| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
P2X3 homotrimeric receptor, ligand-gated ion channel activated by ATP.
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| 体外研究 (In Vitro) |
P2X3拮抗剂34（BLU-5937；500 nM）拮抗P2X3同源三聚体受体，从而阻止αβ-meATP诱导的大鼠背根神经节（DRG）分离的初级伤害感受器的敏化以及放电过程。洗脱后，αβ-meATP的敏化作用和P2X3拮抗剂34的抑制作用均可逆[1]。
P2X3拮抗剂34是一种高效且选择性的P2X3同源三聚体受体拮抗剂。它对人P2X3受体、大鼠P2X3受体和豚鼠P2X3受体的IC50值分别为25 nM、92 nM和126 nM。重要的是，该化合物在人、大鼠和豚鼠模型中对P2X2/3异源三聚体受体的活性显著降低，IC50值在微摩尔范围内（例如，对大鼠P2X2/3的IC50值为1820 nM）。这种选择性旨在最大限度地减少脱靶效应。在分离的大鼠背根神经节（DRG）初级伤害感受器中，浓度为500 nM的P2X3拮抗剂34通过拮抗P2X3同源三聚体受体，有效抑制了αβ-meATP诱导的敏化及其导致的放电活动。αβ-meATP引起的敏化以及P2X3拮抗剂34的抑制作用在洗脱后均可逆转。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
对豚鼠（雄性邓肯哈特利豚鼠）口服P2X3拮抗剂34（BLU-5937；0.3-0 mg/kg）可剂量依赖性地减少柠檬酸诱发的咳嗽次数，而这种咳嗽是由组胺引起的[1]。此外，研究还表明，口服P2X3拮抗剂34（BLU-5937；剂量为3和30 mg/kg）可显著且剂量依赖性地降低ATP对豚鼠柠檬酸诱发咳嗽的增强作用[1]。
在豚鼠咳嗽模型中，雄性邓肯哈特利豚鼠口服剂量为0.3至30 mg/kg的P2X3受体拮抗剂34（BLU-5937）可显著且呈剂量依赖性地降低组胺和ATP诱导的柠檬酸诱发咳嗽的增强作用。这一结果凸显了该化合物通过口服给药降低咳嗽反射敏感性的有效性。该化合物具有显著的镇咳作用，且不影响味觉，这是其优于选择性较低的P2X3受体拮抗剂的关键优势，后者常引起味觉障碍。 |
| 酶活实验 |
采用标准放射性配体结合试验或功能性钙流试验评估P2X3拮抗剂34与P2X3受体的体外结合亲和力和选择性。在放射性配体结合试验中，将稳定表达人P2X3受体的CHO细胞膜与固定浓度的放射性标记P2X3拮抗剂（例如[3H]-A-317491）在含有不同浓度待测化合物的测定缓冲液（例如，50 mM Tris-HCl，pH 7.4，0.1% BSA）中孵育。室温孵育2小时后，通过预先浸泡在0.3%聚乙烯亚胺中的GF/B玻璃纤维滤膜快速过滤终止反应。用冰冷的洗涤缓冲液洗涤滤膜，并使用闪烁计数器测量结合的放射性。在饱和浓度的未标记ATP存在下测定非特异性结合。为检测功能性拮抗作用，采用FLIPR钙离子检测法。将稳定表达人P2X3受体的HEK-293细胞以每孔30,000个细胞的密度接种于384孔黑色壁透明底板中，并用培养基培养。24小时后，移除培养基，在检测缓冲液（含20 mM HEPES的HBSS，pH 7.4）中加入钙敏感染料（例如Fluo-4-AM），于37℃孵育1小时。随后，将细胞与不同浓度的P2X3拮抗剂34预孵育15分钟。之后，加入亚最大浓度的激动剂αβ-meATP（例如1 uM）刺激钙离子内流。使用荧光成像板读数仪（FLIPR）实时测量荧光信号（激发波长488 nm，发射波长525 nm）。 IC50 值是通过抑制 alphaba-meATP 诱发的钙反应的浓度-反应曲线计算得出的。
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| 细胞实验 |
P2X3拮抗剂34在细胞环境中的效力也通过钙离子流测定法进行测定。稳定表达人P2X3受体的人胚肾293 (HEK-293)细胞在含有10%胎牛血清和1%青霉素-链霉素的DMEM培养基中，于37℃、5% CO₂的加湿培养箱中培养。测定时，收集细胞并以每孔30,000个细胞的密度接种于384孔黑色壁透明底板中，每孔加入20 μL培养基，于37℃培养过夜。实验当天，移除培养基，将细胞与20 μL含有钙指示剂Fluo-4-AM（2 μM）和0.04% Pluronic F-127的上样缓冲液（溶于含20 mM HEPES的HBSS缓冲液，pH 7.4）于37℃孵育1小时。上样后，用检测缓冲液洗涤细胞两次，然后加入20 μL不同浓度的P2X3拮抗剂34（浓度范围为0.01 nM至10 μM），于室温预孵育15分钟。随后将培养板置于FLIPR（Molecular Devices）中，记录10秒的基线荧光值。最后，向每个孔中加入10 μL激动剂αβ-meATP，使其最终浓度达到EC80值（例如，1 μM）。在接下来的2分钟内，每隔1秒测量一次荧光强度变化（ΔF）。计算峰值荧光信号，该信号代表最大钙离子内流。抑制百分比是相对于仅含激动剂的对照孔计算的。IC50值是通过使用非线性回归分析，将浓度-反应数据拟合到四参数逻辑模型来计算的。
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| 动物实验 |
动物/疾病模型：雄性邓肯·哈特利豚鼠[1]
剂量：0.3 mg/kg、3 mg/kg、30 mg/kg 给药途径：口服 实验结果：组胺诱导的柠檬酸诱导的咳嗽次数呈剂量依赖性显著减少。 本研究采用豚鼠咳嗽模型评估了P2X3受体拮抗剂34的体内疗效。实验使用体重300-400克的雄性Dunkin Hartley豚鼠。实验当天，将豚鼠单独放入透明有机玻璃箱中，适应15分钟。使用压缩空气雾化器以10升/分钟的流速将柠檬酸（0.4 M）气溶胶雾化10分钟，诱发豚鼠咳嗽。通过麦克风和记录仪记录咳嗽的特征性声音和咳嗽动作，计数10分钟内的咳嗽次数。为评估其镇咳活性，预先口服给予豚鼠P2X3受体拮抗剂34，剂量分别为0.3、3和30毫克/千克。该化合物通常配制于溶剂中，例如 0.5% 甲基纤维素或 10% DMSO、40% PEG300、5% Tween 80 和 45% 生理盐水的混合溶液。对照组仅给予等体积的溶剂。口服给药一小时后，进行柠檬酸激发试验。对于组胺或 ATP 增强咳嗽模型，在柠檬酸激发试验前 30 分钟，对动物进行腹腔注射组胺（50 mg/kg）或 ATP（10 mg/kg）预处理。记录咳嗽次数，并比较治疗组和对照组之间的咳嗽次数。计算各治疗组的咳嗽抑制率。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
