| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Marker dye
ortho-iodoHoechst 33258 targets DNA, specifically binding to the minor groove of the double helix. Its binding is non-covalent and driven by a combination of hydrogen bonding and hydrophobic interactions, with a strong preference for A/T-rich sequences containing at least four such base pairs. Studies using DNAase I footprinting have shown that while it binds well to AT-rich regions, it binds relatively poorly to sequences containing the alternating step TpA. However, unlike the related dye DAPI, it can more readily accommodate guanosine residues at the end of its binding site. This specific interaction with DNA is the basis for its function as a fluorescent stain, as the binding event significantly enhances its quantum yield. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
Hoechst 工作液的制备：
1.1 储备液的制备 用 DMSO 配制 1 mg/mL 的 Hoechst 储备液。 注意： 建议将 Hoechst 储备液分装后避光保存于 -4 ℃ 或 -20 ℃。 1.2 工作液的制备 用预热的无血清细胞培养基或 PBS 将储备液稀释至终浓度为 10 μg/mL 的 Hoechst 工作液。 注意： 请根据您的具体需求调整 Hoechst 工作液的浓度，并使用新鲜配制的溶液。 2. 细胞染色（悬浮细胞） 2.1 离心收集细胞，用 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度为 1 × 10~6/mL 2.2 加入 1 mL Hoechst 工作液，室温孵育 3-10 分钟。 2.3 400 g 离心 3-4 分钟，弃上清液。 2.4 用 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。 将细胞重悬于 1 mL 无血清培养基或 PBS 中，使用荧光显微镜或流式细胞仪观察。 3.细胞染色（贴壁细胞） 3.1 将贴壁细胞培养在无菌盖玻片上。 3.2 将盖玻片从培养基中取出，吸除多余的培养基。 3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻摇晃使染料完全覆盖细胞，孵育 3-10 分钟。 3.4 移除染料工作液，用培养基洗涤 2-3 次，每次 5 分钟，然后使用荧光显微镜或流式细胞仪观察。 邻碘代 Hoechst 33258 本身是一种标记试剂，不具有酶抑制等经典药理活性。其主要的体外功能是作为 DNA 的荧光探针。与 DNA 结合后，其荧光强度显著增强，从而可以观察固定或活细胞中的核物质。它可用于多种体外应用中的DNA染色，例如定量DNA含量、通过流式细胞术评估细胞周期状态以及在荧光显微镜实验中识别细胞核。该染料对DNA的特异性以及结合后增强的荧光使其成为这些应用的高灵敏度和高可靠性工具。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
邻碘代Hoechst 33258不作为体内治疗药物使用。然而，它可用于研究领域，例如体内细胞追踪或移植研究中的细胞染色。在这些应用中，细胞先用染料进行体外染色，然后移植到动物模型中，之后可通过荧光追踪细胞。但其主要用途仍然是体外和离体细胞及分子生物学研究。
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| 酶活实验 |
利用DNA酶I和微球菌核酸酶足迹分析技术，我们分析了小沟结合配体DAPI（4',6-二脒基-2-苯基吲哚）和Hoechst 33258（双苯并咪唑）的DNA结合位点。两种药物似乎都能结合到富含AT的区域，这些区域至少含有四个此类碱基对。Hoechst 33258与含有交替碱基对TpA的核苷酸序列的结合能力相对较弱。然而，与DAPI不同的是，它更容易适应结合位点末端的鸟苷残基。我们比较了DAPI和Hoechst 33258的DNA结合位点与在相似条件下测定的相关小沟结合配体贝尼尔、奈特罗普辛和迪斯塔霉素A的DNA结合位点，并讨论了在分析药物-DNA相互作用时使用不同足迹探针的重要性[3]。
邻碘Hoechst 33258的体外检测主要集中于其作为DNA染料的用途。标准方案包括配制1 mg/mL的DMSO储备液，然后用预热的无血清细胞培养基或PBS稀释至工作浓度，通常约为10 μg/mL。对于悬浮细胞的染色，收集细胞，用PBS洗涤，然后在室温下与工作液孵育3-10分钟。孵育后，离心细胞，洗涤，并重悬细胞，以便在荧光显微镜下观察或通过流式细胞仪进行分析。对于生长在盖玻片上的贴壁细胞，也采用类似的方案。染色过程快速简便，因此成为常规核染色的热门选择。 |
| 细胞实验 |
使用邻碘Hoechst 33258进行细胞分析通常包括将活细胞或固定细胞与染料孵育。对于活细胞成像，将染料直接添加到培养基中并短暂孵育，之后洗涤细胞并进行成像。该染料具有良好的细胞渗透性，无需固定或透化即可进入活细胞。在固定细胞应用中，染色步骤类似，该染料可作为DAPI的便捷替代品。染色后，使用紫外激发荧光显微镜或流式细胞仪分析细胞，以测量DNA含量或评估细胞周期分布。
