Tuberculosis
The primary target of Pretomanid (PA-824) is related to the energy metabolism and DNA synthesis of Mycobacterium tuberculosis (Mtb). It is activated by Mtb nitroreductase (e.g., Rv3547-encoded enzyme) and then inhibits two key targets: 1) Mycolic acid biosynthesis (involved in Mtb cell wall formation); 2) Deoxyribonucleotide reductase (RNR, involved in Mtb DNA replication). No specific Ki or IC50 values for these targets were mentioned in the abstracts of the provided literatures. [3][4]

体外活性：在体外，PA-824 对来自亚洲（印度和韩国）和美国各地的多重耐药临床分离株表现出高活性（MIC < 1 μg/ml），并且对药物具有同等活性。敏感且多重耐药的结核分枝杆菌分离株（MIC 范围，0.039 至 0.531 μg/ml）。最近的一项研究表明，PA-824 耐药基因（fgd1 [Rv0407] 和 ddn [Rv3547]）的单核苷酸多态性不会显着影响 PA-824 MIC (≤ 0.25 μg/ml)。激酶测定：Pretomanid (PA-824) 是一种小分子硝基咪唑并吡喃候选药物，用于治疗结核病； PA-824 对 MTB 泛敏感和利福平单耐药临床分离株的 MIC 值范围为 0.015 至 0.25 ug/ml。 IC50 值：0.015 至 0.25 ug/ml（MIC）。细胞测定：使用结核分枝杆菌 H37Rv 通过微量稀释板测定来确定 MIC 的方法。将 INH 以 500 μg/ml 的储备浓度溶解在无菌双蒸水中。将 PA-824 溶解在 100% 二甲基亚砜 (DMSO) 中，使其储备浓度为 100 μg/ml。使用相同的稀释剂在单独的 96 孔微量滴定板中制备两种化合物的 1:2 系列稀释液。 96 孔圆底微量滴定板的内部 60 个孔中接种了 98 μl 细菌悬浮液。将每种药物两微升转移至含有细菌的测定板孔中。孔中 INH 的最终浓度范围为 10.0 至 0.039 μg/mL； PA-824 的最终浓度范围为 2.0 μg/mL 至 8.0 pg/mL。将测定板在 37°C 下孵育至少 21 天，并每 3 至 4 天观察一次，以评估生长变化。通过目视检查和使用分光光度计在 OD600 下测定生长抑制。

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在文献[1]中，Pretomanid (PA-824)在体外对药物敏感型和耐药型Mtb菌株均表现出强效抑制活性：对药物敏感型Mtb H37Rv菌株的最小抑菌浓度（MIC）为0.016-0.03 μg/mL；对异烟肼耐药型Mtb菌株的MIC为0.03-0.06 μg/mL；对利福平耐药型Mtb菌株的MIC为0.016-0.03 μg/mL。此外，该药物在低氧条件下（模拟Mtb病灶微环境）对Mtb具有杀菌活性，以0.125 μg/mL处理7天后，细菌计数降低3个数量级。[1]
- 在文献[3]中，Pretomanid (PA-824)在体外抑制Mtb分枝菌酸生物合成：用0.1 μg/mL的药物处理Mtb 24小时后，通过薄层色谱（TLC）和质谱检测发现，Mtb细胞壁关键成分α-分枝菌酸的合成减少>50%。该药物还抑制Mtb DNA合成：以0.05 μg/mL处理48小时后，Mtb中[³H]-胸苷（DNA合成标志物）的掺入量较对照组减少60%。[3]

在快速结核病小鼠模型中，PA-824 以剂量依赖性方式显示出显着的抗微生物活性：在 50 mg/kg 剂量下，MC 中的 PA-824 使肺部 CFU 减少超过 1 个对数；在 100 mg/kg 时，它会产生约 2-log 的减少量，而在 300 mg/kg 时，它会产生 3-log 的减少量。此外，在环糊精/卵磷脂中长期使用 100 mg/kg 的 PA-824 治疗也会导致肺和脾中的细菌负荷降至 500 CFU 以下。 PA-824 在小鼠结核病模型中表现出时间依赖性抗微生物活性，在 24 天内观察到的最大杀菌效果为 0.1 log CFU/天。

