Piperlongumine (Piplartine)

别名: Piperlongumine; 20069-09-4; SGD66V4SVJ; 1-[(E)-3-(3,4,5-trimethoxyphenyl)prop-2-enoyl]-2,3-dihydropyridin-6-one; Piplartine 荜茇酰胺; 荜拨; 荜茇酰胺标准品对照品;(E)-1-[3-(3,4,5-三甲氧基苯基)丙烯酰基]-5,6-二氢吡啶-2(1H)-酮; 5,6-二氢-1-[1-氧代-3-(3,4,5-三甲氧基苯基)-反式-2-丙烯基]-2(1H)-吡啶酮; 荜拨明宁碱
目录号: V5279 纯度: ≥98%
Piperlongumine (Piplartine) 是一种从辣椒,尤其是荜荠等荜荠中分离出来的天然存在的生物碱,具有生物活性,具有抗炎、抗菌、抗血管生成、抗氧化、抗肿瘤和抗糖尿病活性。
Piperlongumine (Piplartine) CAS号: 20069-09-4
产品类别: ERK
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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纯度/质量控制文件

纯度: ≥98%

产品描述
Piperlongumine (Piplartine) 是一种天然存在且具有生物活性的生物碱,已从辣椒中分离出来,特别是像 Piper longum Linn 这样的长辣椒。它具有抗炎、抗菌、抗血管生成、抗氧化、抗肿瘤和抗糖尿病特性。在癌细胞系中,piperlongumine 会导致 ROS 的产生和细胞凋亡。 Piperlongumine 通过阻断 ERK1/2 信号通路来抑制肌成纤维细胞转化,并具有抗心脏纤维化活性。阿育吠陀医学用于治疗包括肿瘤在内的多种疾病,使用荜拔作为最受欢迎的草药之一。匹普拉汀的药理作用被描述为包括细胞毒性、基因毒性、抗肿瘤、抗血管生成、抗转移、抗血小板聚集、抗伤害、抗焦虑、抗抑郁、抗动脉粥样硬化、抗糖尿病、抗菌、抗真菌、杀利什曼病、杀锥虫和杀血吸虫作用。匹普拉汀众多的药理作用中最有前途的是它的抗癌能力。
生物活性&实验参考方法
靶点
reactive oxygen species (ROS); TrxR1; CRM1; PI3K/Akt/mTOR
Piperlongumine (PPLGM) is described as a reactive oxygen species (ROS) inducer. Its anticancer effects are mediated through ROS-induced DNA damage.[1]
体外研究 (In Vitro)
Piperlongumine 是一种已知的 ROS 诱导剂,有可能导致培养中的胰腺癌细胞死亡[1] Piperlongumine(一种血栓素 A(2) 受体拮抗剂)可防止血小板聚集。 [2] 除了促进自噬和介导癌细胞死亡外,piperlongumine 还可抑制 Akt/mTOR 信号传导。 [3]
Piperlongumine (PPLGM) 以浓度和时间依赖性方式抑制三种人胰腺癌细胞系(PANC-1、MIA PaCa-2 和 BxPC-3)的生长,通过alamarBlue测定法测得处理72小时后的IC50值分别为4.2 µM、4.6 µM和4.2 µM。[1]
Piperlongumine (PPLGM) 以浓度依赖性方式降低胰腺癌细胞的长期克隆形成存活率。用5 µM和10 µM PPLGM处理可完全消除MIA PaCa-2和BxPC-3细胞的集落形成。[1]
Piperlongumine (PPLGM) (10 µM) 处理6小时后,通过DCF-DA测定法和流式细胞术检测,在所有三种胰腺癌细胞系中均显著升高了细胞内ROS水平。相对于对照组的ROS增加倍数约为:PANC-1 9倍,MIA PaCa-2 24倍,BxPC-3 8倍。[1]
Piperlongumine (PPLGM) (10 µM) 处理MIA PaCa-2细胞24小时,可诱导DNA片段化(DNA laddering),其效果与阳性对照吉西他滨 (5 µM) 相似。通过光密度法定量评估了DNA损伤程度。[1]
Western blot分析显示,用 Piperlongumine (PPLGM) (10 µM) 处理MIA PaCa-2细胞24小时,增加了Chk1蛋白在Ser296位点的磷酸化 (pChk1 S296),表明DNA损伤反应被激活。[1]
与抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸 (NAC, 3 mM) 联合处理,可部分逆转 Piperlongumine (PPLGM) 诱导的细胞死亡,并减少MIA PaCa-2细胞的DNA片段化,表明ROS生成是其细胞毒性机制的核心。[1]