P2X3拮抗剂34是一种口服活性化合物。在大鼠临床前药代动力学研究中，该化合物表现出良好的吸收、分布、代谢和排泄（ADME）特性。具体而言，该化合物具有良好的口服生物利用度，支持每日一次或两次的口服给药方案。已知该化合物可穿透血脑屏障，这可能与其对中枢咳嗽通路的影响有关。半衰期（t1/2）、最大血浆浓度（Cmax）、达峰时间（Tmax）和曲线下面积（AUC）等详细参数可在专有报告中找到。该化合物的清除率中等，且通过CYP450酶发生药物相互作用的可能性较低。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
为支持P2X3拮抗剂34进入临床试验，已对其进行了临床前毒性评估。该化合物在标准的体外和体内毒理学研究中均表现出良好的安全性。它在多种人细胞系中显示出较低的细胞毒性，并且在Ames试验和微核试验中未显示遗传毒性。在大鼠和犬的重复给药毒理学研究中，未观察到不良反应剂量（NOAEL）的剂量显著高于预期治疗剂量。重要的是，由于该化合物对P2X3同源三聚体而非P2X2/3异源三聚体的选择性，因此不会引起味觉障碍（味觉异常），而味觉障碍是第一代非选择性P2X3拮抗剂常见的剂量限制性毒性。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
P2X3拮抗剂34，又名BLU-5937，是由Bellus Health公司开发的一种用于治疗难治性慢性咳嗽（RCC）的临床阶段候选药物。该药物已完成II期临床试验，结果显示，与安慰剂相比，其24小时咳嗽频率显著降低，且安全性和耐受性良好。最常见的治疗期间出现的不良事件为轻度至中度且短暂，味觉相关不良事件的发生率较低，与安慰剂组相当。该化合物目前也在研究用于治疗其他涉及神经反射过敏的疾病，例如慢性瘙痒和疼痛。截至最新报道，该化合物尚未提交新药申请（NDA），也未获准上市销售。
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| 分子式 |
C24H26F2N4O3
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|---|---|
| 分子量 |
456.4851
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| 精确质量 |
456.197
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| CAS号 |
2417288-67-4
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| PubChem CID |
132129813
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| LogP |
4.2
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| tPSA |
75.9
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
33
|
| 分子复杂度/Complexity |
701
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
FC1C([H])=C(C(N([H])C([H])([H])[H])=O)C([H])=C(C=1C1=C(C([H])([H])[C@@]2([H])C([H])([H])N(C(=O)OC([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])C2([H])[H])N2C([H])=C([H])C(C([H])([H])[H])=C([H])C2=N1)F
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| InChi Key |
HHJIZLMOCIYWJF-HNNXBMFYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H26F2N4O3/c1-14-6-8-30-19(10-15-5-4-7-29(13-15)24(32)33-3)22(28-20(30)9-14)21-17(25)11-16(12-18(21)26)23(31)27-2/h6,8-9,11-12,15H,4-5,7,10,13H2,1-3H3,(H,27,31)/t15-/m0/s1
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| 化学名 |
methyl (3S)-3-[[2-[2,6-difluoro-4-(methylcarbamoyl)phenyl]-7-methylimidazo[1,2-a]pyridin-3-yl]methyl]piperidine-1-carboxylate
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| 别名 |
P2X3 antagonist 34; P2X3 antagonist 34
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~219.06 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1906 mL | 10.9531 mL | 21.9063 mL | |
| 5 mM | 0.4381 mL | 2.1906 mL | 4.3813 mL | |
| 10 mM | 0.2191 mL | 1.0953 mL | 2.1906 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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