OVA Peptide (257-264) TFA

目录号: V33387 纯度: ≥98%
OVA 肽(257-264) TFA 是OVA 的I 类(Kb) 限制性肽表位,它是一种八聚体肽,可由I 类MHC 分子H-2Kb 呈递的卵清蛋白发展而来。
OVA Peptide (257-264) TFA CAS号: 1262751-08-5
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
50mg
100mg
Other Sizes

Other Forms of OVA Peptide (257-264) TFA:

  • OVA Peptide 257-264
点击了解更多
InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
产品描述
OVA肽(257-264) TFA是OVA的I类(Kb)限制性肽表位,它是一种八聚体肽,可由卵清蛋白经I类MHC分子H-2Kb呈递而开发。
OVA肽(257-264) TFA(CAS号:1262751-08-5)是一种合成的八聚体肽,对应于鸡卵清蛋白(OVA)的第257至264位氨基酸。该肽序列为SIINFEKL,是OVA的一个特征明确的I类(Kb)限制性肽表位,在C57BL/6小鼠中由主要组织相容性复合体(MHC) I类分子H-2Kb呈递。它是免疫学研究中用于研究抗原呈递、T细胞活化和CD8+ T细胞反应的重要工具。该肽以三氟乙酸盐 (TFA) 的形式提供,以提高其溶解度和稳定性,分子式为 C₄₉H₇₆F₆N₁₀O₁₇,分子量约为 1191.17 g/mol。它是一种白色至类白色固体粉末,纯度≥98%。用于研究时,通常以粉末形式储存在 -20°C 下,保存期限最长可达三年。
生物活性&实验参考方法
靶点
The primary target of OVA Peptide (257-264) TFA is the MHC class I molecule H-2Kb, which is expressed on the surface of antigen-presenting cells (APCs) in C57BL/6 mice. The peptide binds to the peptide-binding groove of H-2Kb with high affinity, forming a stable peptide-MHC complex that is recognized by the T-cell receptor (TCR) on CD8+ cytotoxic T lymphocytes (CTLs). This interaction is the basis for the peptide's use in studying antigen-specific T-cell responses. Upon binding to H-2Kb, the peptide-MHC complex is displayed on the cell surface, where it can activate CD8+ T cells that express a TCR specific for the SIINFEKL-H-2Kb complex. This leads to T-cell proliferation, cytokine production, and the generation of cytotoxic T-cell responses.
体外研究 (In Vitro)
TAP1-I 和 C57BL/6 巨噬细胞可以在不同的细胞区室中加工 Crl-OVA 和全长 OVA。此外,MHC I 类分子呈递的 TAP 非依赖性加工受 OVA 表位(OVA 肽 (257-264))的蛋白质背景的影响。TAP 转运蛋白以多种方式呈递该表位:全长卵清蛋白中的 OVA 肽 (257–264) 高度依赖于 TAP 转运蛋白,无论天然蛋白是否与聚苯乙烯偶联,或者重组 OVA 是否在细菌中表达;而 MBPCrl-OVA 或 Crl-OVA 细菌融合蛋白中的 OVA 肽 (257–264) 则依赖于 TAP 转运蛋白 [1]。
OVA 肽 (257-264) TFA 的体外活性由其与 H-2Kb 结合并激活 CD8+ T 细胞的能力来定义。在肽-MHC结合实验中,该肽对H-2Kb表现出高亲和力,IC₅₀值在纳摩尔范围内。在T细胞活化实验中,该肽可用于刺激OVA特异性CD8⁺ T细胞,例如来自OT-I TCR转基因小鼠的CD8⁺ T细胞,从而显著促进T细胞增殖和细胞因子(例如IFN-γ、IL-2)的产生。该肽的活性依赖于抗原呈递细胞(APC)上H-2Kb的呈递,因此常用于T细胞刺激实验中APC的脉冲刺激。其高纯度(≥98%)确保了这些实验结果的可靠性和可重复性。
体内研究 (In Vivo)
在体内,OVA肽(257-264) TFA被用于诱导和研究C57BL/6小鼠体内抗原特异性CD8+ T细胞应答。当通过注射(例如腹腔注射、皮下注射或静脉注射)给药时,该肽会被抗原呈递细胞(APC)摄取、加工,并呈递在H-2Kb上,从而激活和扩增OVA特异性CD8+ T细胞。该模型广泛用于研究T细胞激活、记忆形成和免疫治疗的机制。该肽还可以与佐剂联合使用以增强免疫应答。其体内效应依赖于H-2Kb和OVA特异性T细胞受体(TCR)的存在。
酶活实验
体外肽-MHC结合试验用于测定OVA肽(257-264)与H-2Kb的亲和力。典型的试验中,将重组H-2Kb蛋白或表达H-2Kb细胞的细胞裂解液与不同浓度的肽以及荧光标记或放射性标记的参考肽孵育。孵育后,采用荧光偏振、闪烁计数或流式细胞术等方法定量结合的肽。计算置换50%标记肽所需的肽浓度(IC₅₀)。 T 细胞活化试验是通过用肽脉冲 APC 并将其与 OVA 特异性 CD8+ T 细胞共培养来进行的,然后测量 T 细胞增殖(例如,通过 [³H]-胸苷掺入或 CFSE 稀释)和细胞因子产生(例如,通过 ELISA 或 ELISpot)。
细胞实验
体外细胞实验中,OVA肽(257-264) TFA的活性检测采用抗原呈递细胞(APC)和T细胞。将APC(例如骨髓来源的树突状细胞、脾细胞或RMA-S、EL4等细胞系)用肽刺激1-4小时,洗涤后与OVA特异性CD8+ T细胞(例如来自OT-I小鼠的T细胞)共培养。通过评估增殖(通过[³H]-胸苷掺入、CFSE稀释或CellTrace Violet染色)、细胞因子产生(通过ELISA或细胞内细胞因子染色检测IFN-γ、TNF-α、IL-2)以及通过流式细胞术检测活化标志物(CD69、CD25、CD44)的上调来评估T细胞活化。这些检测方法对于研究 T 细胞生物学以及评估肽和疫苗的免疫原性至关重要。
动物实验
OVA肽(257-264) TFA的体内动物研究通常在C57BL/6小鼠中进行。常用的实验方案是将该肽(通常与佐剂,例如弗氏完全佐剂、聚肌苷酸胞苷酸或CpG)通过皮下、腹腔或静脉注射免疫小鼠。免疫反应的评估方法是:使用MHC I类四聚体(H-2Kb/SIINFEKL)检测血液、脾脏和淋巴结中OVA特异性CD8+ T细胞的频率,或在肽再次刺激后进行细胞内细胞因子染色。该肽也可用于过继转移研究,即将OVA特异性T细胞(例如来自OT-I小鼠的T细胞)转移到受体小鼠体内,然后用该肽免疫受体小鼠,以研究T细胞的动态变化和功能。
药代性质 (ADME/PK)
OVA肽(257-264) TFA的药代动力学特性具有肽的典型特征。作为一种肽,它易受血液和组织中肽酶的快速蛋白水解降解,导致其半衰期极短。预计其口服生物利用度低,通常采用注射给药。其分布容积可能仅限于细胞外间隙。清除主要通过代谢进行。出于研究目的,该肽通常溶解于无菌水、PBS或生理盐水中。使用TFA盐形式可提高肽的溶解度和稳定性。为保持其完整性,该肽应以冻干粉末形式储存于-20°C。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
由于OVA肽(257-264) TFA是一种研究工具而非治疗药物,因此其毒理学特征尚未得到充分记录。在免疫学检测中使用的浓度(通常在μg/mL至mg/mL范围内)下,预计不会产生毒性。体内实验表明,该肽通常耐受性良好,在免疫原性剂量下一般不会观察到不良反应。然而,使用佐剂可能会引起局部炎症和其他副作用。实验室操作时,应遵守研究用化学品的标准安全预防措施,包括使用个人防护装备(手套、实验服、护目镜)。该化合物仅供研究使用,不得用于人体治疗或诊断。
参考文献