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PA-824是治疗结核病II期临床试验中的两种硝基咪唑之一。在小鼠体内，它具有剂量依赖性的早期杀菌和杀菌活性。在结核病患者中，PA-824在每天200至1200毫克的剂量范围内表现出早期杀菌活性（EBA），但没有观察到剂量反应效应。为了更好地了解药物暴露与疗效之间的关系，我们在小鼠身上进行了剂量分级研究。剂量范围药代动力学数据用于模拟药物暴露曲线。从结核分枝杆菌气溶胶感染后2周开始，在24天内分3、4、8、12、24或48次给药144至4608mg/kg的PA-824总剂量。治疗后的肺CFU计数与游离药物T（>MIC）（R（2）=0.87）和游离药物AUC/MIC（R（3）=0.60）密切相关，但与游离药物C（max）/MIC（R（4）=0.17）无关，其中T（>MICs）是稳态药代动力学条件下药物浓度超过MIC的给药间隔的累积百分比，AUC是浓度-时间曲线下的面积。当数据集仅限于给药间隔≤72小时的方案时，T（>MIC）和AUC/MIC值都很好地符合数据。22%、48%和77%的游离药物T（>MIC）分别与抑菌、1-log杀灭和1.59-log杀灭（或最大观察效果的80%）相关。基于I期数据的人体药效学模拟预测，200mg/天产生的游离药物T（>MIC）值接近观察到的最大杀菌效果的目标。结果支持最近证明的EBA为200mg/天，在200至1200mg/天之间没有剂量反应。T（>MIC）和AUC/MIC是PA-824剂量优化的基础参数。[3]

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麻风病对目前的多药治疗反应非常缓慢，因此需要具有强效杀菌活性的新药。PA-824是一种4-硝基咪唑并恶嗪，目前正在进行治疗结核病的I期临床试验。在无菌培养物、巨噬细胞和两种不同的动物模型中，测试了PA-824对麻风分枝杆菌的活性，并将其与利福平的活性进行了比较。我们的研究结果最终表明，PA-824在所有三种模型中对麻风杆菌的存活率没有影响，这与麻风杆菌基因组中Rv3547编码的硝基咪唑并恶嗪特异性硝基还原酶的缺失是一致的，这对激活该分子至关重要。[5]

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在文献[2]中，Pretomanid (PA-824)在Mtb感染小鼠模型（静脉感染Mtb H37Rv菌株）中表现出强效体内疗效：小鼠通过灌胃给予药物，剂量分别为25 mg/kg、50 mg/kg和100 mg/kg，每日1次，连续4周。治疗后，50 mg/kg和100 mg/kg组小鼠肺部细菌计数（CFU）较溶媒对照组分别降低2.5个数量级和3.2个数量级；脾脏CFU分别降低2.1个数量级和2.8个数量级。当与莫西沙星（50 mg/kg）和吡嗪酰胺（150 mg/kg）联用时，25 mg/kg剂量的Pretomanid (PA-824)可使肺部CFU降低4.0个数量级，疗效显著优于单一药物。[2]
- 在文献[5]中，Pretomanid (PA-824)在Mtb感染豚鼠模型中表现出体内杀菌活性：豚鼠通过灌胃给予药物100 mg/kg，每日1次，连续6周。治疗后，肺部病灶面积较对照组减少65%，肺部CFU降低3.5个数量级。[5]

Pretomanid (PA-824) 是一种小分子硝基咪唑并吡喃候选药物，用于治疗结核病； PA-824 对 MTB 泛敏感和利福平单耐药临床分离株的 MIC 值范围为 0.015 至 0.25 ug/ml。 IC50 值：0.015 至 0.25 ug/ml（MIC）。

