| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
TOPK (IC50 = 28 nM); CDK11B (IC50 = 40 nM)
TOPK (mechanism related to inhibition of its kinase activity, specific IC50/Ki not provided in the literature) [1] CDK11B (KD = 40 nM) [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：OTS964 以低 IC50 值抑制 TOPK 阳性细胞的生长 [A549 (31 nM)、LU-99 (7.6 nM)、DU4475 (53 nM)、MDAMB-231 (73 nM)、T47D (72 nM) )、Daudi (25 nM)、UM-UC-3 (32 nM)、HCT-116 (33 nM)、MKN1 (38 nM)、MKN45 (39 nM)、HepG2 (19 nM)、MIAPaca-2 (30 nM) )和22Rv1 (50 nM)]，而其对TOPK阴性HT29癌细胞的生长抑制作用明显较弱，IC50为290nM。尽管 OTS964 对 Src 家族激酶具有一定的抑制作用，但这些癌细胞对 OTS964 的反应与 Src 家族激酶 c-Src、Fyn 和 Lyn 的表达不相关，这支持了 OTS964 的 TOPK 依赖性生长抑制作用。 T47D 细胞的延时成像显示，OTS964 处理会诱导胞质分裂缺陷，然后导致细胞凋亡。激酶测定：OTS964 是 OTS514 的二甲基化衍生物，是一种有效的选择性 TOPK（（T 淋巴因子激活的杀伤细胞来源的蛋白激酶）抑制剂。它以高亲和力和选择性抑制 TOPK（IC50 值为 28 nM）。是一种在多种癌症/肿瘤中发现的蛋白质，被认为是促进肿瘤生长的癌基因。因此，作为 TOPK 的抑制剂，OTS964 具有潜在的抗癌活性。它会导致胞质分裂缺陷和随后的细胞凋亡细胞分析：细胞（100 μl，A549 细胞、LU-99 细胞、DU4475 细胞、MDA-MB-231 细胞、T47D 细胞、Daudi 细胞、UM-将UC-3细胞、HCT-116细胞、MKN1细胞、MKN45细胞、HepG2细胞、MIAPaca-2细胞、22Rv1细胞和HT29细胞）以一定密度接种于96孔板中，让细胞贴壁过夜。在 37°C 下暴露于化合物 72 小时。用分光光度计在 450 nm 波长处读取板的读数。所有测定均一式三份进行。测量 IC50 值后，我们计算 z 分数以产生 P 值。 IC50 值 (nM) 进行对数转换（以 10 为底）后，计算 13 个 TOPK 阳性细胞系的 IC50 对数值的平均值和 SD。
OTS964处理可导致人肺癌细胞出现胞质分裂缺陷，并随后引发细胞凋亡，该效应与TOPK小干扰RNA（siRNA）的敲低效果相似[1] 在PBK敲除的A375和DLD1细胞中，OTS964的药效不受影响，表明该药物并非通过靶向PBK发挥杀伤作用，而是通过脱靶效应杀死细胞[2] CDK11B激酶结构域的杂合突变可使癌细胞对OTS964产生耐药性[2] 在癌细胞中表达CDK11B G579S突变体后，细胞对OTS964的敏感性降低[2] 用不同浓度的OTS964处理Hs683和H4胶质瘤细胞24小时和48小时，MTT法检测显示药物具有细胞毒性；蛋白质印迹法分析发现相关蛋白（LC3-II、P62等）的表达发生改变[3] 在Hs683和H4胶质瘤细胞中，OTS964（1μM，48小时）处理可影响自噬及细胞信号通路相关蛋白ULK1、ATG13、p-ATG13、Beclin-1、p-Beclin-1等的表达[3] 当Hs683和H4细胞经OTS964（1μM）处理48小时后，加入表皮生长因子（20 ng/ml）作用15分钟，再加入环己酰亚胺（100μg/ml）处理6小时和8小时，蛋白质印迹法检测显示ULK1的稳定性提高[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
尽管给予游离化合物会引起造血不良反应（与血小板增多相关的白细胞减少），但以脂质体制剂递送的药物有效地引起移植肿瘤的完全消退，并且在小鼠中未显示任何不良反应。使用脂质体 OTS964 抑制 TOPK 活性，可通过诱导胞质分裂缺陷和随后的细胞凋亡来抑制肿瘤生长。尽管口服OTS964会引起一些造血毒性，但这只是暂时的影响。白细胞减少症会自然恢复，口服药物的抗癌效果与脂质体制剂相似，口服给药可能更实用。
在小鼠体内，给予游离态OTS964会引发造血系统不良反应（与血小板增多相关的白细胞减少）；而脂质体剂型的OTS964在人肺癌异种移植模型中，能有效使移植肿瘤完全消退，且未出现任何不良反应[1] |
| 酶活实验 |
进行体外激酶实验，以活性TOPK作为激酶，ULK1肽段作为底物，反应体系中加入[γ-32P]ATP，通过放射自显影检测TOPK对ULK1的磷酸化作用，进而探究OTS964靶点（TOPK）与其底物的潜在相互作用[3]