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| 动物实验 |
邻碘代Hoechst 33258通常不作为治疗或诊断试剂用于动物。其体内应用仅限于研究用途，即在体外标记细胞，然后将其导入动物体内进行追踪。标记的细胞可通过组织切片中的荧光或对整个动物进行成像来检测。这种方法用于研究各种疾病模型中的细胞迁移、归巢和植入。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
邻碘代Hoechst 33258的分子量为534.39 g/mol，化学式为C25H23IN6。它是一种小分子，可透过细胞膜。其荧光特性，激发波长和发射波长分别约为350 nm和460 nm，使其与标准紫外/蓝光光源兼容。作为一种荧光染料，其药代动力学对于典型的体外应用而言并非主要考虑因素。当用于体内追踪时，其分布和清除将取决于标记的细胞或颗粒。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
邻碘代Hoechst 33258在用于DNA染色的低浓度下通常被认为无毒。它是一种成熟的染料，已在细胞生物学领域广泛应用数十年。作为一种化学试剂，应遵循标准的实验室安全预防措施，包括使用适当的个人防护装备。它不适用于人体治疗或诊断，仅供研究用途。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
本文描述了荧光显微镜在检测脱氧核糖核酸（DNA）合成方面的多种应用。这些应用包括：(a) 分析有丝分裂过程中姐妹染色单体的交换和分离；(b) 定位染色体上含有胸腺嘧啶残基且这些残基在多核苷酸链中不对称分布的DNA区域；以及 (c) 检测中期染色体中的晚期复制区域。在固定细胞学标本和未固定培养细胞中均证实，掺入间期细胞核的5-溴脱氧尿苷的生物合成能够抑制Hoechst 33258的荧光。本文描述的许多细胞学观察结果可能为未来的生物化学研究奠定基础。[2]邻碘代Hoechst 33258是Hoechst染料家族的成员，也是Hoechst 33258的衍生物。它广泛用于各种生物学应用中的DNA染色和定量分析。该化合物对富含A/T的DNA区域具有亲和力，且结合后荧光增强，使其成为细胞周期分析、细胞凋亡检测和荧光显微镜观察的宝贵工具。该化合物是许多分子生物学和细胞生物学实验室的标准试剂。
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| 分子式 |
C25H23IN6
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|---|---|
| 分子量 |
534.39432
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| 精确质量 |
534.103
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| CAS号 |
158013-41-3
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| PubChem CID |
10324821
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| 外观&性状 |
Pink to red solid powder
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| LogP |
5.132
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| tPSA |
63.84
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
642
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
UOHARKYRPCGBEI-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C25H23IN6/c1-31-10-12-32(13-11-31)17-7-9-21-23(15-17)29-24(27-21)16-6-8-20-22(14-16)30-25(28-20)18-4-2-3-5-19(18)26/h2-9,14-15H,10-13H2,1H3,(H,27,29)(H,28,30)
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| 化学名 |
2-(2-iodophenyl)-6-[6-(4-methylpiperazin-1-yl)-1H-benzimidazol-2-yl]-1H-benzimidazole
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~93.56 mM)
H2O : ~0.67 mg/mL (~1.25 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.68 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8713 mL | 9.3565 mL | 18.7129 mL | |
| 5 mM | 0.3743 mL | 1.8713 mL | 3.7426 mL | |
| 10 mM | 0.1871 mL | 0.9356 mL | 1.8713 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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