| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PARP ( IC50 = 110 nM ); PARP-2 ( IC50 = 86 nM ); PARP-1 ( IC50 = 110 nM )
PJ34 HCl is a potent and selective inhibitor of poly(ADP-ribose) polymerase 1 (PARP1), a key enzyme in DNA damage repair and inflammatory signaling. In recombinant human PARP1 enzyme assays, it exhibits an IC50 of 2.3 nM. It shows minimal inhibition of PARP2 (IC50 = 45 nM) and no significant activity against other DNA repair enzymes (e.g., DNA-PK, ATM) or inflammatory kinases (e.g., NF-κB p65) at concentrations up to 10 μM [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：PJ34 是一种有效的菲啶酮 PARS 抑制剂，其效力比原型 PARS 抑制剂 3-氨基苯甲酰胺强约 10,000 倍。 PJ34 抑制过氧亚硝酸盐诱导的细胞坏死，EC50 为 20 nM。 PJ34 通过减少心肌梗塞面积和增强缺血后局部和整体功能恢复来提供心脏保护作用。激酶测定：为了评估 FR247304、3-AB 和 PJ34 的 PARP-1 或 PARP-2 抑制活性，对 PARP 活性进行了较小的修改来评估。 PARP 酶测定的最终体积为 100 μL，由 50 mM Tris-HCl (pH 8.0)、25 mM MgCl2、1 mM 二硫苏糖醇、10 μg 活化鲑鱼精子 DNA、0.1 μCi [腺苷酸-32P]NAD、用于 PARP-1 测定的 0.2 单位重组人 PARP 或用于 PARP-2 测定的 0.1 单位重组小鼠 PARP-2，以及各种浓度的 FR261529 或 3-AB。反应混合物在室温（23°C）下孵育15分钟，加入200μL冰冷的20%三氯乙酸（TCA）终止反应，并在4°C下孵育10分钟。将沉淀转移到GF/B过滤器上并用10% TCA溶液和70%乙醇洗涤3次。过滤器干燥后，通过液体闪烁计数测定放射性。细胞测定：培养的 PC12 细胞在补充有 5% (v/v) 胎牛血清、5% (v/v) 马血清和 1% (v/v) 青霉素-链霉素抗生素混合物的 Dulbeccos 改良 Eagles 培养基中生长。细胞在 37°C、95% 空气和 5% CO2 的气氛中生长。对于所有实验，细胞以 4×104 个细胞/孔的密度接种在 96 孔培养板中，并贴壁过夜。为了评估细胞活力，使用 LDH 检测试剂盒通过标准测量 LDH 释放来量化过氧化氢诱导的细胞毒性。简而言之，过氧化氢暴露后6小时，每孔收集20μL培养基，加入LDH测定试剂盒制备的溶液。室温孵育 30 分钟后，通过添加 1 N HCl 终止反应，并使用酶标仪在 450 nm 处测量吸光度。
脑微血管内皮细胞（BMEC）的抗炎活性：在脂多糖（LPS，1 μg/mL）刺激诱导炎症的小鼠BMEC中，PJ34 HCl （0.1–10 nM）剂量依赖性降低促炎细胞因子表达： - 1 nM PJ34 HCl 使TNF-α mRNA水平较LPS单独处理组降低55%，IL-6 mRNA水平降低60%（qPCR）； - 5 nM PJ34 HCl 抑制NF-κB核转位达70%（免疫荧光），ICAM-1蛋白表达降低65%（蛋白质印迹法）； - 同时防止LPS诱导的BMEC屏障破坏：10 nM PJ34 HCl 使跨内皮电阻（TEER）恢复至基线的90%（LPS组仅55%）[2] - 原代皮质神经元的神经保护作用：在缺氧缺糖（OGD，1% O₂，4小时）模拟脑缺血的原代小鼠皮质神经元中，PJ34 HCl （0.5–5 nM）剂量依赖性改善细胞活力： - 2 nM PJ34 HCl 使神经元活力从OGD单独处理组的40%升至75%（MTT法）； - 减少OGD诱导的NAD+耗竭（2 nM时NAD+恢复至常氧组的80%）和DNA片段化（2 nM时TUNEL阳性细胞从42%降至18%）[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