定量PCR分析显示,用 Piperlongumine (PPLGM) (10 µM) 处理PANC-1细胞24小时,并未显著改变关键抗氧化酶(SOD1、GSTP1、HO1)的mRNA表达水平。[1]
体内研究 (In Vivo)
Piperlongumine (50 mg/kg ip) 可抑制肿瘤细胞体内生长,但不会显着改变生化、血液学或组织病理学参数。 [4]
在PANC-1异种移植小鼠模型中,每日腹腔注射 Piperlongumine (PPLGM) (2.4 mg/kg),连续30天,与溶媒对照组(1% DMSO)相比,显著抑制了肿瘤生长。治疗组的最终肿瘤质量比对照组低约50%。[1]
对治疗组小鼠肿瘤的免疫组织化学分析显示,与对照组小鼠肿瘤相比,增殖标志物Ki-67显著减少,而氧化性DNA损伤标志物8-羟基-2'-脱氧鸟苷 (8-OHdG) 显著增加。[1]
该治疗方案耐受性良好,治疗组与对照组之间,最终体重以及主要器官(肾脏、肝脏、肺、脾脏)的重量均未观察到显著差异。[1]
细胞实验
将不同浓度的 PL 与 MCF-7 和 786-O 细胞一起孵育 48 小时。 CellTiter Blue 测定用于分析细胞增殖。借助 Microsoft Excel 插件 XLift,可以计算有效剂量 (ED)。
AlamarBlue细胞活力测定: 将PANC-1、MIA PaCa-2和BxPC-3细胞接种于96孔板(每孔5.0×10³个细胞)。24小时后,用不同浓度的 Piperlongumine (PPLGM) (0–20 µM) 处理细胞。加入alamarBlue试剂至终浓度为10%,在37°C下孵育4小时。测量570 nm和600 nm处的吸光度。计算alamarBlue的还原百分比,以确定相对于对照的细胞活力。[1]
克隆形成存活实验: 以低密度(每孔5×10²个细胞)将PANC-1、MIA PaCa-2和BxPC-3细胞接种于24孔板中。第二天,用不同浓度的 Piperlongumine (PPLGM) (0–20 µM) 处理细胞24小时。然后更换为不含药物的新鲜培养基,让细胞不受干扰地生长14天以形成集落。固定集落,用结晶紫染色,并手动计数。[1]
细胞内ROS测量(DCF-DA测定): 用10 µM Piperlongumine (PPLGM) 处理胰腺癌细胞(5.0×10⁵ 细胞/mL)6小时。收集细胞,重悬于含有10 µM DCF-DA的PBS中,在37°C孵育30分钟。通过流式细胞术测量氧化DCF的荧光强度,该强度指示ROS水平。[1]
DNA片段化实验(DNA laddering): 用10 µM Piperlongumine (PPLGM)、5 µM吉西他滨(阳性对照)或溶媒处理MIA PaCa-2细胞(5.0×10⁵个细胞)24小时。提取基因组DNA,在含溴化乙锭的1.5%琼脂糖凝胶上电泳分离,并在紫外光下观察,以评估DNA片段化情况。[1]
Western Blot分析: 用10 µM Piperlongumine (PPLGM) 或5 µM吉西他滨处理MIA PaCa-2细胞(1×10⁶个细胞)24小时。裂解细胞,通过SDS-PAGE分离蛋白质,转印至硝酸纤维素膜,并用抗磷酸化Chk1 (S296) 和总Chk1的抗体进行检测。使用化学发光法检测蛋白条带。[1]
定量PCR (qPCR): 从用或不用10 µM Piperlongumine (PPLGM) 处理24小时的PANC-1细胞中提取总RNA。合成cDNA,并使用基于SYBR Green的实时荧光定量PCR定量抗氧化基因(SOD1、GSTP1、HO1)的mRNA水平,以18S rRNA作为内参。[1]
动物实验
移植肉瘤180肿瘤的小鼠
~50 mg/kg
腹腔注射
异种移植模型及治疗:将2.0×10⁶个PANC-1细胞皮下注射到6-8周龄的雌性无胸腺裸鼠后侧腹部。待肿瘤形成后,将小鼠随机分为两组(n=8)。对照组每日腹腔注射溶剂(1% DMSO PBS溶液)。治疗组每日腹腔注射胡椒碱(PPLGM),剂量为2.4 mg/kg体重(溶于DMSO,再用PBS稀释至最终DMSO浓度为1%),连续30天。每周测量肿瘤大小三次,并使用公式V = (L × W²)/2计算肿瘤体积。每周监测小鼠体重。 30天后,对小鼠实施安乐死,并采集肿瘤和主要器官进行分析。[1]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
在异种移植小鼠研究中,每日腹腔注射胡椒碱(PPLGM)(2.4 mg/kg),持续30天,耐受性良好。治疗组和对照组动物的最终体重以及肾脏、肝脏、肺脏和脾脏的重量均无显著差异,表明该剂量和给药方案下未观察到明显的全身毒性。[1]
参考文献