开展结合实验以测定OTS964与CDK11B的亲和力，计算得出解离常数（KD）为40 nM，该数值反映了药物与靶点CDK11B的结合能力[2] |
| 细胞实验 |
将 100 μl 细胞以特定密度接种到 96 孔板中。在 37°C 下暴露于化合物 72 小时之前，细胞需要过夜进行粘附。在 450 nm 波长处，使用分光光度计读取板的读数。每个测定进行三份重复。测量 IC50 值后，计算 z 分数以得出 P 值。将 13 个 TOPK 阳性细胞系中每一个的 IC50 对数值转换为十进制 (nM)，然后计算平均值和标准差。
体外培养人肺癌细胞并给予OTS964处理，观察和检测细胞在胞质分裂过程中的形态变化及凋亡状态，以此评估药物对细胞分裂和存活的影响[1] 利用CRISPR-Cas9技术构建PBK敲除的A375和DLD1细胞系；将这些敲除细胞与对照细胞（Rosa26）用不同浓度的OTS964处理，建立7点剂量-效应曲线，验证药物药效是否依赖于PBK[2] 采用双向导RNA策略构建候选癌症依赖性基因（包括PBK）的单细胞来源敲除克隆；通过蛋白质印迹法验证敲除效率，并对经OTS964处理的这些克隆进行增殖实验和软琼脂集落形成实验，评估药物对细胞增殖和集落形成能力的影响[2] 将Hs683和H4胶质瘤细胞接种培养24小时后，用不同浓度的OTS964处理24小时和48小时；采用MTT法检测细胞毒性，蛋白质印迹法分析全细胞裂解物中LC3-II、P62、ULK1、ATG13、p-ATG13、Beclin-1、p-Beclin-1等蛋白的表达[3] 构建TOPK沉默的Hs683和H4细胞；接种培养至80%汇合度后，通过蛋白质印迹法检测LC3-II、P62等自噬相关蛋白的表达，比较OTS964处理与TOPK沉默对胶质瘤细胞自噬的影响[3] Hs683和H4细胞接种培养24小时后，用OTS964处理48小时，在细胞收获前5小时加入Baf A1（50 nM）；通过蛋白质印迹法分析全细胞裂解物中相关蛋白的表达，探究OTS964对自噬起始的影响[3] TOPK沉默的Hs683和H4细胞接种培养24小时后，用HBSS处理6小时，在细胞收获前3小时加入CQ（50μM）；通过蛋白质印迹法检测相关蛋白的表达，并用Image J定量LC3-II/Tubulin的密度，评估OTS964对自噬流的影响[3] 将H4-shRNA细胞接种在盖玻片上培养24小时，随后用HBSS处理6小时和CQ（50μM）处理3小时；通过透射电子显微镜观察并计数每个细胞的自噬体数量，利用荧光显微镜观察GFP-LC3的分布情况，以此评估OTS964对自噬体形成的影响[3] |
| 动物实验 |
携带LU-99肺癌细胞的裸鼠[1]
40 mg/kg 静脉注射；第1、4、8、11、15和18天 在小鼠中建立人肺癌异种移植模型；OTS964以两种制剂给药：游离药物和脂质体制剂。文献中未详细说明给药途径和频率，但观察并记录了该药物对移植肿瘤的治疗效果和不良反应[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在小鼠体内注射游离的OTS964会导致造血系统不良反应，特别是与血小板增多症相关的白细胞减少症[1]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
OTS964是一种对靶点具有高亲和力和选择性的强效抑制剂[1]
TOPK在包括肺癌和三阴性乳腺癌在内的多种癌组织中高度且频繁地被转录激活，并在癌细胞有丝分裂中发挥不可或缺的作用；OTS964通过抑制TOPK活性发挥其抗肿瘤作用[1] 多种癌症类型依赖于CDK11的表达，而OTS964是CDK11的强效抑制剂，CDK11是其在细胞内的实际靶点[2] TOPK可以直接与ULK1结合并磷酸化其Ser469、Ser495和Ser533位点，从而降低ULK1的活性和稳定性，并抑制胶质瘤细胞中自噬的启动和进程； OTS964抑制TOPK，从而提高胶质瘤细胞对替莫唑胺（TMZ）的敏感性[3] |
| 分子式 |
C23H24N2O2S.HCL
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|---|---|---|
| 分子量 |
428.98
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| 精确质量 |
428.132
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| 元素分析 |
C, 64.40; H, 5.87; Cl, 8.26; N, 6.53; O, 7.46; S, 7.47
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| CAS号 |
1338545-07-5
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| 相关CAS号 |