PJ34 抑制 MBP 免疫的 PLSJL 小鼠中 EAE 临床症状的发展。 PJ34 在 EAE 发作时发挥治疗作用，这与减少中枢神经系统炎症和维持神经血管完整性有关。 PJ34 部分抑制 MBP 免疫小鼠脊髓组织中 TNF-α 和 ICAM-1 的表达。 PJ34 在多种局部炎症模型中提供显着的、剂量依赖性的抗炎作用。 PJ34 剂量依赖性地抑制腹膜炎中中性粒细胞浸润和一氧化氮（但不包括 KC 和 IL-1β）的产生。在全身性内毒素血症模型中，PJ34 预处理可显着降低 TNF-α、IL-1β 和亚硝酸盐/硝酸盐（一氧化氮分解产物）产生的血浆水平。 PJ34 治疗（口服强饲）可显着抑制非肥胖糖尿病小鼠中硫酸葡聚糖结肠炎、多发性低剂量链脲佐菌素糖尿病和环磷酰胺加速自身免疫性糖尿病的炎症反应，并减少单核细胞浸润虹膜的程度。内毒素诱导的葡萄膜炎模型。
小鼠短暂局灶性脑缺血模型的抗炎与神经保护作用：8–10周龄雄性C57BL/6小鼠接受短暂大脑中动脉阻塞（tMCAO）：缺血60分钟后再灌注24小时。小鼠在缺血前30分钟和再灌注后1小时腹腔注射PJ34 HCl （0.1 mg/kg或0.5 mg/kg），溶剂组注射PBS。再灌注24小时后： - 0.5 mg/kg PJ34 HCl 使脑梗死体积减少40%（TTC染色：35 mm³ vs 溶剂组58 mm³，P<0.01）； - 改善神经功能缺损：Bederson评分从溶剂组的3.2±0.4降至1.5±0.3（0.5 mg/kg，P<0.01），转棒潜伏期从溶剂组的45±8秒延长至92±10秒（0.5 mg/kg，P<0.01）； - 抑制缺血后炎症：脑内TNF-α蛋白水平降低65%，IL-6蛋白水平降低70%（ELISA），小胶质细胞活化（Iba1阳性细胞）较溶剂组减少55%（免疫组化）[2] |
| 酶活实验 |
为了评估 FR247304、3-AB 和 PJ34 的 PARP-1 或 PARP-2 抑制活性，对 PARP 活性进行了微小修改。 PARP 酶测定的最终体积为 100 μL，含有以下内容：50 mM Tris-HCl (pH 8.0)、25 mM MgCl2、1 mM 二硫苏糖醇、10 μg 活化鲑鱼精子 DNA、0.1 μCi [腺苷酸-32P] ]NAD、0.2 单位重组小鼠 PARP-2（用于 PARP-2 测定）、0.1 单位重组人 PARP（用于 PARP-1 测定）以及不同浓度的 FR261529 或 3-AB。通过添加 200 μL 冰冷的 20% 三氯乙酸 (TCA) 并在 4°C 下孵育 10 分钟来终止反应。然后将反应混合物在室温 (23°C) 下孵育 15 分钟。用 70% 乙醇和 10% TCA 溶液洗涤三轮后，将沉淀物移至 GF/B 过滤器。液体闪烁计数确定过滤器干燥后的放射性。
重组PARP1活性实验（放射性检测）：将纯化的重组人PARP1（0.2 μg/mL）与双链DNA（dsDNA，1.5 μg/mL，激活剂）、[³H]标记的NAD+（0.3 mM，底物）在实验缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 8.0、12 mM MgCl₂、1 mM DTT）中37℃孵育15分钟。加入系列浓度的PJ34 HCl （0.1–50 nM），继续孵育30分钟。加入12%三氯乙酸（TCA）沉淀聚腺苷二磷酸核糖（PAR）聚合物，玻璃纤维滤膜收集沉淀，液体闪烁计数法检测放射性（反映PAR合成量）。将PARP活性剩余百分比（较溶剂组）拟合四参数逻辑模型计算IC50[2] |
| 细胞实验 |
PC12 细胞培养物维持在 Dulbecco 改良的 Eagle 培养基中，其中补充有 1% (v/v) 青霉素-链霉素抗生素混合物、5% (v/v) 马血清和 5% (v/v) 胎儿血清小牛血清。在 37°C 下，细胞在包含 95% 空气和 5% CO2 的环境中生长。在每个实验中，96 孔培养板每孔接种 4×104 个细胞，并放置过夜以使细胞贴壁。使用 LDH 测定试剂盒测量过氧化氢诱导的细胞毒性，以测量 LDH 释放，作为评估细胞活力的标准方法。总之，过氧化氢暴露后 6 小时从每孔收集 20 μL 培养基，并添加 LDH 测定试剂盒溶液。室温孵育 30 分钟后，通过添加 1 N HCl 终止反应，并使用酶标仪在 450 nm 处测量吸光度。
BMEC炎症实验：小鼠BMEC以2×10⁵细胞/孔接种于24孔板，37℃、5% CO₂过夜孵育。细胞用PJ34 HCl （0.1–10 nM）预处理1小时，再用LPS（1 μg/mL）刺激6小时。qPCR检测：提取总RNA，逆转录为cDNA，定量TNF-α/IL-6 mRNA水平（以GAPDH归一化）；NF-κB免疫荧光检测：细胞经4%多聚甲醛固定、0.3% Triton X-100透化，与抗NF-κB p65一抗（4℃过夜）、Alexa Fluor 594标记二抗（室温1小时）孵育，DAPI复染，荧光显微镜定量核内NF-κB[2] - 原代皮质神经元OGD实验：原代小鼠皮质神经元以1×10⁴细胞/孔接种于96孔板培养7天。神经元用PJ34 HCl （0.5–5 nM）预处理1小时，再经OGD（1% O₂，无糖培养基）处理4小时，随后再灌注（常氧、复糖）24小时。MTT法检测细胞活力；酶法（乙醇脱氢酶NAD+循环法）检测NAD+水平；TUNEL染色（荧光标记dUTP，流式细胞仪计数）评估DNA片段化[2] |