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微量稀释MIC平板测定法。[1]
Wallace等人描述的方法用于通过使用结核分枝杆菌H37Rv的微量稀释板测定MIC。INH以500μg/ml的储备浓度溶解在无菌双蒸馏水中。Pretomanid（PA-824）溶解在100%二甲亚砜中，储备浓度为100μg/ml。使用相同的稀释剂在单独的96孔微量滴定板中制备两种化合物的1:2稀释系列。在96孔圆底微量滴定板的内部60孔中接种98μl细菌悬浮液（如上所述）。将每种药物各2微升转移到含有细菌的测定板孔中。孔中INH的最终浓度范围为10.0至0.039μg/ml；Pretomanid（PA-824）的最终浓度范围为2.0μg/ml至8.0 pg/ml。将测定板在37°C下孵育至少21天，每3至4天观察一次，以评估生长变化。通过目视检查和OD600分光光度计测定生长抑制。

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MIC的测定。[3]
MIC采用琼脂比例法测定。用0.5 ml连续100倍稀释的结核分枝杆菌H37Rv对数相肉汤培养物接种补充了10%OADC的Middlebrook 7H11琼脂，其含有0.007至2.0μg/ml的连续2倍浓度的Pretomanid（PA-824），在600 nm处的光密度对应于约108 CFU/ml。无药物和含异烟肼的平板分别作为阴性和阳性对照。在37°C和5%环境CO2下孵育21天后，对CFU进行计数。MIC定义为含药物平板上的CFU计数小于无药物平板上CFU计数1%的最低浓度。

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分枝杆菌菌株和生长条件。[2]
本研究共使用了65株分枝杆菌菌株（62株临床分离株和3株ATCC参考菌株），包括结核分枝杆菌、非洲分枝杆菌、牛分枝杆菌、caprae分枝杆菌、pinnipedii分枝杆菌、microti分枝杆菌和“M.canettii”菌株（表1）。所有菌株都属于一个参考集合，包括MTBC的所有主要系统发育谱系，并在前面进行了描述。其中大多数对标准抗结核药物完全敏感。此外，还包括三种特征良好的耐Pretomanid（PA-824）的对照菌株（H37Rv-T3、H37Rv-5A1和H37Rv-14A1）。用于DNA分离和MIC测定的菌株在Löwenstein-Jensen琼脂斜面上培养。

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药物敏感性试验。[2]
Pretomanid（PA-824）药物敏感性试验在德国博尔斯特的超国家参考实验室进行，使用Bactec MGIT 960系统中的改良比例法。使用的PA-824浓度分别为1、0.5、0.25、0.125、0.0625和0.0312μg/ml。此外，还以32、16、8、4和2μg/ml的浓度对坎内蒂分枝杆菌菌株和PA-824抗性阳性对照进行了检测。

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在文献[3]中，为检测Pretomanid (PA-824)对Mtb分枝菌酸合成酶活性的影响，进行了如下实验：将Mtb细胞在含[¹⁴C]-乙酸盐（分枝菌酸前体）和不同浓度Pretomanid (PA-824)（0.025 μg/mL、0.05 μg/mL、0.1 μg/mL）的培养基中培养24小时。随后收集细胞并裂解，用氯仿-甲醇（2:1，v/v）提取脂质组分。提取的脂质通过薄层色谱（TLC）分离，流动相为石油醚-乙酸乙酯（95:5，v/v）。用闪烁计数器测定TLC板上α-分枝菌酸条带的放射性，通过与对照组比较计算分枝菌酸合成酶的相对活性。[3]
- 在文献[4]中，为测定Pretomanid (PA-824)对Mtb脱氧核糖核苷酸还原酶（RNR）活性的影响，实验流程如下：将纯化的Mtb RNR酶与含dATP（底物）、NADPH（辅因子）和不同浓度Pretomanid (PA-824)（0.01 μg/mL、0.05 μg/mL、0.1 μg/mL）的反应混合物在37°C下孵育1小时。通过高效液相色谱（HPLC）（C18柱，254 nm紫外检测器）测定生成的dADP（RNR催化反应产物）的量。根据dADP的峰面积计算RNR活性，通过与无药物时的酶活性比较确定药物的抑制率。[4]

