,63-,64-,65-,66-,67-,71+,72+,73-,74-,75-/m0/s1
化学名
(2S,3R,4S,4aR,6aR,6bR,8aS,12aS,14aR,14bR)-8a-[(2S,3R,4S,5S,6R)-3-[(2S,3R,4S,5R,6S)-5-[(2S,3R,4R,5R)-3,4-dihydroxy-5-[(2S,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-3,4-dihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-5-[(E)-3-(4-methoxyphenyl)prop-2-enoyl]oxy-6-methyl-4-[(2S,3R,4R,5R,6S)-3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxycarbonyl-2-hydroxy-6b-(hydroxymethyl)-4,6a,11,11,14b-pentamethyl-3-[(2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-1,2,3,4a,5,6,7,8,9,10,12,12a,14,14a-tetradecahydropicene-4-carboxylic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~100 mg/mL (~63.55 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (1.59 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (1.59 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.6355 mL 3.1773 mL 6.3546 mL
5 mM 0.1271 mL 0.6355 mL 1.2709 mL
10 mM 0.0635 mL 0.3177 mL 0.6355 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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