| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 500mg |
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| 体外研究 (In Vitro) |
磷酰胆碱材料是一种仿生聚合物，其分子结构与细胞脂质膜中主要的两性离子磷脂头部基团相似，类似于红细胞的细胞外表面。PC聚合物的磷酰胆碱侧链包含磷脂酰胆碱和磷脂酰丝氨酸中的磷酸基团，后者是一种参与生物矿化并能结合钙的膜脂成分[1]。
将人成骨细胞（HOb）培养在未包被、PC5（5% CMA）包被和PC20（20% CMA）包被的表面上。与低电荷（PC5）和中性（PC0）表面相比，高阳离子电荷的磷酰胆碱（PC20）增加了HOb细胞的黏附。在6、24和48小时，组织培养塑料对照组的细胞数量最多。在所有三个时间点，对照组与PC0组之间以及PC20组与PC0组之间均观察到显著差异（P<0.001）。在24小时和48小时，PC20组与PC5组之间也观察到显著差异（P<0.001）。[1] 在28天内，PC20组和对照组上的HOb细胞数量增加，而PC5组上的HOb细胞数量则随时间推移而减少，直至28天。从第1天开始，在所有时间点，PC5组、PC20组和对照组之间均存在显著差异（P<0.001）。在所有时间点，对照组的细胞增殖均显著高于PC20组（P<0.001）。[1] 在PC20组中，每千个细胞的碱性磷酸酶（ALP）活性在前3天内下降；在对照组中，ALP活性在第1天和第2天之间下降。此后，ALP活性未发生显著变化，且在第2天后PC20与对照组之间未发现显著差异。PC5的ALP活性过低，无法进行准确测量。[1] 48小时的光学显微镜观察显示，PC20和对照组表面具有数量最多的HOb细胞，这些细胞形态完全铺展，并存在矿物质沉积。PC0的细胞黏附性较差，细胞呈圆形；PC5的细胞数量多于PC0，但细胞仍呈圆形。[1] 48小时和28天的SEM-EDX分析证实，PC20和对照组表面存在含有钙和磷的矿物质沉积。这些沉积物的Ca:P比约为0.6，远低于羟基磷灰石（1.5-1.67），表明其为缺钙矿物质。矿物质沉积量随时间增加，直至28天。[1] |
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| 体内研究 (In Vivo) |
将涂覆有PC0、PC6（6% CMA）、PC20、未涂覆（阴性对照）或羟基磷灰石（HA，阳性对照）的不锈钢钉植入大鼠右侧胫骨。植入后14周，对骨-植入物界面和界面区域进行组织学分析。HA组的骨和骨髓沉积量显著高于纤维组织和松散结合基质（LAM）（P<0.05）。带阳离子电荷的PC材料（PC6和PC20）产生类似的结果，不同组织类型之间无显著差异。PC0和不锈钢（SS）组的纤维组织显著高于骨/骨髓和LAM（P<0.05）。与其他四种表面相比，HA组的骨/骨髓沉积量最高，纤维组织最少（P<0.05）。 PC0 的纤维组织含量显著高于 PC6 (P<0.05)，但 PC0 与 PC20 之间以及 PC0 与 SS 之间无显著差异。随着种植体界面区域 (R²=0.9) 和界面处 (R²=0.7) CMA 含量的增加，LAM 呈线性增加趋势。所有 PC 涂层种植体均未观察到明显的骨结合；取而代之的是纤维组织和 LAM 的存在。[1]
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| 酶活实验 |
碱性磷酸酶 (ALP) 活性是与骨骼矿化相关的成骨细胞分化的早期标志物，本研究对其进行了测定。将 0.5 M 2-氨基-2-甲基-1-丙醇 (AMP) 溶于蒸馏水中配制成 pH 10 的底物缓冲液，并添加 2 mM 氯化镁和 9 mM 对硝基苯酚磷酸酯 (p-NPP)。在碱性溶液中，ALP 可催化 p-NPP 生成对硝基苯酚，后者呈黄色。采用冻融循环法在不同时间点（1、2、4、7、14 和 28 天）裂解细胞。取 50 µL 各裂解液（一式两份）和 50 µL 不同浓度的对硝基苯酚溶液（用于绘制标准曲线）转移至 96 孔板中。然后向每个孔中加入50 µL AMP缓冲液，并将反应板在37°C下孵育15分钟。在405 nm处读取吸光度。绘制吸光度与对硝基苯酚浓度的标准曲线，以确定总ALP含量。[1]
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| 细胞实验 |
从髋骨分离的人成骨细胞 (HOb) 在 T75 培养瓶中，于含有 10% 胎牛血清 (FBS)、1% 谷氨酰胺和 30 µg/mL 维生素 C 的 McCoy's 5a 培养基中，在 37°C、5% CO2 湿度条件下培养。当细胞汇合度达到 60-80% 时，用 Hank's 平衡盐溶液 (HBSS) 洗涤细胞，用胰蛋白酶/EDTA 消化使细胞脱落，用培养基中和，以 220×g 离心 4 分钟，然后重悬细胞，使用血细胞计数器进行计数。[1]
为了确定细胞数量，将细胞培养在未包被、PC5 包被和 PC20 包被的 T25 培养瓶中，培养时间最长可达 28 天。在特定时间点（6 小时、1、2、4、7、14 和 28 天），吸出培养基，用 PBS 洗涤细胞，并加入 1 mL 0.5% (v/v) Triton X-100 的 PBS 溶液。采用两次冻融循环（-70°C 和 37°C，每次 15 分钟）裂解细胞。取 180 µL 裂解液一式两份转移至白色 96 孔板中，加入 20 µL ATP 检测试剂，并立即使用发光仪读取 ATP 浓度。使用预先设定的 HOb 细胞数量（0、2500、5000、10000、20000 和 40000 个细胞）在未包被的孔板上绘制标准曲线来确定细胞数量。 [1] 对于光学成像和扫描电镜/能谱分析（SEM/EDX），将HOb细胞以12×10³/cm²的密度接种于分别涂覆PC0、PC5、PC20或未涂覆对照的T25培养瓶中，培养48小时和28天。进行相差显微镜观察。对于扫描电镜观察，用PBS缓冲液洗涤细胞，用4%多聚甲醛固定，再用蒸馏水洗涤，然后将每个培养瓶中约20×20 mm的细胞块安装在扫描电镜样品台上，喷镀碳膜，并在5 kV电压下成像。使用能谱分析表征矿物渗出物的元素组成。[1] |
| 动物实验 |