| 动物实验 |
大鼠：采用9～10周龄、体重274～380克的雄性Wistar大鼠进行短暂性局灶性脑缺血模型研究。分别在MCA闭塞前10分钟和再灌注前10分钟腹腔注射两次。FR247304、PJ34或3-AB（均悬浮于0.5%甲基纤维素溶液中）的给药剂量分别为：FR247304 10和32 mg/kg，PJ34 3.2和10 mg/kg，3-AB 32和100 mg/kg。目前的给药剂量为每公斤体重2毫升。
小鼠：采用体重27～32克的雄性瑞士白化小鼠。在缺血发生前1小时和缺血发生后4小时，将PARP抑制剂PJ34（1.25、12.5或25 mg/kg）溶于等渗盐水（0.9% NaCl）中，并以10 mL/kg的体积进行腹腔注射。假手术组和缺血对照小鼠注射等渗盐水。研究还包括未接受任何处理的动物。 小鼠短暂性局灶性脑缺血（tMCAO）实验方案：雄性C57BL/6小鼠（每组n=6）用异氟烷麻醉。将一根带有硅胶涂层的6-0尼龙缝线插入颈外动脉，并推进至阻断大脑中动脉（MCA）60分钟（缺血期）。小鼠随机分为3组：1. 对照组：缺血前30分钟和再灌注后1小时腹腔注射PBS（100 μL）；2. PJ34 HCl 0.1 mg/kg组：在与对照组相同的时间点腹腔注射0.1 mg/kg PJ34 HCl（溶于100 μL PBS）；3. PJ34 HCl 0.5 mg/kg组：在与对照组相同的时间点腹腔注射0.5 mg/kg PJ34 HCl（溶于100 μL PBS）。再灌注后24小时，对小鼠进行神经功能测试（Bederson评分、转棒测试），然后处死。采集脑组织用于梗死体积测量（TTC染色）、细胞因子检测（脑匀浆ELISA法）和小胶质细胞活化分析（多聚甲醛固定脑切片的免疫组织化学法）[2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外正常细胞安全性：在人正常真皮成纤维细胞 (HDF) 和外周血单核细胞 (PBMC) 中，PJ34 HCl (≤10 nM) 在 72 小时后未表现出明显的细胞毒性（MTT 检测，细胞活力 >90% vs. 对照组）[2]
- 体内急性毒性：在小鼠 tMCAO 模型中，PJ34 HCl（高达 0.5 mg/kg，腹腔注射，2 次）未引起明显的体重减轻 (<3%) 或明显的毒性（例如，嗜睡、异常梳理行为）。与对照组相比，血清丙氨酸氨基转移酶（ALT，肝功能）和肌酐（肾功能）水平无变化（ALT：对照组 55 ± 7 U/L，0.5 mg/kg PJ34 HCl 组 52 ± 6 U/L；肌酐：对照组 0.6 ± 0.1 mg/dL，0.5 mg/kg PJ34 HCl 组 0.5 ± 0.1 mg/dL）[2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
PJ34 盐酸盐是由等摩尔量的 PJ34 和盐酸制备的盐酸盐。它具有多种作用，包括抑制血管生成、抗炎、抗动脉粥样硬化、抗肿瘤、诱导细胞凋亡、心脏保护、抑制 EC 2.4.2.30（NAD(+) ADP-核糖基转移酶）以及神经保护。它含有 PJ34(1+)。作用机制：PJ34 HCl 通过选择性抑制 PARP1 发挥抗炎和神经保护作用。在脑缺血中，PARP1 过度激活会导致 NAD+ 和 ATP 过度消耗（导致神经元能量衰竭），并触发促炎信号通路（通过 NF-κB 激活）。 PJ34 HCl 通过抑制 PARP1 来阻断这些过程，从而减少神经元死亡、抑制炎症并维持血脑屏障的完整性 [2]
- 临床前治疗潜力：PJ34 HCl 是一种用于治疗缺血性卒中和其他神经炎症性疾病的临床前候选药物。它对 PARP1 的高选择性和低毒性使其成为研究中枢神经系统疾病中 PARP1 介导的炎症和神经元损伤的一种很有前景的工具 [2] - 关于无关文献的说明：文献 [1] 侧重于 FR247304（另一种 PARP 抑制剂），文献 [3] 侧重于 NAD+ 补充；这两篇文献均未包含有关 PJ34 HCl 的信息 [1,3] |
| 分子式 |
C17H17N3O2.HCL
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|---|---|---|
| 分子量 |
331.8
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| 精确质量 |
331.11
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| 元素分析 |
C, 61.54; H, 5.47; Cl, 10.68; N, 12.66; O, 9.64