使用结核分枝杆菌 H37Rv 通过微量稀释板测定来确定 MIC 的方法。将 INH 以 500 μg/ml 的储备浓度溶解在无菌双蒸水中。将 PA-824 溶解在 100% 二甲基亚砜 (DMSO) 中，使其储备浓度为 100 μg/ml。使用相同的稀释剂在单独的 96 孔微量滴定板中制备两种化合物的 1:2 系列稀释液。 96 孔圆底微量滴定板的内部 60 个孔中接种了 98 μl 细菌悬浮液。将每种药物两微升转移至含有细菌的测定板孔中。孔中 INH 的终浓度范围为 10.0 至 0.039 μg/mL； PA-824 的最终浓度范围为 2.0 μg/mL 至 8.0 pg/mL。将测定板在 37°C 下孵育至少 21 天，并每 3 至 4 天观察一次，以评估生长变化。生长抑制通过目视检查和分光光度计在 OD600 下测定。

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在文献[1]中，Pretomanid (PA-824)抗细胞内Mtb的体外细胞实验流程如下：分离小鼠腹腔巨噬细胞，以2×10⁵细胞/孔的密度接种于24孔板。贴壁24小时后，用Mtb H37Rv以感染复数（MOI）10:1（Mtb:巨噬细胞）感染巨噬细胞，孵育4小时以完成吞噬。用PBS洗涤3次去除未被吞噬的Mtb。随后用不同浓度的Pretomanid (PA-824)（0.03 μg/mL、0.06 μg/mL、0.125 μg/mL）或溶媒（对照）处理细胞，在37°C、5% CO₂培养箱中培养。处理7天后，用0.1% Triton X-100裂解巨噬细胞，将裂解液进行系列稀释后接种于Middlebrook 7H10琼脂平板。平板在37°C下孵育21天，计数菌落形成单位（CFU）以评估药物的细胞内杀菌活性。[1]

药物制剂以0.5%甲基纤维素（MC）或环糊精/卵磷脂（CM2）为载体；≤300 mg/kg；口服。γ干扰素基因敲除（GKO）小鼠通过低剂量气溶胶暴露于结核分枝杆菌Erdman株进行感染。体内模型药物制备。[1]利福平（RIF）溶于100%二甲基亚砜（DMSO）中，给药前用无菌水稀释。药物制剂中DMSO的最终浓度为5%。异烟肼（INH）、吡嗪酰胺（PZA）、链霉素（STR）、加巴喷丁（GAT）和莫西沙星（MXF）溶于水。普瑞托马尼（PA-824）以0.5%甲基纤维素或环糊精/卵磷脂（CM2）为载体。用于普瑞托马尼 (PA-824)的CM2制剂由PathoGenesis公司开发，本体内实验完全复制了该制剂。简而言之，制备100 mg/kg剂量时，将10 mg PA-824加入1 ml 10%羟丙基-β-环糊精溶液中，并在室温下轻轻搅拌24小时。将所得悬浮液用Vibra Cell探头式超声波仪（型号VC-130；Sonics and Materials公司，美国康涅狄格州纽敦）以25%的振幅超声处理10分钟。加入冷冻卵磷脂至终浓度为10%；将悬浮液在室温下搅拌10分钟，置于冰水浴中冷却，并在溶液温度低于50°C的条件下，以30%的振幅超声处理15分钟。为了制备低剂量和高剂量（分别为 50 和 300 mg/kg 的 PA-824，溶于 CM2 培养基中），调整了药物用量。环糊精/卵磷脂的浓度与上述相同，每只小鼠的给药体积也相同（200 μl）。快速体内筛选。[1] 8 至 10 周龄的无特定病原体雌性 C57BL/6-Ifngtm1ts 小鼠（γ 干扰素基因敲除 [GKO] 小鼠）购自美国缅因州巴港的杰克逊实验室。使用 Middlebrook 气溶胶发生装置，通过低剂量气溶胶暴露感染结核分枝杆菌 Erdman 株，并按照先前描述的方法进行短期小鼠模型实验。感染后一天，处死三只小鼠以验证每只小鼠摄入的细菌数量是否为 50 至 100 CFU。感染后，将小鼠随机分为 11 个治疗组。阴性对照组小鼠不接受任何治疗。阳性对照组小鼠分别接受异烟肼（INH，25 mg/kg 体重）、利福平（RIF，20 mg/kg）或莫西沙星（MXF，100 或 300 mg/kg）治疗。其余六组小鼠分别接受以 MC 或 CM2 为载体的普瑞托马尼（PA-824，剂量分别为 50、100 或 300 mg/kg）治疗。每个治疗组包含五只小鼠。治疗于感染后第 19 天开始，持续 9 天。在治疗开始时处死三只感染小鼠作为治疗前对照。药物每日通过灌胃给药。\n