本研究使用了30只成年Sprague Dawley大鼠（300-350 g）。将医用级不锈钢（316L）针清洗干净，并在丙酮和乙醇中进行超声处理，然后随机分为五组（每组n=6）：未涂层组（阴性对照）、等离子喷涂羟基磷灰石组（厚度60-100 µm，阳性对照）以及分别浸涂PC0、PC6或PC20聚合物溶液（5 mg/mL乙醇溶液）组，涂层厚度约为30-50 nm，然后在70°C下固化4小时。针经γ射线（25 kGy）灭菌。[1]
在麻醉箱中，以6 L/min的流速通入氧气和4%氟烷的混合气体进行麻醉。腹腔注射咪达唑仑（3 mg/kg），并用4%氟烷面罩维持大鼠麻醉。剃除右后肢毛发，皮下注射卡洛芬（5 mg/mL）进行围手术期镇痛。在髌骨外侧做1.5 cm切口，进行外侧关节囊切开术，使髌骨向内侧脱位，暴露胫骨平台。使用直径1.5 mm的手钻钻穿胫骨平台中心，深度10 mm，并进行沉头处理（4 mm沉头孔）。将螺钉压入胫骨，复位髌骨，缝合切口。术后立即肌注抗生素（阿莫西林克拉维酸钾，150 mg/kg）和皮下注射镇痛药（丁丙诺啡，0.15 mg/kg）。 5小时后给予第二次镇痛注射（丁丙诺啡，0.1 mg/kg）。14周后处死大鼠。取出胫骨，用多聚甲醛固定，洗涤，用变性酒精（50-100%）脱水，在真空条件下用丙酮脱脂7天，然后包埋于聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）中。使用金刚石锯切割纵切片（厚度300-500 µm），研磨抛光至100 µm厚，用甲苯胺蓝染色（pH 9，56°C，30分钟），每张切片取五个视野进行数码拍照，用于组织学分析。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
磷酰胆碱聚合物（PC0、PC6、PC20）被描述为在骨骼中具有生物耐受性，可刺激植入物周围纤维组织和松散基质（LAM）的生成。但未报告定量毒性参数（例如，LD50、器官毒性、蛋白质结合）。对于PC0和不锈钢，纤维组织显著多于骨/骨髓和LAM（P<0.05）。阳离子电荷（CMA含量）的增加与LAM形成呈线性增加（R²=0.7-0.9），提示可能存在不良组织反应。未提供其他毒性信息。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
磷酸胆碱氯化物是一种由磷酸阳离子和氯离子组成的有机氯化物。它含有磷酸胆碱和氯离子。钙盐和镁盐可用于治疗肝胆功能障碍。磷酸胆碱聚合物因其低蛋白吸附、减少补体激活、炎症反应和细胞粘附等优点，已被用于多种医疗器械中以提高生物相容性。然而，对于需要骨-植入物整合的骨科应用，未改性的磷酸胆碱并不适用。阳离子改性（掺入甲基丙烯酸胆碱，CMA）曾被尝试用于提高其生物活性。尽管体外实验表明，PC20 可促进成骨细胞粘附、分化和磷酸钙沉积，但体内实验表明，这些材料并未促进骨结合，反而诱导了纤维组织和淋巴管肌瘤病（LAM）。作者得出结论，开发这些阳离子改性的磷酸胆碱聚合物作为骨界面植入物涂层是不合理的。不带电荷的聚碳酸酯聚合物在骨骼环境中具有良好的耐受性，因此可能用于涂覆骨科器械，以递送抗生素，从而减少手术部位感染，尤其适用于无需骨结合的情况。[1]
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| 分子式 |
C5H15CLNO4P
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|---|---|
| 分子量 |
219.60400
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| 精确质量 |
219.042
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| CAS号 |
107-73-3
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| PubChem CID |
7886
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| 外观&性状 |
Colorless to light yellow solid-liquid Mixture
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| tPSA |
76.57
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
12
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| 分子复杂度/Complexity |
158
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=P(OCC[N+](C)(C)C)(O)O.[Cl-]
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| InChi Key |
PYJNAPOPMIJKJZ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C5H14NO4P.ClH/c1-6(2,3)4-5-10-11(7,8)9;/h4-5H2,1-3H3,(H-,7,8,9);1H
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| 化学名 |
trimethyl(2-phosphonooxyethyl)azanium;chloride
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~250 mg/mL (~1138.43 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 100 mg/mL (455.37 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.5537 mL | 22.7687 mL | 45.5373 mL | |
| 5 mM | 0.9107 mL | 4.5537 mL | 9.1075 mL | |
| 10 mM | 0.4554 mL | 2.2769 mL | 4.5537 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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