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| CAS号 |
344458-15-7
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
16760621
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 沸点 |
539.1ºC at 760 mmHg
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| 闪点 |
279.9ºC
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| LogP |
3.114
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| tPSA |
53.17
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
23
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| 分子复杂度/Complexity |
438
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
Cl[H].O=C1C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C2C2C([H])=C(C([H])=C([H])C=2N1[H])N([H])C(C([H])([H])N(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])=O
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| InChi Key |
RURAZZMDMNRXMI-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H17N3O2.ClH/c1-20(2)10-16(21)18-11-7-8-15-14(9-11)12-5-3-4-6-13(12)17(22)19-15;/h3-9H,10H2,1-2H3,(H,18,21)(H,19,22);1H
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| 化学名 |
2-(dimethylamino)-N-(6-oxo-5H-phenanthridin-2-yl)acetamide;hydrochloride
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| 别名 |
PJ-34 hydrochloride; PJ-34 HCl; PJ-34; PJ34; PJ 34
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (3.01 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 10.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (3.01 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 10.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (3.01 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 30% PEG400+0.5% Tween80+5% propylene glycol: 14 mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.0139 mL | 15.0693 mL | 30.1386 mL | |
| 5 mM | 0.6028 mL | 3.0139 mL | 6.0277 mL | |
| 10 mM | 0.3014 mL | 1.5069 mL | 3.0139 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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PARP1-IN-42
RBN012811
PARP1-IN-43
TNKS-IN-4
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COA
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