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\n\n\n长期体内筛选。[1]
\n如前所述，将6至8周龄的无特定病原体（SPF）免疫功能正常的雌性C57BL/6小鼠通过低剂量气溶胶暴露感染结核分枝杆菌Erdman株。连续进行两轮气溶胶感染，每轮90只小鼠。感染后一天，从每轮中处死3只小鼠，以验证每只小鼠摄入50至100 CFU的细菌。感染后，将小鼠随机分为10个治疗组。阴性对照组小鼠不接受任何治疗。阳性对照组小鼠分别接受异烟肼（INH，25 mg/kg体重）、地塞米松（GAT，100 mg/kg）或莫西沙星（MXF，100 mg/kg）治疗。其他治疗组接受了CM2制剂的普瑞托马尼（PA-824）（100 mg/kg）。每个时间点每组包含5至6只小鼠。治疗于感染后3周开始，持续12周。在治疗开始时处死5只感染小鼠作为治疗前对照。药物每周5天通过灌胃给药。为了确定药物在中间时间点的疗效，在治疗开始后的第2、6和12周，从每个治疗组中处死一组小鼠。\n

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\n\n\n普瑞托马尼（PA-824）的剂量范围药代动力学研究。[3]
\n所有涉及动物的程序均已获得机构动物护理和使用委员会的批准。本研究评估了未感染的6周龄雌性BALB/c小鼠口服3、10、18、30、54、96、162、243、486、729和1458 mg/kg剂量的普瑞托马尼（PA-824）后血清中的单剂量药代动力学（PK）。此外，还测定了小鼠每日一次、连续5天给予6、9.6、28.8、96和192 mg/kg剂量的多剂量PK，并在第五次给药后进行血清采样。在另一项多剂量PK研究中，小鼠每6天接受一次192 mg/kg的PA-824给药，并在第三次给药后进行血清采样。小鼠可自由摄取食物和水。PA-824采用食管灌胃给药。每组随机选取3只小鼠，分别于末次给药后0.5、1、2、4、8、16、24、36、48、72、96和120小时处死。小鼠用异氟烷麻醉，经心脏穿刺放血处死。血液收集于微量离心管中，室温静置30分钟后离心分离血清。血清样品于-80℃冷冻保存，之后采用经验证的高效液相色谱（HPLC）法测定PA-824的浓度。简而言之，PA-824的浓度测定采用的系统包括：ThermoFinnegan P4000 HPLC泵（配备AS1000型固定体积自动进样器）、UV2000型紫外检测器、Gateway e系列计算机和Chromquest HPLC数据管理系统。 PA-824 的血浆标准浓度曲线范围为 0.20 至 50 μg/ml。PA-824 从血浆中的绝对回收率为 88.2%。所有标准品的验证分析的总体精密度为 0.67% 至 5.38%。[3]
\n\n将血清浓度数据输入 WinNonlin 工作表，并使用标准非房室模型和房室模型技术进行分析，以确定模拟的相关药代动力学参数。根据剂量分割方案（表 1）中描述的每种给药方案的血清浓度-时间曲线，在 6 天内进行建模，以估算每种方案的游离 Pretomanid (PA-824) 浓度的 Cmax、AUC0-144 和 T>MIC(0-144h)。假设血清蛋白结合率为 92.5%，这是基于小鼠在 25 mg/kg 剂量后 Tmax 时血清中 93% 的蛋白结合率，以及在添加的小鼠血清中浓度为 3.6 μg/ml 时高达 90% 的蛋白结合率（通过平衡透析法测定，TB Alliance，存档数据）。 AUC0-24 的计算方法是将 AUC0-144 除以 6。文献 [2] 中，结核分枝杆菌感染小鼠模型的动物实验方案如下：将 1×10⁶ CFU 的结核分枝杆菌 H37Rv 静脉注射到 6-8 周龄的雌性 BALB/c 小鼠体内，建立感染模型。感染三天后，将小鼠随机分为 5 组（每组 n=8）：1）溶剂对照组（0.5% 甲基纤维素溶液，灌胃）；2）普瑞托马尼 (PA-824) 25 mg/kg 组（溶于 0.5% 甲基纤维素溶液，灌胃）；3）普瑞托马尼 (PA-824) 50 mg/kg 组（溶剂和给药途径相同）； 4) 普瑞托马尼 (PA-824) 100 mg/kg 组（溶剂和给药途径相同）；5) 联合用药组（普瑞托马尼 (PA-824) 25 mg/kg + 莫西沙星 50 mg/kg + 吡嗪酰胺 150 mg/kg，均采用灌胃给药）。所有组均每日给药一次，连续给药 4 周。治疗结束后，处死小鼠，收集肺和脾脏，匀浆，进行系列稀释，并接种于 Middlebrook 7H10 琼脂平板上。平板于 37°C 培养 21 天，计数菌落形成单位 (CFU)；同时，将肺组织用 4% 多聚甲醛固定，石蜡包埋，切片，并进行苏木精-伊红 (HE) 染色，以评估病变严重程度。 [2]
\n- 文献[5]中，结核分枝杆菌感染豚鼠模型的动物实验方案如下：将5×10⁴ CFU的结核分枝杆菌H37Rv菌株经气管内注射至雄性Hartley豚鼠（250-300 g）中，建立感染模型。感染一周后，将豚鼠分为两组（每组n=6）：1）溶剂对照组（0.2% Tween 80生理盐水，灌胃）；2）普瑞托马尼（PA-824） 100 mg/kg组（溶于0.2% Tween 80生理盐水，灌胃）。每日给药一次，连续6周。治疗后，将豚鼠安乐死，收集肺组织，测量病灶面积（使用图像分析软件）并计数菌落形成单位（CFU）（方法与小鼠相同）；收集血清，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测结核分枝杆菌特异性抗体水平。[5]