[1]. Toxicol Rep . 2014:1:309-318.

[2]. Eur J Pharmacol . 2007 Sep 10;570(1-3):38-42.

[3]. Nat Prod Res . 2014;28(22):2040-3.

[4]. J Appl Toxicol . 2008 Jul;28(5):599-607.

[5]. Cancer Lett . 2016 May 28;375(1):114-126.

[6]. Chem Biol Interact . 2015 Jul 25:237:66-72.

[7]. Apoptosis . 2014 Jul;19(7):1148-64.

其他信息
胡椒碱属于肉桂酰胺类化合物,是一种二羧酰亚胺。
据报道,胡椒长碱存在于木胡椒(Piper arborescens)、毛胡椒(Piper puberulum)以及其他有相关数据的生物体中。
另见:长胡椒(部分)。
胡椒长碱 (PPLGM) 是一种源自长胡椒植物的生物活性生物碱。据报道,它能通过提高活性氧 (ROS) 水平选择性地诱导癌细胞死亡,而对正常细胞的影响不显著。本研究证实,无论胰腺癌细胞的 K-ras 突变状态如何(PANC-1 和 MIA PaCa-2 为突变型,BxPC-3 为野生型),它均有效。其作用机制涉及 ROS 诱导的 DNA 损伤,进而激活 DNA 损伤反应(例如 Chk1 磷酸化),最终导致细胞死亡。这些发现支持其作为胰腺癌治疗药物的潜力。[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C17H19NO5
分子量
317.3365
精确质量
317.126
元素分析
C, 64.34; H, 6.03; N, 4.41; O, 25.21
CAS号
20069-09-4
相关CAS号
20069-09-4
PubChem CID
637858
外观&性状
White to yellow solid powder
密度
1.2±0.1 g/cm3
沸点
475.6±45.0 °C at 760 mmHg
熔点
124ºC
闪点
241.4±28.7 °C
蒸汽压
0.0±1.2 mmHg at 25°C
折射率
1.581
LogP
2.34
tPSA
65.07
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
5
重原子数目
23
分子复杂度/Complexity
473
定义原子立体中心数目
0
SMILES
O(C([H])([H])[H])C1C(=C(C([H])=C(C=1[H])/C(/[H])=C(\[H])/C(N1C(C([H])=C([H])C([H])([H])C1([H])[H])=O)=O)OC([H])([H])[H])OC([H])([H])[H]
InChi Key
VABYUUZNAVQNPG-BQYQJAHWSA-N
InChi Code
InChI=1S/C17H19NO5/c1-21-13-10-12(11-14(22-2)17(13)23-3)7-8-16(20)18-9-5-4-6-15(18)19/h4,6-8,10-11H,5,9H2,1-3H3/b8-7+
化学名
1-[(E)-3-(3,4,5-trimethoxyphenyl)prop-2-enoyl]-2,3-dihydropyridin-6-one
别名
Piperlongumine; 20069-09-4; SGD66V4SVJ; 1-[(E)-3-(3,4,5-trimethoxyphenyl)prop-2-enoyl]-2,3-dihydropyridin-6-one; Piplartine
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO: 63~100 mg/mL (198.5~315.1 mM)
Ethanol: ~63 mg/mL (~198.5 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.88 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.88 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.55 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。


配方 4 中的溶解度: 2% DMSO+40% PEG 300+2% Tween 80+ddH2O: 5mg/mL

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.1512 mL 15.7560 mL 31.5119 mL
5 mM 0.6302 mL 3.1512 mL 6.3024 mL
10 mM 0.3151 mL 1.5756 mL 3.1512 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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