OTS964;1338542-14-5
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| PubChem CID |
89675898
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| LogP |
5.89
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| tPSA |
84.57
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
29
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| 分子复杂度/Complexity |
563
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
Cl[H].Cl[H].S1C([H])=C([H])C2=C1C(N([H])C1C(C([H])([H])[H])=C([H])C(=C(C3C([H])=C([H])C(=C([H])C=3[H])[C@@]([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])N(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])C=12)O[H])=O
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| InChi Key |
YHPWOYBWUWSJDW-UQKRIMTDSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C23H24N2O2S.ClH/c1-13-11-18(26)19(16-7-5-15(6-8-16)14(2)12-25(3)4)20-17-9-10-28-22(17)23(27)24-21(13)20;/h5-11,14,26H,12H2,1-4H3,(H,24,27);1H/t14-;/m0./s1
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| 化学名 |
9-[4-[(2R)-1-(dimethylamino)propan-2-yl]phenyl]-8-hydroxy-6-methyl-5H-thieno[2,3-c]quinolin-4-one;hydrochloride
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.83 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.83 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.83 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3311 mL | 11.6556 mL | 23.3111 mL | |
| 5 mM | 0.4662 mL | 2.3311 mL | 4.6622 mL | |
| 10 mM | 0.2331 mL | 1.1656 mL | 2.3311 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
TOPK expression levels, IC50values to TOPK inhibitors and suppression of FOXM1 in ovarian cancer cell lines.Clin Cancer Res.2016 Dec 15;22(24):6110-6117. |
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In vivoefficacy of OTS514 in ES-2 ovarian cancer peritoneal dissemination xenograft model.Clin Cancer Res.2016 Dec 15;22(24):6110-6117. |
Growth-inhibitory and cytotoxic effects of OTS514 for ovarian cancer cells freshly-isolated from patients.Clin Cancer Res.2016 Dec 15;22(24):6110-6117. |
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SKLB-C05
Cephradine sodium
PBK-IN-9
OTS964
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463611831