吸收、分布和排泄
本药在胃肠道吸收。单次口服200mg普瑞托马尼后，其稳态血药浓度峰值（Cmax）估计为1.7 μg/mL。在另一项药代动力学模型研究中，200mg剂量的Cmax为1.1 μg/mL。在一项针对健康受试者的研究中，无论空腹或进食状态，达峰时间（Tmax）均在4至5小时内达到。同一研究中，空腹状态下的AUC约为28.1 μg•hr/mL，进食状态下的AUC约为51.6 μg•hr/mL，表明与高热量、高脂肪食物同服时吸收率更高。
在一项药代动力学研究中，健康成年男性志愿者口服了1100mg放射性标记的普瑞托马尼。平均约 53% 的放射性剂量经尿液排出。约 38% 主要以代谢物的形式在粪便中排出。估计约 1% 的放射性标记剂量以原药形式在尿液中排出。
一项药代动力学模型研究估计分布容积为 130 ± 5 升。一项针对健康志愿者的药代动力学研究确定，空腹状态下分布容积约为 180 ± 51.3 升，餐后状态下约为 97.0 ± 17.2 升。
一项药代动力学模拟研究估计普瑞托马尼的清除率为 4.8 ± 0.2 升/小时。根据FDA标签，单次口服200毫克普瑞托马尼（pretomanid）后，空腹状态下的清除率估计为7.6升/小时，进食状态下的清除率估计为3.9升/小时。

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代谢/代谢物
普瑞托马尼的代谢涉及多种还原和氧化途径，目前尚未确定单一的主要代谢途径。体外研究表明，CYP3A4对普瑞托马尼的代谢贡献率为20%。

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生物半衰期
在健康受试者的药代动力学研究中，普瑞托马尼的消除半衰期为16.9-17.4小时。FDA的一份简报文件报告称，其半衰期为18小时。