[1]. Major histocompatibility complex class I presentation of ovalbumin peptide 257-264 from exogenous sources: protein context influences the degree of TAP-independent presentation. Eur J Immunol. 1996 Nov;26(11):2790-9.

其他信息
OVA肽(257-264) TFA是一种广泛用于免疫学研究的工具。它是卵清蛋白的I类(Kb)限制性肽表位,序列为SIINFEKL。在C57BL/6小鼠中,它由MHC I类分子H-2Kb呈递。该肽可用于多种应用,包括T细胞活化试验、四聚体染色和体内免疫研究。其分子式为C₄₉H₇₆F₆N₁₀O₁₇,分子量约为1191.17 g/mol。本品为白色至类白色固体粉末,纯度≥98%。OVA肽(257-264) TFA仅供研究使用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C49H76F6N10O17
分子量
1191.17497444153
精确质量
1076.536
CAS号
1262751-08-5
相关CAS号
OVA Peptide(257-264);138831-86-4;OVA Peptide(257-264) acetate salt
PubChem CID
71311993
外观&性状
White to off-white solid powder
tPSA
431
氢键供体(HBD)数目
14
氢键受体(HBA)数目
20
可旋转键数目(RBC)
33
重原子数目
75
分子复杂度/Complexity
1780
定义原子立体中心数目
10
SMILES
FC(C(=O)O)(F)F.FC(C(=O)O)(F)F.O=C([C@H]([C@@H](C)CC)NC([C@H](CO)N)=O)N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(=O)O)CC(C)C)=O)CCCCN)=O)CCC(=O)O)=O)CC1C=CC=CC=1)=O)CC(N)=O)=O)[C@@H](C)CC
InChi Key
BRUCWCULSHVYBQ-VPZPQSBKSA-N
InChi Code
InChI=1S/C45H74N10O13.C2HF3O2/c1-7-25(5)36(55-44(66)37(26(6)8-2)54-38(60)28(47)23-56)43(65)52-32(22-34(48)57)42(64)51-31(21-27-14-10-9-11-15-27)41(63)50-30(17-18-35(58)59)40(62)49-29(16-12-13-19-46)39(61)53-33(45(67)68)20-24(3)4;3-2(4,5)1(6)7/h9-11,14-15,24-26,28-33,36-37,56H,7-8,12-13,16-23,46-47H2,1-6H3,(H2,48,57)(H,49,62)(H,50,63)(H,51,64)(H,52,65)(H,53,61)(H,54,60)(H,55,66)(H,58,59)(H,67,68);(H,6,7)/t25-,26-,28-,29-,30-,31-,32-,33-,36-,37-;/m0./s1
化学名
(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S)-2-amino-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]hexanoyl]amino]-4-methylpentanoic acid;2,2,2-trifluoroacetic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~125 mg/mL (~116.05 mM)
H2O : ~50 mg/mL (~46.42 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (1.93 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.8395 mL 4.1975 mL 8.3950 mL
5 mM 0.1679 mL 0.8395 mL 1.6790 mL
10 mM 0.0840 mL 0.4198 mL 0.8395 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
+
+

计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们