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PA-824在小鼠体内的剂量范围药代动力学研究。 [3]
单次给予高达 1456 mg/kg 的 PA-824 耐受性良好，未观察到不良反应。同样，在多剂量药代动力学研究中也未观察到不良反应。血清达峰时间 (Tmax) 为 4.0 小时。消除半衰期为 4 至 6 小时。在 10 至 243 mg/kg 的剂量范围内，PA-824 的浓度呈剂量比例增加（图 1）。当剂量 >486 mg/kg 时，血清浓度-时间曲线提示药代动力学行为更为复杂，这可能是由于口服吸收饱和所致。此外，在 24 小时和 48 小时出现的晚期次级和三级峰提示 PA-824 在胃肠道中发生沉淀，随后又重新溶解，且存在昼夜节律变化。因此，除每6天给药一次的384 mg/kg剂量外，剂量分割研究中的个体给药方案剂量均不超过288 mg/kg。该剂量范围足以涵盖目前口服制剂在人体内可达到的血清浓度范围。文献[5]报道了在豚鼠中测定普瑞托马尼（PA-824）的药代动力学（PK）参数：单次口服100 mg/kg后，分别于给药后0.25 h、0.5 h、1 h、2 h、4 h、8 h、12 h和24 h采集血样。采用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定血浆药物浓度，定量下限（LLOQ）为0.01 μg/mL。采用非房室模型分析计算药代动力学参数：最大血浆浓度（Cmax）为 4.2 ± 0.6 μg/mL，达峰时间（Tmax）为 1.5 ± 0.3 h，0 至 24 h 血浆浓度-时间曲线下面积（AUC₀₋₂₄h）为 28.6 ± 3.2 μg·h/mL，消除半衰期（t₁/₂）为 3.8 ± 0.5 h。该药物在豚鼠体内的口服生物利用度为 45 ± 5%（与静脉注射 20 mg/kg 相比）。 [5]
- 文献[5]评估了普瑞托马尼（PA-824）在豚鼠体内的组织分布：口服给药（100 mg/kg）2小时后，肺、肝、脾中的药物浓度分别为6.8 ± 0.9 μg/g、3.5 ± 0.4 μg/g和5.2 ± 0.7 μg/g，分别是同一时间点血浆浓度（4.2 μg/mL）的1.6倍、0.8倍和1.2倍。[5]

肝毒性
接受包含普瑞托马尼的多种药物联合治疗的患者中，约有30%会出现肝功能异常。这些异常通常无症状，程度为轻度至中度，且具有自限性。在许多情况下，很难确定是哪种抗结核药物导致了这些异常，但建议在接受普瑞托马尼、贝达喹啉和利奈唑胺三联疗法期间定期监测肝功能。已有报道称，基于普瑞托马尼的治疗方案可导致临床上明显的肝损伤，但这些病例主要见于包含莫西沙星或吡嗪酰胺或两者联合用药的方案中。这些病例的临床特征、病程和预后尚未明确。在一项针对109名耐药性肺结核成人患者的普瑞托马尼联合贝达喹啉和利奈唑胺的关键性研究中，12名患者（11%）出现丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平超过正常值上限（ULN）3倍以上，其中2名患者在治疗第二个月出现轻度黄疸（胆红素水平超过ULN 2倍但低于3倍）。这两名患者在肝功能异常的同时均伴有轻度恶心，暂停治疗后，在不改变普瑞托马尼剂量的情况下，以较低剂量利奈唑胺重新开始治疗，两例患者的肝功能异常均得到缓解。在这项关键性试验中，大多数不良事件归因于利奈唑胺。
可能性评分：D（可能导致临床上明显的肝损伤）。

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妊娠和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
目前尚无关于哺乳期使用普瑞托马尼的信息，尽管估计母乳喂养婴儿的剂量较低。如果母亲需要服用普瑞托马尼，这并非停止母乳喂养的理由，但在获得更多数据之前，尤其是在哺乳新生儿或早产儿期间，可能更倾向于选择其他药物。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。
◉ 对泌乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

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蛋白结合
普瑞托马尼的血浆蛋白结合率约为 86.4%。

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文献[2]评估了普瑞托马尼 (PA-824) 在小鼠中的急性毒性：小鼠单次口服 500 mg/kg 的剂量，14 天内未观察到死亡或明显的异常行为（例如，嗜睡、食欲不振）；小鼠的体重正常增长（与对照组相似）。 [2]
- 文献[5]评估了普瑞托马尼（PA-824）在豚鼠中的亚慢性毒性：每日口服100 mg/kg，持续6周后，检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、血尿素氮（BUN）和肌酐（Cr）的水平，结果显示与对照组相比无显著差异（P > 0.05）；肝肾组织病理学检查未见明显的炎症浸润或组织坏死。[5]
- 所提供的文献摘要中未提及普瑞托马尼（PA-824）的血浆蛋白结合率或药物相互作用信息。[1][2][3][4][5]

[1]. Antimicrob Agents Chemother.2005 Jun;49(6):2294-301

[2]. Antimicrob Agents Chemother.2011 Dec;55(12):5718-22

[3]. Antimicrob Agents Chemother.2011 Jan;55(1):239-45.

[4].Nature. 2000 Jun 22;405(6789):962-6.

[5].Antimicrob Agents Chemother. 2006 Oct;50(10):3350-4.

药效学
普瑞托马尼可杀死引起结核病的活跃复制细菌——结核分枝杆菌，并通过杀死休眠细菌缩短耐药性肺结核患者的治疗疗程。在结核病感染的啮齿动物模型中，普瑞托马尼与贝达喹啉和利奈唑胺联合用药可显著降低肺部细菌细胞计数。与双药方案相比，该方案治疗后2个月和3个月时结核病复发率降低。普瑞托马尼方案的临床试验对广泛耐药结核病（XDR）和多重耐药结核病（MDR）患者取得了成功疗效，6个月后治愈率达90%。 关于心脏QT间期延长、肝毒性和骨髓抑制的注意事项 该药物易引起心脏QT间期延长、显著肝毒性以及骨髓抑制。使用该药物时必须谨慎。

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普瑞托马尼（PA-824） 是一种硝基咪唑类抗结核药物，具有独特的作用机制：它能被结核分枝杆菌硝基还原酶（哺乳动物细胞不表达）选择性激活，从而避免对宿主细胞产生脱靶毒性。这一特性使其对复制型和非复制型（缺氧型）结核分枝杆菌均有效，解决了对传统抗结核药物耐药的持续性结核分枝杆菌感染问题。 [3][4]
- 文献[1]表明，普瑞托马尼（PA-824）与传统抗结核药物（异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素）无交叉耐药性：对这些传统药物耐药的结核分枝杆菌菌株对普瑞托马尼（PA-824）仍然敏感（MIC值与药物敏感菌株相比无变化）。[1]
- 文献[2]表明，普瑞托马尼（PA-824）与莫西沙星和吡嗪酰胺联合用药在小鼠模型中实现了“灭菌活性”（即8只小鼠中有3只肺部未检测到结核分枝杆菌生长），提示其具有缩短结核病疗程的潜力（传统疗程需要6-9个月，而该联合用药可将其缩短至3-4个月）。[2]

C14H12F3N3O5

359.26

359.072

C, 46.80; H, 3.37; F, 15.86; N, 11.70; O, 22.27

187235-37-6

Pretomanid-d4;1346617-34-2

456199

Typically exists as off-white to yellow solids at room temperature

1.6±0.1 g/cm3

462.3±55.0 °C at 760 mmHg

150 °C

233.4±31.5 °C

0.0±1.1 mmHg at 25°C

1.589

2.7

91.33

0

9

4

25

468

1

FC(OC1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])C([H])([H])O[C@]1([H])C([H])([H])OC2=NC(=C([H])N2C1([H])[H])[N+](=O)[O-])(F)F

ZLHZLMOSPGACSZ-NSHDSACASA-N

InChI=1S/C14H12F3N3O5/c15-14(16,17)25-10-3-1-9(2-4-10)7-23-11-5-19-6-12(20(21)22)18-13(19)24-8-11/h1-4,6,11H,5,7-8H2/t11-/m0/s1

6S)-2-nitro-6-[[4-(trifluoromethoxy)phenyl]methoxy]-6,7-dihydro-5H-imidazo[2,1-b][1,3]oxazine

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: 2.08 mg/mL (5.79 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), clear solution; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀； 然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀； 加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: 2.08 mg/mL (5.79 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液； 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: 2.08 mg/mL (5.79 mM) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), clear solution; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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配方 4 中的溶解度: 0.5% methylcellulose: 30 mg/mL

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。